生物性肥料在有機洋香瓜應用研究Studies on Application of Biofertilizers in Production of Organic Muskmelons
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(2) 生物性肥料在有機洋香瓜應用研究. 高土壤中養分之有效性、增進根系之生長與養分之吸收、保護根系及增進抗逆境 能力等,均可稱之為 「微生物肥料」 應用 (楊 1990;古和黃 1994)。 農友大量施用農用化學物質造成土壤劣化與污染,影響土壤微生物多樣性, 使生物制衡能力降低。土壤微生物是自然界中推動各種元素循環之最基層的生 物。近年來,隨著生物技術的崛起,土壤微生物所扮演的角色日趨重要,目前國 內已研發應用推廣之微生物肥料有根瘤細菌、溶磷菌及菌根菌等,根據試驗調查, 豆類接種根瘤細菌或瓜類作物育苗接種叢枝菌根菌,皆可提高土壤營養分之供應 及有效性,替代部份化學肥料,非但可節省肥料投入之成本,提高單位面積產量, 增加農民收益,且可充分運用微生物資源,減緩農業生產對自然生態平衡及環境 之衝擊 (楊 1990;黃 2009a)。 叢枝菌根菌. (arbuscular mycorrhizal fungi, AMF) 屬 於 接 合 菌 綱. (Zygomycetes) 、繡球菌目 (Glomales),是一種存在土壤中能與 90%陸地植物根部 形成共生關係的有益真菌 (Smith & Read 1997)。叢枝菌根菌能促進作物生長與增 加產量,可視為是一種生物性肥料 (Azcon & El-Atrash 1997;黃等 2010,2011), 尤其在一些逆境環境下菌根效果更為明顯 (Al-karaki 2000;Nzanza et al. 2012)。因 此相較於一般減少環境壓力對作物生產的方法,為植物接種叢枝菌根菌似乎不失 為另一較為便捷可行的自然方式。叢枝菌根菌是一類絕對共生菌 (obligately symbiotic fungi) ,要真正大量應用,必須先有適合之菌種與充足的接種源,並將 接種工作導入正常的栽培生產程序中,其接種操作必須簡單,感染效率要高,且 增產效果顯著,才能有足夠經濟效益 (鄔 2003)。自 1951 年代 Barbara Mossee 於 英國開始倡導果樹的菌根研究以來,學者們即不斷探討利用菌根菌於農業生產上 之可行性。在蔬菜方面,叢枝菌根菌無法感染十字花科蔬菜,且對生長期長、栽 培面積大的作物,如茄科、葫蘆科等果菜類蔬菜應用潛能較高,這些作物大多均 需育苗,呂 (1994) 及呂等 (1995) 指出,適當控制穴盤育苗條件可成功大量生產 番茄及番椒菌根苗,鄔 (2003) 在其博士論文也指出,介質中混入 1/3 有機質肥料 或每週施 1,000 倍之花寶四號溶液,能有效培育健壯的叢枝菌根苗。 蚓糞堆肥 (vermicomposting) 的製作技術已知為可將廢棄物藉由蚯蚓及微生 物的作用,而轉變成無臭味且具較高植物養分、微生物生質量,土壤酵素和較低 有害化合物的類似腐植質的產物 (Contrears-Ramos et al. 2005)。許多研究結果顯示 141.
