試驗短報
木質纖維材料應用於重金屬污染物質
之移除
許富蘭
1廖秀娟
2 （收件日期：民國94 年 10 月 31 日、接受日期：民國 95 年 1 月 16 日） 【摘要】由於全球人口急速成長及工商業的快速發展，環境污染的問題日益嚴重。污染 物的型式有空氣污染、土壤及地下水污染、水污染、廢棄物污染、毒物及藥物污染等； 或依污染物種類簡單分為有機污染物及無機污染物等兩大類。無機污染物中以重金屬對 人類健康及生態之危害最為嚴重，重金屬因具有不能被生物降解之特性，故會慢慢累積 於生物體內及食物鏈中，其危害廣大而持久，因此，尋求更經濟有效之重金屬清除方法 實有迫切之必要。木質纖維材料因含有大量可與金屬結合之官能基，且具有成本低廉、 來源豐富、符合資源再生利用之特性，具有作為移除環境污染物質之潛力。本篇回顧比 較各種木質纖維原料間移除重金屬污染物之能力，並綜合比較經化學處理及生物科技處 理後之木質纖維材料移除重金屬污染物質之效能與特性。 【關鍵詞】生物吸附、重金屬、木質纖維材料、金屬硫蛋白、植物螯合素REMOVAL OF HEAVY METAL CONTAMINANTS BY
LIGNOCELLULOSE
Fu-Lan Hsu1 Vivian Hsiu-Chuan Liao2 （Received: October 31, 2005; Accepted: January 16, 2006）
【Abstract】In recent years, the presence of toxic heavy metals in the environment has
emerged as a major concern on a global scale. Heavy metals can be distinguished from other toxic pollutants, since they are not biodegradable and tend to be accumulated in living tissues, causing various diseases and disorders. Conventional methods for removing metals from in-dustrial effluents such as chemical precipitation, solvent extraction, electrolysis, membrane
1 行政院農業委員會林業試驗所森林化學組助理研究員、國立台灣大學森林環境暨資源學系研究所博士班研究生。
Assistant Researcher, Forest Chemistry Division / Forestry Research Institute Council of Agriculture, Executive Yuan. Graduate Student, School of Forestry and Resource Conservation, National Taiwan University.
2 國立台灣大學生物環境系統工程學系助理教授，通訊作者。
separation, ion exchange, and adsorption are either too expensive or not suitable for large volume of low metal concentration wastewater. Therefore, a cost effective alternative tech-nology or sorbent is needed. Lignocellulose that is available in large quantities is a cheap, rapidly renewable material. Additionally, because of its multiple functional groups, it has high potential as inexpensive sorbents. This paper reviewed the potential of the metal removal ca-pabilities of different natural lignocellulose through chemical or biochemical modification. 【Key words】 Biosorption, Heavy metals, Lignocellulose, Metallothioneins, Phytochelatins