(3) 溶磷菌肥料肥 (功) 效評估及驗證研討會專刊. 蚓糞堆肥有多重功能,可以刺激植物的營養吸收,促進植物的生長與根系的形成, 有效提高植物的生產力與產量,對氮、磷、鉀具有吸附功能,可以緩慢且持續地 提供植物養份,且蚓糞裏含有大量有益植物之放射菌及酵素。學者試驗顯示於甜 瓜育苗介質添加適量蚓糞堆肥促進甜瓜幼苗發芽與生長 (Manh & Wang 2014)。 在臺灣推行有機蔬菜栽培,必須面對臺灣氣候的高溫多濕,因此面對頗多的 挑戰與困難,包括針對適合有機栽培之蔬菜品種或種類的研究較少。一般有機栽 培農戶偏好短期可採收的葉菜類蔬菜栽培為主,使消費者對有機農產品選擇相當 有限,尤其在有機果菜類及長期蔬菜更是極為有限 (戴等 2012)。 甜瓜為臺灣重要經濟作物之一,常遭遇根瘤線蟲 (Meloidogyne incognita) 為 害,根部產生纍纍根瘤,阻礙地上部枝蔓之生長,影響產量與品質至鉅,尤見於 砂質壤土之連作田。學者指出叢枝內生菌根高度形成的根段,可減少根瘤線蟲侵 染的空間,減少線蟲所造成之傷害 (程等 2001)。 鑑於囊叢枝內生菌根菌與瓜果類作物有良好之親和性,易感染形成囊叢枝內 生菌根,產生有益效應。因此,本計畫擬探討合理有機土壤肥培管理與生物性肥 料使用,對洋香瓜生育影響評估,達到健康臺灣,優質農業的目標。. 材料與方法 一、不同配方育苗介質添加叢枝菌根菌對作物育苗之影響 取洋香瓜種子播種於 104 格 (3 × 3 × 4 cm3) 穴盤中,不同配方介質包括瓜類 育苗介質包括細椰纖 (coconut shell fiber, CSF)、泥炭 (peat moss, PM) 及蛭石 (vermiculite, V;廠牌:南海 2 號);蚓糞堆肥 (Vermicompost, VC)。育苗介質處理 為細椰纖:蛭石 (v/v;1:2) (2) 細椰纖:蛭石 (v/v;1:2) 與蚓糞堆肥,(3) 泥炭: 蛭石 (v/v;1:2),4.泥炭:蛭石 (v/v;1:2) 與蚓糞堆肥等 4 種;叢枝菌種為 Glomus mosseae 菌種,不接種為對照組。每穴處理接種量為 1 g 孢子土 (約 100 spores/g), 混合於介質,育苗二週後,每處理取 5 株苗檢測感染率與鮮、乾重。 二、不同配方育苗介質培育之洋香瓜穴盤菌根苗之田間栽培試驗 種植前先行採取土壤分析,進行施肥量調整,洋香瓜施肥量依據作物施肥手 冊,施肥量(公斤/公頃) :氮素 110-150、磷酐 210-250、氧化鉀 160-200。試驗品 142.
(4) 生物性肥料在有機洋香瓜應用研究. 種秋作為臺南 12 號,夏作為臺南 13 號,不同配方介質包括泥炭:蛭石 (v/v;1:1) 未接菌,泥炭:蛭石 (v/v;1:1) 接菌、泥炭:蛭石 (v/v;1:1) 加蚓糞堆肥與泥炭: 蛭石 (v/v;1:1) 加蚓糞堆肥與接菌等 4 處理,叢枝菌種為 Glomus mosseae 菌種, 不接種為對照組。每穴處理接種量為 1 g 孢子土 (約 100 spores/g),混合於介質, 試驗設計採逢機完全區集設計 (RCBD),4 區集,每小區 21 m2,株距 50 cm,40 株。調查項目包括植株生長勢、植體分析、果實產量與品質分析,土壤化學性分 析調查。 三、分析方法 (一) 菌根感染率檢測 洋香瓜菌根苗根洗淨以 2.5% (w/v) KOH 軟化,再以 0.05% 酸性品紅 (fuchsin) 進行染色。染色後再以格子線法求其感染率 (吳和林 1998)。 (二) 土壤分析 土壤分析於臺南本場土壤肥料研究室進行導電度、pH、有機質含量及主 要與次要元素測定。茲將分析方法敘述如下: 1. 導電度 (electrical conductivity) 測定 秤取樣品 15 g 放入小型玻璃杯內,加蒸餾水 75 ml (樣品與水之比為 1:5) 作成懸浮體,過濾後,以導電度計 (US597 型) 測定之 。 2. pH 測定 秤取樣品 15 g 加蒸餾水 75 ml (樣品與水之比為 1:5) 作成懸浮體,以 pH meter (TOA,HM-30V 型) 測定之。 3. 有機質含量測定: 秤取樣品 0.1 g 放入石英杯,加 1 滴 5% phosphate,在烘箱以 250℃ 烘 5 min 後以固體總有機碳分析儀測定 (TOC,吉偉儀器-SYSTEMATIC 型號: Model - 1020A,美國製) 。 4. P 的測定:以鉬藍法 (Bray No.1) 測定。 5. K、Ca、Mg 測定 以 Mehlich No. 3 抽出後以感應偶合電漿光譜儀 (Inductively Coupled Plasma Emission Spectrophotometer, ICP; JY ULTIMA 2)。 (三) 糖度檢測 143.