I、前言
由於全球人口急速成長及工商業的快 速發展，環境污染的問題日益嚴重。污染 物的型式有空氣污染、土壤及地下水污 染、水污染、廢棄物污染、毒物及藥物污 染等，或依污染物種類簡單分有機污染物 及無機污染物（Walker et al., 1991）。有機 污染物如農業廢水中因施肥、噴灑殺蟲劑 等所含氮、磷有機化合物或燃燒廢棄物產 生多氯聯苯等；無機污染物可分為氮、磷 之無機化合物及重金屬等（Walker et al., 2001），其中以重金屬的危害最為嚴重。 由於污染物質對人類、生物甚而整個生態 皆有危害，因此如何防治污染已成為全球 面臨的重大課題。 重金屬原本即存在於自然環境中，多 半是因為人類的工業行為而成為污染，如 工業廢水、金屬電鍍、採礦行為、半導體 生產等皆可能成為重金屬污染源。因為具 有非生物降解（non-biodegradable）之特 性，故若未經適當處理即排放，會慢慢累 積於生物體內及食物鏈中，對環境生態及 人類健康有很大的負面影響，其危害廣大 而持久。以鉛為例，其存在土壤之滯留時 間可達150-5000 年之久（Shaw, 1990）， 因此在處理時不可不慎。 台灣重金屬污染狀況，環保署於2002 年度辦理「農地土壤重金屬調查與場址列 管計畫」中，針對縣市環保局所提報農地 重金屬污染已達第五級（含鎘、汞大於 1 mg/L）者，進行細密樣區之污染調查與採 樣分析，完成每一筆地號農地之土壤重金 屬含量清冊與污染源相關資料面積合計 319 公頃（環保署, 2002）；此外，台灣主 要和次要河川受到重金屬污染的長度，已 達台灣河川總長度的 40.5 %（環保署, 2003），範圍相當廣泛。 受重金屬污染的 農地土壤及河川可進一步造成食用作物及 飲用水中的重金屬超過含量標準，若長期 暴露及攝取，將對生命健康造成嚴重危 害，因此亟需對土壤及水源之重金屬污染 加以移除。II、重金屬之危害及移除方法
一般來說，重金屬元素中有許多如 銅、鋅、錳等是生物體內參與許多生化反 應之酵素之必要元素，以植物為例，一旦 缺乏這些元素，其生長將受阻礙；但若土 壤中這些金屬濃度太高則反而造成根系發 育異常、葉片產生斑點、黃化、產量降低 甚而完全枯死等缺點；而一些金屬如鎘、 汞等則為非必須元素。至於一些對重金屬 的耐受力較高之農作物，其植物體內可累 積相當量之重金屬，消費者一旦食用後，將嚴重危害其健康及生命。類似的事件層 出不窮，如1984 年發生於桃園縣蘆竹鄉的 鎘米事件或1950 年發生在日本汞污染造成 的水俁病（Minamata disease）等。 傳統移除重金屬的方法相當多，如沈 澱法（precipitation）、以合成樹脂進行離 子交換法（ion exchange with synthetic res-ins）、吸附法（adsoption）、薄膜分離法
（membrane separation）、逆滲透法（reverse
osmosis）、氧化還原法（oxidation-reduction） 等。其中以沈澱法最為廣泛使用，但此方 法並不能有效將污染水中重金屬濃度降至 放流水標準；而離子交換法、薄膜過濾法 及活性炭吸附法移除重金屬的效果雖然良 好，但若大規模施行於污染源現場則有成 本太高之缺點（Chu and Hashim, 2000）， 因此尋找一低成本且有效之移除重金屬物 質，已成為刻不容緩的課題。
III、天然生物吸附物質
生物材料因具有資源豐富、材料來源 容易獲得（農業副產品或廢料可大量從工 廠獲得）、成本低廉、無須太多處理等特 性，較前述的活性炭法或離子交換法等適 合應用在大規模移除低濃度重金屬環境； 且生物材料主要由蛋白質、碳水化合物、 多 酚 類 等 物 質 組 成 ， 含 有 大 量 的 羧 基 （carboxyl），氫氧基（hydroxyl）及胺基 （amino ） 等 可 與 金 屬 結 合 之 官 能 基（metal-binding functional groups）（Bailey
et al., 1999），因此極適合作為吸附重金屬
的材料。這種以生物材料作為吸附污染物 質之方法稱為生物吸附法（biosorption）， 提供不同於傳統移除重金屬的另一種選
擇，相關研究範圍相當廣泛，如葡萄梗 （grape stalk）、花生皮（peanut skin）、
核 果 外 殼 （nut shell ） 、 泡 過 的 咖 啡