(5) 溶磷菌肥料肥 (功) 效評估及驗證研討會專刊. 榨汁後取汁液滴入以手持式糖度計 (廠牌:Master,日本製) 直接檢測。 (四) 鮮乾重檢測 新鮮和乾葉重量 (g),新鮮和乾根重量 (g)。在 80℃烘箱中乾燥下 48 h (所 需要的時間,以獲得恆定的重量) ,測定乾重。 (五) 植體分析方法參考 Methods of Soil Analysis (Bigham & Bartels 1996 ) 植體經 70℃ 烘乾 48 h。以磨碎機 (榮聰牌 RT-04,1200 W,25000RPM) 將樣品磨 碎,養分總量分析,氮為烘乾粉碎後直接以元素分析儀 (Elementar vario EL Ⅲ) 進行測定,磷、鉀、鈣、鎂為取烘乾植體經濕式分解後, 磷以鉬藍法測 定,鉀、鈣、鎂、鈉以感應電漿水譜儀 (Inductively Coupled Plasma Emission Spectrophotometer, ICP,JY ULTIMA 2 ) 測定之並以標準溶液校正。. 結果與討論 一、不同配方栽培介質添加叢枝菌根菌對作物育苗之影響 菌根菌並沒有宿主專一性 (host specificity),不同菌種與宿主植物間接種效益 會隨組合不同而有所差異,因此宿主、菌種、生長環境的組合是菌種試驗首要考 慮的條件 (吳和林 1988)。莊和程 (1999) 以河砂為介質混合不同比例的泥炭繁殖 菌根菌,顯示泥炭混合量越高,菌根的感染率則愈低,孢子的產生也有相同的趨 勢,且泥炭用量在 33 及 55% 的處理,甚至未有孢子產生。不同配方介質與菌種 對洋香瓜育苗之菌根苗感染率,發現菌根感染以細椰纖:蛭石混合感染率最高 55.4 %,泥炭:蛭石次之,而以泥炭:蛭石加蚓糞堆肥最低,感染率僅 43.4% (表 1)。 生長勢以泥炭:蛭石與蚓糞堆肥最優,細椰纖:蛭石最低,亦發現以細椰纖與蛭 石為介質作物生長勢低於泥炭:蛭石,此可能為此細椰纖與蛭石配方養分含量較 低所致 (表 2)。上述資料顯示兩育苗介質添加蚓糞堆肥菌根苗有較佳生長勢,而苗 感染率均降低,可能因介質含較高養分影響菌根感染。 二、不同配方育苗介質培育之洋香瓜穴盤菌根苗之田間栽培試驗 菌根菌可從根毛侵入根部,並將菌絲伸出根外,菌絲可分解土壤中的有機物, 並吸收無機養分、低分子有機物和水分,促進生長,提昇移植存活率,增加產量 與品質 (楊 1990;吳和林 1998;Nzanza et al. 2012)。洋香瓜栽培已經在臺南及高 144.