（exhausted coffee）、廢棄茶渣（waste tea） 等。從自然界尋求木質纖維材料以作為吸 附物質的相關文獻相當多，茲綜合整理如 表1。因為影響重金屬吸附的因子眾多（如 金屬離子種類、金屬濃度、pH 值、溫度、 時間等）且各文獻皆以不同條件進行試 驗，因此不建議直接比較表中各生物材料 之吸附效果，應視實際情況而定。 木質纖維材料（如樹皮、木質素等） 的 成 分 因 含 有 很 多 極 性 官 能 基 ， 如 醇
（alcohols）、醛（aldehydes）、酮（ketones）、
酸（acids）、酚（phenolics）、酯（ethers） 及單寧（tannins）等被視為吸附過程中之 有效官能基，其中含有多量酚類化合物、 單寧等物質之生物材料為最具潛力者。因
此，花生皮（peanut skins）、椰子殼（coconut
husk）、廢茶渣（waste tea）、咖啡等高單 寧物質其吸附能力皆極佳，僅略次於高成 本之活性炭。不同樹種之吸附效果有很大 差異：如Šćiban 與 Klašnja（2004）曾比較 白楊、柳、櫟、洋槐及冷杉等五種不同樹 種之木粉及以木材為基質之產品（如紙漿 及木質素）對銅、鋅、鎘、鎳等離子吸附 效果，發現闊葉樹之吸附效果普遍優於針 葉樹；成分間則木質素優於以纖維素為主 之紙漿。此外亦有研究顯示，在30℃時， 木質素對鉛有 1587 mg/g 之吸附效果；對 鋅有73 mg/g 之吸附效果；當溫度提高時 則吸附效果更佳（Srivastava et al., 1994）。 Bryant 等人（1992）則比較紅杉木粉及α-纖維素對銅、鉻離子吸附之潛力，發現α-
表1 不同生物材料之重金屬吸附效果之比較
Table 1 Summary of adsorption capacities (mg/g) of heavy metals for different biomaterials
生物材料 重金屬吸附量(mg/g)＊ 資料來源 鎳 鋅 銅 砷 鎘 (Cd2+) 鉻 (Cr3+) 鉻 (Cr6+) 汞 (Hg2+) 鉛 (Pb2+) 樹皮 (Bark) 美洲黑櫟 26 400 153.3 Masri et al., 1974 花旗松 100 Masri et al., 1974
紅杉 28, 32 250 9, 182 Masri et al., 1974; Randall et al., 1974a,b
法國海岸松 8 20 3, 2 Teles de Vasconcelos and González
Beça, 1993, 1994; Vázquez et al., 1994
歐洲赤松 23-44 33 9 48-83 Alves et al., 1993; Palma et al., 2003
處理之歐洲赤松 10 Alves et al., 1993
落羽松 16 Aoyama and Tsuda, 2001
葉 (Leaf) 紅杉 175 Masri et al., 1974 銀杏 5 Aoyama et al., 2000 鐵刀木 250 Masri et al., 1974 松針 175 Masri et al., 1974 木粉(Sawdust)
木粉 6.2 12 10 16 9 8 Chubar et al.,2004; Dikshit, 1989
以染料處理木粉 18 24 Shukla and Sakhardande, 1992
磺酸化木粉 21 30.1-40.1 31.1-41.4 Flynn et al., 1980
木質素(Lignin)
木質素 73 1857 Srivastava et al., 1994
硫酸化木質素 150 Masri et al., 1974
竹 (Bamboo)
竹漿 9 8 Shukla and Sakhardande, 1992
以染料處理竹漿 16 15 Shukla and Sakhardande, 1992
黃麻 (Jute)
黃麻 7.6 7.9 Shukla and Sakhardande, 1992
以染料處理黃麻 13.7 14.1 Shukla and Sakhardande, 1992
農業廢棄物
橙皮(內部白色皮) 125 Masri et al., 1974
橙皮(外部橙色皮) 275 Masri et al., 1974
甲醛處理花生皮 74 205 Randall et al., 1978
胡桃殼 2 1 Orhan and Büyükgüngör, 1993
咖啡渣 1 2 Orhan and Büyükgüngör, 1993
改良咖啡渣 11 13.4 31.2 39.5 19.5 Boonamnuayvitaya et al., 2004
甘蔗渣 80 Peternele et al., 1999
廢茶渣 2 2 Orhan and Büyükgüngör, 1993
稻米殼 29 21 164 108,11 Wong et al., 2003; Roy et al., 1993
其它
改良羊毛 87 17 632 135 Masri and Friedman, 1974
海藻 332,269 Matheickal and Yu, 1999
改良海藻 378 Leusch et al., 1995
纖維素的吸附效能僅為紅杉木粉 1/10。另 外，Basso 等人（2002）曾將拉丁美洲所大 量 生 產 農 業 廢 棄 物 如 巴 西 水 果 核 殼 （Bertholettia excelsa）、蘆葦莖部（Arundo donax）、甘蔗渣、Prosopis ruscifolia 木粉 與市售活性炭對鎘、鎳離子之吸附效果進 行比較，其試驗結果發現巴西水果核殼吸 附鎘離子及鎳離子之效果最好，此與其成 分中含有高含量之木質素及表面酸性官能 基（TOFG, total amount of surface acidic functional group）有關。 因生物吸附的過程亦可能牽涉到物理 反應或化學反應，有研究探討由木材處理 廠所提供之紅松樹皮廢料對鐵離子之吸附 模式（Bilal, 2004），發現此吸附過程為一 次可逆反應，且測得反應過程具低熱焓量 （low enthalpy）及低活化能（low activation energy）之特性，顯示紅松樹皮對鐵離子之 吸附過程為物理反應。
IV、經化學改良之生物吸附物質
纖維素乃自然界中最為豐富的自然資 源，因成本低、來源充裕且易加工成型應 用於現場，雖本身重金屬移除能力不佳， 但藉由化學改良賦予含硫官能基（如硫酸 處理、染料、黃酸鹽化等）、含氮官能基 （如胺基）以增加吸附效果。因此以α-纖 維素為基質，進行改良以作為吸附重金屬 物質仍極具潛力。其中，黃酸鹽（xanthates） 為含硫之官能基，其特性為對重金屬有很 高的親和力，對較輕的金屬親和力弱，意 即具有對重金屬之專一性，再加上此化學 改良法易於操作且所使用藥劑成本低，因 此有研究將纖維素與玉米澱粉（Bricka andHill, 1989）或木粉（Flynn et al., 1980）加 以黃酸鹽化，改良後試材皆展現良好吸附 效果，惟效果會隨使用時間（含硫基被逐 漸氧化）而降低（47 天降低 18 %）。同樣 地，因棉花的成分中有90 %是纖維素，在 沒有改良的情況下其吸附重金屬效果極 差，故有研究將棉花接上胺基以增加其移 除汞金屬能力，試驗結果發現改良棉花的 吸附效果與所接上胺基之量成正比，其對 汞金屬可達1000 mg/g 之吸附效果（Roberts and Rowland, 1973）。 另外，亦有研究測試松樹樹皮應用在 移除酸性銅礦區廢水中重金屬的可能性， 研究結果發現松樹樹皮因富含具有吸附重 金屬能力之多酚類，故極適宜作為移除重 金屬之材料，但是酚類化合物易被淋洗萃 取出來，有將廢水染色之缺點，藉由酸性 甲醛（acidified formaldehyde）法將放射松 樹皮之單寧及多酚類以化學改良法固定 後，測其吸附各種離子效果。結果顯示未 進行化學改良時，木質素之金屬吸附效果 較樹皮好；試材經改良後，樹皮及木質素 之吸附能力皆大幅提升，唯改良之樹皮的 吸附效果仍較改良木質素差。此外，該試 驗並比較連續管柱法（continuous adsorp-tion on a packed column）與批次試驗法 （batchwise experiment）之吸附效果，發現 連續管柱法更能發揮改良樹皮的吸附功 效。最後以1-5 M 之硫酸將吸附後之樹皮 單寧中的重金屬加以脫附（desorption）， 發現鎘、鐳、鉛的脫附效果很差，但汞、 鉬、鋁、銅的效果好，顯示從改良樹皮中 回收具價值的重金屬是可行的，惟仍有待 更完整的配套方法之開發（Palma et al., 2003）。
V、基因工程生物吸附物質