(6) 生物性肥料在有機洋香瓜應用研究. 表 1. 不同配方介質與菌種對作物育苗之菌根苗感染率情形 Table 1. Lists infection rates of seedlings inoculated with AMF in differt growth medium over 4 weeks. Inoculants. Colonization rate (%). CSF:V (v/v;1:2) G.m CSF:V (v/v;1:2) G.m + VC PM:V (v/v;1:2) G.m PM:V (v/v;1:2) G.m + VC. 55.4 ± 3.3 48.4 ± 2.8 52.5 ± 3.1 43.4 ± 2.5. G.m: Glomus mosseae. 表 2. 不同配方介質與菌根菌對作物育苗之植株生長情形 Table 2. Lists growth conditions of seedlings inoculated with AMF in differ growth medium Inoculants CSF:V (v/v;1:2) G.m CSF:V (v/v;1:2) G.m + VC PM:V (v/v;1:2) G.m PM:V (v/v;1:2) G.m + VC. Fresh weight (g). Dry weight (g). 6.85 ± 0.15 10.6 ± 0.56 9.78 ± 0.21 15.1 ± 0.82. 0.75 ± 0.02 1.17 ± 0.06 1.08 ± 0.02 1.66 ± 0.09. G.m: Glomus mosseae. 雄地區應用菌根菌接種,獲得良好成效 (程等 1993,2001;黃 2004;黃等 2009b), 內生菌根植株能促進根群發育,增加根部對磷肥等要素之吸收能力,促進植株生 長,與對照比較可提早七天開花結果與採收,並提高果品品質。惟黃等 (2010) 試 驗其中一處接種菌根菌有負面效果產生,因土壤養分產生拮抗性,作物缺鎂導致 葉片黃化,進而影響植株光合成產物產生。王 (2007) 指出叢枝體將菌本身用不完 的水與養分送出至菌絲外,再由宿主細胞膜主動或被動吸收;而宿主植物葉片光 合作用產物經篩管運送至根部,於皮層細胞具叢枝體處主動排出或滲漏至膜外之 中間界面,再由叢枝體吸收作為菌根菌之碳素營養來源。因叢枝菌根菌需宿主植 物提供光合產物,故任何影響光合產物的因素自然也會影響叢枝菌根發展與功 能,當土壤與施肥管理不當均會影響接種菌根菌植株之效益。 秋作進行不同育苗介質試驗,調查顯示接種菌根菌與蚓糞堆肥可以促進洋香 瓜幼苗生長勢 (圖 1),秋作定植後植株生長勢,以接菌+蚓糞堆肥處理最高,未接 菌處理最低 (表 3),並進行植體採樣分析,以瞭解處理養分吸收情形,由葉片分析 資料顯示蚓糞堆肥與接菌+蚓糞堆肥兩處理鉀離子濃度較未接菌處理低;接菌、蚓 145.
(7) 溶磷菌肥料肥 (功) 效評估及驗證研討會專刊. 糞堆肥與接菌+蚓糞堆肥三處理之鈣與鎂離子濃度較未接菌處理高,鈉離子含量則 以未接菌處理最高,其他三處理均有降低情形,此與作者前試驗接種菌根菌可以 提昇甜瓜耐鹽分逆境能力相符 (表 4)。調查果實產量與品質分析,果實產量與糖度 均接菌+蚓糞堆肥處理最高,未接菌處理最低,分別高 9.4 % 與 0.6 °Brix (表 5)。. 圖 1. 接種菌根菌與蚓糞堆肥可以促進洋香瓜幼苗生長勢 (右二起) Fig 1. Inoculating. arbuscular. mycorrhiza. and. vermicompost. promote. the. of. growingmuskmelon (second from the right to left) 表 3. 不同介質處理對洋香瓜生育影響 (秋作) Table 3. The influence of different growth medium on the arbuscular mycorrhizal muskmelon growth. (Autumn cropping) Inoculants 未接菌 接菌 蚓糞堆肥 接菌+蚓糞堆肥. Plant height (cm) 176 ± 4.5 184 ± 8.7 186 ± 8.7 188 ± 5.2. No. of leaf 22 ± 0.27 22 ± 0.65 23 ± 0.45 23 ± 0.34. 表 4. 不同介質處理對洋香瓜葉片元素之影響 (秋作) Table 4. The influence of different growth medium on leaves mineral elements content of muskmelon plants. (Autumn cropping) Inoculants 未接菌 接菌 蚓糞堆肥 接菌+蚓糞堆肥. N (g kg-1) 45.4 ± 2.2 45.0 ± 2.9 44.9 ± 2.6 45.6 ± 4.2. P (g kg-1) 5.3 ± 0.1 5.3 ± 0.0 5.3 ± 0.4 5.2 ± 0.2. K (g kg-1) 39.0 ± 0.7 38.8 ± 2.3 34.3 ± 0.8 32.5 ± 2.0. 146. Ca (g kg-1) 45.5 ± 5.1 51.0 ± 6.7 50.0 ± 1.7 49. 2 ± 1.6. Mg (g kg-1) 8.0 ± 0.3 9.0 ± 0.4 9.3 ± 0.7 8.8 ± 0.2. Na (mg kg-1) 1,899 ± 71 1,702 ± 82 1,429 ± 123 1,416 ± 136.