生物吸附法是一新興且有效移除低濃 度重金屬之方法。除上述之生物材料外， 自然界中亦存有許多生物值得師法與利 用：如一些酵母菌（yeast species ）具有吸 附鎘離子與鉻離子之能力（Zielinski et al., 2001）；另一種方法即利用金屬結合胜肽 （metalbinding peptides）來螯合金屬，如 已知之天然存在之重金屬螯合胜肽有金屬 硫蛋白（metallothioneins, MTs） 及植物體 內之植物螫合素（phytotchelatins, PCs）等； 此外，亦可以以人工合成的方式來製造人 工 合 成 植 物 螯 合 素 （synthetic phytoche-latins），這類金屬螯合胜肽具有高度的專 一性，可作為特定金屬回收之用，非常具 有潛力。 金屬硫蛋白具有 61-74 個胺基酸，富 含半胱胺酸（cysteine），每一個金屬硫蛋 白可以結合七個二價陽離子如鎘、鉻、鋅 等（Hamer, 1986）。有研究將人類之 MT 藉 由 麥 芽 糖 結 合 蛋 白 （maltose binding protein）（ pmal ） 固定系統於 大腸桿菌 （Eschelichia coli）大量表達產生蛋白質。 純 化 所 得 之 pmal-MT 再 固 定 在 ChitopearlTM樹脂上以方便操作使用。經測 試，此合成之樹脂具有吸附鎘離子及鎵離 子能力，且吸附過程符合Langmuir-type 方 程式。對鎵離子而言，有效之吸附位置以 氨基酸上的氧原子及氮原子為主；對鎘離 子而言，有效之吸附位置以半胱胺酸為 主。這種合成樹脂因極為穩定且可以藉由 酸液將所吸附之金屬回收，故可重複使 用，為很好之移除重金屬材料（Terashima et al., 2002）。 植物可透過一連串之機制來處理重金 屬之毒性問題，方法之一乃藉由植物體內 之植物螫合素，因其具有與金屬結合功能 之胜肽，可與重金屬進行螯合。PCs 之基 本結構為 (r-Glu-Cys)n-Gly (n= 2~11)，由植 物螫合素合成酶（phytochelatin synthase） 所合成，當金屬離子侵入植物細胞時，會 破壞胞內酵素，這時PCs 會和金屬離子結 合形成低分子量的複合體以迅速解除金屬 毒害，之後再將這些金屬複合體運送到液 胞中加上硫形成較穩定的結構。令人意外 的是這些植物螫合素亦可從某些細菌、 麴、藻類、線蟲中取得（Cobbett, 2000; Ahner et al., 1994）。 具有重複的金屬結合單位 (Glu-Cys)(n) Gly 之人工合成植物螯合素，可藉由合成方 式取得，其與重金屬結合之能力甚至比 MTs 佳，單獨使用這類胜肽已成功地移除 環境中污染物質，但礙於這些物質製作過 程冗長、純化耗費高成本或因此類物質無 法固定於一系統而產生效果不穏定的現 象，故遲遲未能應用於現埸而未獲廣泛重 視。因為純化這類金屬螯合胜肽應用在移 除環境污染物質具有上述之缺點，故亦有 不純化而直接將含這類物質之整個細胞應 用在移除環境污染物質之技術的產生。惟 此時污染物質必須透過細胞膜方能與此類 具功能胜肽作用，故細胞膜反成為一限制 因子，因此有研究將金屬螯合胜肽固定在 細胞表面大量表達，則重金屬不需穿過細 胞膜，可直接在細胞膜表面被螯合固定住 （Bae et al., 2002）；或藉由共同表達金屬 傳輸系統（metal transport system）協助金 屬順利進入細胞膜與有效胜肽結合（Bae etal., 2001, 2002）。原細菌並無結合重金屬 的功能，但經基因改造後，則具有結合及 累積重金屬之能力，證實基因改造之細菌 作為移除重金屬之生物材料實極具潛力。 亦有研究比較胜肽長度對人工合成之 植物螯合素螯合金屬能力之影響。將n = 8, n = 11, n = 20 不同長度之（Glu-Cys）(n)Gly 藉 Lpp-ompA 基因融合表現在 E. coli 表 面，試驗結果發現EC20每單位胜肽螯合鎘 離子的數量要比哺乳類之金屬硫蛋白高， 亦比 EC8之螯合能力強，其金屬螯合能力 與胜肽長度成正相關。此關係有利於精準 設計出適用於特殊污染環境下所需之人工 合成之植物螯合素（Bae et al., 2000）。 除了上述藉由金屬螯合胜肽大量表達 於E. coli 的方式，亦有研究從土壤裡篩選 出具金屬螯合能力之細菌，培養在高金屬 濃度環境下，刺激具與金屬結合功能之蛋 白質之生成，發現有14 ％增生效果，所產 生之蛋白質中，分子量為40 kDa 者具有吸 收 多 種 重 金 屬 之 功 能 （Antsuki et al., 2003）。 近年來，已開發許多具有親合力之標 記 （ t a g ） 系 統 ， 如 六 個 組 胺 酸 （hexahistidines），麩胱胺酸-S-轉移酵素 （glutathione S-transferase），或麥芽糖結 合蛋白等，可以將純化及固定兩程序一次 完成，節省大量時間，惟成本仍相當高。 