(8) 生物性肥料在有機洋香瓜應用研究. 夏作進行不同育苗介質試驗調查植株生長勢,接菌+蚓糞堆肥 (70 g) 處理最 高,未接菌處理最低 (表 6)。進行植體採樣分析資料顯示接菌與接菌+蚓糞堆肥兩 處理之鉀與鈣離子濃度較未接菌處理高,鈉離子含量則以未接菌處理最高,其他 三處理均有降低情形 (表 7) 。調查產量與果實品質分析,果實產量與糖度均接菌 +蚓糞堆肥 (50 g) 處理最高,未接菌處理最低,分別高 7.2 % 與 0.9 °Brix (表 8)。 表 5. 不同介質處理對菌根洋香瓜產量與品質影響 (秋作) Table 5. The influence of different growth medium on the arbuscular mycorrhizal muskmelon growth and yield and quality. (Autumn cropping). 未接菌. Yields (kg/0.1ha) 2,119 ± 58. Soluble solids (°Brix) 14.5 ± 0.27. 接菌. 2,184 ± 37. 15.1 ± 0.12. 蚓糞堆肥. 2,269 ± 27. 15.0 ± 0.15. 接菌+蚓糞堆肥. 2,319 ± 23. 15.1 ± 0.18. Inoculants. 表 6. 不同介質處理對洋香瓜生育影響 (夏作) Table 6. The influence of different growth medium on the arbuscular mycorrhizal muskmelon growth. (Summer cropping) Plant height (cm) 137 ± 6.7. Inoculants 未接菌. No. of leaf 18 ± 0.92. 接菌. 139 ± 2.3. 18 ± 0.29. 接菌+蚓糞堆肥 (50 g). 142 ± 3.0. 19 ± 0.48. 接菌+蚓糞堆肥 (70 g). 148 ± 3.0. 19 ± 0.37. 表 7. 不同介質處理對洋香瓜葉片元素之影響 (夏作) Table 7. The influence of different growth medium on leaves mineral elements content of muskmelon plants. (Summer cropping) N -1 (g kg ). P -1 (g kg ). K -1 (g kg ). Ca -1 (g kg ). 未接菌. 33.1 ± 2.6. 5.1 ± 0. 3. 33.2 ± 0.6. 56.4 ± 1.8. 12.0 ± 0.8 1,836 ± 92. 接菌. 35.7 ± 3.3. 5.3 ± 0.2. 36.0 ± 1.5. 59.8 ± 1.9. 11.9 ± 0.7 1,540 ± 106. 接菌+蚓糞堆肥 (50 g). 33.9 ± 2.6. 5.4 ± 0.4. 34.3 ± 0.5. 60.0 ± 1.7. 12.2 ± 0.7 1,429 ± 123. 接菌+蚓糞堆肥 (70g). 33.7 ± 2.4. 5.1 ± 0.2. 33.2 ± 1.0. 56.3 ± 1.4. 12.5 ± 1.4 1,437 ± 107. Inoculants. 147. Mg -1 (g kg ). Na -1 (mg kg ).