有研究從一些專門分解纖維素之細菌中， 分離出對纖維素有高之親合性之功能區 （Cellulose-binding domains, CBDs），作為 上述高價之tag system 取代品。其原理乃利 用該細菌為求有效與纖維素結合以獲得充 足營養的特性。將具有金屬螯合能力之胜 肽與 CBDs 融合後所得之蛋白質，具有主 動固定到纖維素基質之特質。此方法不需 昂貴之周邊系統且纖維素價格十分便宜， 可以做成各種形式以方便應用。從不同細 菌所獲得之 CBDs 對纖維素的親和力不 同：例如從Clostridium cellulovorans 得到 之 CBDclos 與纖維素會產生不可逆之鍵
結；而從Cellulomonas fim 得到之 CBDcenA
與纖維素之結合較鬆散，會被沖提出來。 試驗結果發現CBDclos 法非常適合應用在 管柱形式以反覆進行重金屬之移除（Xu et al., 2002）。
VI、結論
木質纖維材料具有低成本、資源豐 富、材料來源容易獲得、無須太多處理、 生物可降解及符合綠色材料之概念等特 性，且成分因含有含很多可與金屬結合之 官能基，為天然的重金屬吸附劑，極適合 應用在大規模移除重金屬環境。除此之 外，纖維素乃自然界中最為豐富的自然資 源，雖吸附重金屬能力不佳，但適合作為 生物科技、化學處理及加工成型之基質。 值此全球環保聲浪日漲之際，應即早 開發低成本、可裂解、安全之吸附材料、 減少有害物質對於環境之危害、創造一永 續與健康潔淨家園，為尋求低成本之吸附 物質，許多物質之吸附污染物能力，及其 經化學及生技改良後之應用潛力等的相關 研究已受到相當重視，惟國內亦應針對現 有之資源加以積極開發。VII、引用文獻
環 保 署 土 壤 及 地 下 水 污 染 整 治 網（2002）。行政院環境保護署（2002）。 台北。(http://ww2.epa.gov.tw/SoilGW/)。
環保署92 年河川年報（2003）。行政院
環境保護署。台北。
Acemioglu, B. (2004) Removal of Fe (II) ions from aqueous solution by Calabrian pine bark wastes. Bioresource Technol. 93: 99-102.
Ahner, B. A., N. M. Price and F. M. Morel (1994) Phytochelatin production by ma-rine phytoplankton at low free metal ion concentrations: laboratory studies and field data from Massachusetts Bay. Proc Natl. Acad. Sci. U. S. A. 91 (18): 8433- 8436.
Alves, M. M., C. G. González Beça, Guedes de Carvalho R., J. M. Castan-heira, M. C. Sol Pereira and L. A. T. Vasconcelos (1993) Chromium re-moval in tannery wastewaters ''polish-ing'' by Pinus sylverstris bark. Water Res. 27(8): 1333-1338.
Antsuki, T., D. Sano and T. Omura (2003) Functional metal-binding proteins by metal-stimulated bacteria for the devel-opment of an innovative metal removal technology. Water Sci. Technol. 47 (10): 1009-1015.
Aoyama, M., M. Tsuda, N. S. Cho and S. Doi (2000) Adsorption of trivalent chromium from dilute solution by coni-fer leaves. Wood Sci. Technol 34: 55-63.
Aoyama, M. and M. Tsuda (2001) Re-moval of Cr (VI) from aqueous solutions
by larch bark. Wood Sci. Technol 35: 425-434.
Bae, W., W. Chen, A. Mulchandani and R. K. Mehra (2000) Enhanced bioaccumu-lation of heavy metals by bacterial cells displaying synthetic phytochelatins. Biotechnol. Bioeng. 70 (5): 518-524. Bae, W., R. K. Mehra, A. Mulchandani and
W. Chen (2001) Genetic engineering of Escherichia coli for enhanced uptake and bioaccumulation of mercury. Appl. Environ. Microbiol. 67 (11): 5335-5338. Bae, W., A. Mulchandani and W. Chen
(2002) Cell surface display of syn-thetic phytochelatins using ice nuclea-tion protein for enhanced heavy metal bioaccumulation. J. Inorg. Biochem. 88 (2): 223-227.
Bailey, S. E., T. J. Olin, R. M. Bricka and D. D. Adrian (1999) A review of po-tentially low-cost sorbents for heavy metals. Wat. Res. 33 (11): 2469-2479. Basso, M. C., E. G. Cerrella and A. L.
Cukierman (2002) Lignocellulosic materials as potential biosorbents of trace toxic metals from wastewater. Ind. Eng. Chem. Res. 41: 3580-3585.
Boonamnuayvitaya, V., C. Chaiya, W. Tanthapanichakoon, and S. Jarudilokkul (2004) Removal of heavy metals by adsorbent prepared from pyrolyzed cof-fee residues and clay. Sep. Purif. Tech-nol. 35: 11-22.
Bricka, R. M. and D. O. Hill (1989) Metal immobilization by solidification
of hydroxide and xanthate sludges. In: Coà teÂ, P. L. and T. M. Gilliam (eds) Environmental Aspects of Stabilization and Solidification of Hazardous and Ra-dioactive Wastes, ASTM STP 1033, 257-272 pp.
Bryant, P. S., J. N. Petersen, J. M. Lee and T. M. Brouns (1992) Sorption of heavy metals by untreated red fir saw-dust. Appl. Biochem. Biotechnol. 34-35: 777-788.
Chu, K. H. and M. A. Hashim (2000) Adsorption of copper (II) and ETDA- chelated copper (II) onto granular acti-vated carbons. J. Chem. Technol. Bio-technol. 75: 1054-1060.
Chubar, N., J. R. Carvalho and M. J. N. Correia (2004) Cork biomass as bio-sorbent for Cu(II), Zn(II) and Ni(II). Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng. Aspects 230: 57-65.
Cobbett, C. S. (2000) Phytochelatin biosynthesis and function in heavy-metal detoxification. Curr. Opin. Plant Biol. 3: 211-216.
Dikshit, V. P. (1989) Removal of chro-mium (VI) by adsorption using saw-dust. Nat. Acad. Sci. Lett. 12 (12): 419-421. Flynn, C. M. Jr., T. G. Carnahan and R. E.
Lindstrom (1980) Adsorption of heavy metal ions by xanthated sawdust. Report of Investigations # 8427. United States Bureau of Mines.
Hamer, D. H. (1986) Metallothionein. Annu. Rev. Biochem. 55: 913-951.
Holan, Z. R., B. Volesky and I. Prasetyo (1993) Biosorption of cadmium by biomass of marine algae. Biotechnol. Bioeng. 41(8): 819-825.
Leusch, A., Z. R. Holan and B. Volesky (1995) Biosorption of heavy metals (Cd, Cu, Ni, Pb, Zn) by chemically- re-inforced biomass of marine algae. J. Chem. Tech. Biotechnol. 62: 279-288. Masri, M. S., F. W. Reuter and M.
Fried-man (1974) Binding of metal cations by natural substances. J. Appl. Polymer Sci. 18: 675-681.
Masri, M. S. and M. Friedman (1974) Effect of chemical modification of wool on metal ion binding. J. Appl. Polymer Sci. 18: 2367-2377.
Matheickal, J. T. and Q. Yu (1999) Biosorption of lead (II) and copper (II) from aqueous solution by pre-treated biomass of Australian algae. Biore-source Technol. 69: 223-229.