(9) 溶磷菌肥料肥 (功) 效評估及驗證研討會專刊. 表 8. 不同介質處理對菌根洋香瓜產量與品質影響 (夏作) Table 8. The influence of different growth medium on the arbuscular mycorrhizal muskmelon growth and yield and quality. (Summer cropping). 未接菌. Yields (kg/0.1ha) 3,620 ± 69. Soluble solids (°Brix) 17.6 ± 0.2. 接菌. 3,800 ± 73. 17.8 ± 0.3. 接菌+蚓糞堆肥 (50 g). 3,880 ± 71. 18.5 ± 0.5. 接菌+蚓糞堆肥 (70 g). 3,750 ± 65. 17.7 ± 0.4. Inoculants. 結論 本試驗瞭解接種不同菌根菌與配方介質對不同作物感染及苗期生育健化情形 並進一步瞭解定植穴植盤菌根苗生長情形。不同配方介質與菌種對洋香瓜育苗之 菌根苗感染率,發現菌根感染以細椰纖:蛭石混合感染率最高 55.4%,泥炭:蛭石 次之,而以泥炭:蛭石加蚓糞堆肥最低,感染率僅 43.4%。生長勢以泥炭:蛭石與 蚓糞堆肥最優,細椰纖:蛭石最低,亦發現以細椰纖與蛭石為介質作物生長勢低 於泥炭:蛭石,此可能為此細椰纖與蛭石配方養分含量較低所致。 進行不同育苗介質試驗調查顯示植株生長勢,以接菌+蚓糞堆肥處理最高,未 接菌處理最低,並進行植體採樣分析,以瞭解處理養分吸收情形,由葉片分析資 料顯示蚓糞堆肥與接菌+蚓糞堆肥兩處理鉀離子濃度較未接菌處理低;接菌、蚓糞 堆肥與接菌+蚓糞堆肥三處理之鈣與鎂離子濃度較未接菌處理高,鈉離子含量則以 未接菌處理最高,其他三處理均有降低情形,此與作者前試驗接種菌根菌可以提 昇甜瓜耐鹽分逆境能力相符,促進果實產量與品質。. 誌謝 感謝研究助理施惠淇小姐協助田間管理與試驗記錄工作,及土壤肥料研究室 同仁協助各項檢測分析,使得本試驗得以圓滿執行完成。. 148.
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(12) 生物性肥料在有機洋香瓜應用研究. Studies on Application of Biofertilizers in Production of Organic Muskmelons Jui-Chang Huang1,* and Wen-Jin Jiang2. Abstract Endomycorrhizae has been used is seedling nursery. However, this practice should be supplemented with appropriate amount of fertilizers. Now, no cultural medium or growth medium containing mycorrhiza is available on market. The experiment was attempted to develop appropriate composition of growth medium to low down the supplement of various amount of fertilizers. Results of muskmelon experiments indicated that best infection rate i.e.55.4% of the plants infected mycorrhiza was found in the growth medium containing coconut shell fiber (CSF): vermiculite (V), and the least in the medium with peat moss (PM): V with vermicompost i.e.43.4%. Best growth of muskmelon one month after planting was observed in the medium with PM: V with vermicompost plus inoculation of Gm inoculation, and lowest growth in the medium with CSF: V plus inoculation of Gm inoculation. Best growth of muskmelon one month after planting was observed in the medium with vermicompost plus inoculation of Gm , and without inoculation is the lowest. Another tests also showed that inoculation of Gm increased Ca2+ and Mg2+ absorption and decreased Na+ absorption. If the plants were inoculated, Na+ concentration was decreased, It means that inoculation may disturb absorption of Na+. Demonstration areas through inoculation can promote nutrient absorption, reduced sodium ion uptake, if they were compared with the control group, but yields and total soluble solids increased. Keywords: Biofertilizer; Mycorrhiza; Vermicompost; Organic agriculture; Muskmelon. *. Corresponding author, e-mail: [email protected] Associate Researcher, Tainan District Agricultural Research and Extension Station, Tainan, Taiwan, ROC. 2 Assistant Researcher, Tainan District Agricultural Research and Extension Station, Tainan, Taiwan, ROC. 1. 151.
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