Orhan, Y. and H. Büyükgüngör (1993) The removal of heavy metals by using agricultural wastes. Water Sci. Tech. 28(2): 247-255.
Palma, G., J. Freer and J. Baeza (2003) Removal of metal ions by modified
Pinus radiata bark and tannins from
water solutions. Water Res. 37: 4974- 4980.
Peternele, W. S., A. A. Winkler- He-chenleitner and E. A. G. Pineda (1999) Adsorption of Cd(II) and Pb(II) onto functionalized lignin from sugar cane
bagasse. Bioresource Technol. 68: 95-100.
Randall, J. M., R. L. Bermann, V. Garrett and A. C. Jr. Waiss (1974a) Use of bark to remove heavy metal ions from waste solutions. Forest Prod. J. 24(9): 80-84.
Randall, J. M., E. Hautala and A. C. Jr. Waiss (1974b) Removal and recy-cling of heavy metal ions from mining and industrial waste streams with agri-cultural byproducts. Proceedings of the Fourth Mineral Waste Utilization Sym-posium. Chicago, IL, May 7-8, 1974, 329-334 pp.
Randall, J. M., E. Hautala and G. McDon-ald (1978) Binding of heavy metal ions by formaldehyde-polymerized pea-nut skins. J. Appl. Polymer Sci. 22(2): 379-387.
Roberts, E. J. and S. P. Rowland (1973) Removal of mercury from aqueous solu-tions by nitrogen-containing chemically modified cotton. Envir. Sci. Technol. 7 (6): 552-555.
Roy, D., P. N. Greenlaw and B. S. Shane (1993) Adsorption of heavy metals by green algae and ground rice hulls. J. En-virons. Sci. Health. A 28(1): 37-50.
Šćiban, M. and M. Klašnja (2004) Wood sawdust and wood originate ma-terials as adsorbents for heavy metal ions. Holz Roh Werkst. 62: 69-73. Shaw, A. J. (1990) Heavy metal
toler-ance in plants: evolutionary aspects. AJ,
CRC Press, Florida.
Shukla, S. R. and V. D. Sakhardande (1992) Column studies on metal ion removal by dyed cellulosic materials. J. Appl. Polymer Sci. 44: 903-910.
Srivastava, S. K., A. K. Singh and A. Sharma (1994) Studies on the uptake of lead and zinc by lignin obtained from black liquor- a paper industry waste ma-terial. Environ. Technol. 15: 353-361. Teles de Vasconcelos, L. A. and C. G.
González Beça (1993) Adsorption equilibria between pine bark and several ions in aqueous solution, 2. Cd(II), Cr(III) and H+. Eur. Water Poll. Control 3(6): 29-39.
Teles de Vasconcelos, L. A. and C. G. González Beça (1994) Adsorption equilibria between pine bark and several ions in aqueous solution, 1. Pb(II). Eur. Water Poll. Control 4(1): 41-51.
Terashima, M., N Oka, T. Sei and H. Yo-shida (2002) Adsorption of cadmium ion and gallium ion to immobilized met-allothionein fusion protein. Biotechnol Prog. 18(6): 1318-1323.
Vázquez, G., G. Antorrena, J. González and M. D. Doval (1994) Adsorption of heavy metal ions by chemically modified Pinus pinaster bark. Biore-source Technol. 48: 251-255.
Xu, Z., W. Bae, A. Mulchandani, R. K. Mehra and W. Chen (2002) Heavy metal removal by novel CBD-EC20 sorbents immobilized on cellulose.
Biomacromolecules. 3: 462-465.
Walker, C. H., S. P. Hopkin, R. M. Sibly and D. B. Peakall (2001) Principles of Ecotoxicology (2nd). Taylor and Francis, London, 3-22 pp.
Wong, K.K., C.K. Lee, K.S. Low and M.J. Haron (2003) Removal of Cu and Pb by tartaric acid modified rice husk from
aqueous solutions. Chemosphere 50: 23-28.
Zielinski R., K. Kubinski, E. Stefaniak and R. Szyszka (2001) Heavy metals biosorption from aqueous solution by simple eucaryotic organisms. Folia His-tochem. Cytobiol. 39(2): 154-155.
