人類血型

血型鑑定 & 血液抹片製作

劉佩芬老師 高雄醫學大學

生物醫學暨環境生物學系

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實驗背景介紹

 19世紀初期就有醫師使用輸血的技術拯救失血的病人，

但有時卻造成病人的死亡。

 西元1900年奧地利醫生蘭德斯坦納（Karl Landsteiner , 1868～1943）及其學生，將不同人的血液相混合，發現 有些混合的血液會有凝集現象。不同血型間進行輸血時，

可因紅細胞表面抗原與血清中天然血型抗體結合產生凝 集反應，在補體存在時，可發生溶血現象。故臨床上給 病人輸血時，必須先鑑定血型，同時需進行交互配血試

驗,以複查有無錯誤或有無亞型存在。 圖6-23 奧地利的醫 生蘭德斯坦納

人類血型

[新文京] 生物學（第五版） / 顏子玉3

https://www.youtube.com/watch?v=Dd8GbZZvpVM (4:44)

 紅細胞、白細胞、血小板各有自己複雜 的抗原系統和血型分類方法，但臨床血 型主要指紅細胞血型。

 自1901年發現ABO血型系統以來，迄今 已發現的人類紅細胞血型系統至少有30 個，但在臨床輸血工作中最重要的還是 ABO血型系統。

 ABO血型系統根據人類紅細胞表面A抗 原和B抗原的分佈，將人類分為A型、B 型、AB型與O型四個血型。

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血型分型

 血型的種類是由紅血球細胞的抗原(antigen)決定。

 每個人的血漿中都不含與自身紅血球細胞表面 抗原相對抗的抗體。

1) A型者：血漿中只含有抗體B

2) B型者：血漿中只含有抗體A

3) AB型者：血漿中不含抗體A及抗體B

4) O型者：血漿中含有抗體A及抗體B

半乳糖 5 岩藻糖

葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖

葡萄糖 葡萄糖

葡萄糖

乙醯半乳糖胺 乙醯葡萄糖胺

 細胞膜上所含的不同抗原和遺傳基因有關。

 ABO血型是由三個等位基因I^A、I^B、i 決定其性狀。

血型遺傳

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[新文京] 生物學（第五版） / 顏子玉

 ABO血型的基因位置：

決定ABO血型的基因是位於第九對染色體上，且是 由三個等位基因組成，具有六種不同組合的基因型

（I^AI^A、I^Ai、I^BI^B、I^Bi、I^AI^B及ii）

 體染色體的遺傳。

https://zhuanlan.zhihu.com/p/2919729037

A型夫婦（I^Ai × I^Ai）所生的子代

基因型有三種，其比例為 I^AI^A：I^Ai：ii＝1：2：1 表現型有兩種，其機率為 A型：O型＝ 3／4：1／4

圖6-24 人類的血型遺傳：A型父親與A型母親所生子女的可能血型有A型及O型。

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2.

1.

例如:

[新文京] 生物學（第五版） / 顏子玉

血液凝集

 鑑定血型是利用抗原A和抗體A（抗A血清）相遇會凝集，

抗原B和抗體B（抗B血清）相遇會凝集的原理。

 檢驗情形如下：在一載玻片的兩邊，先分別加上一滴不 同的抗體（A、B），再加上受驗者的血液。

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 每個人的血漿中都不含與自身紅血球 細胞表面抗原相對抗的抗體。

1) A型者：血漿中只含有抗體B

2) B型者：血漿中只含有抗體A

3) AB型者：血漿中不含抗體A及抗體B

4) O型者：血漿中含有抗體A及抗體B

wiki/凝集素

抗原A 抗原B

抗原A,抗原B (X) 抗體A,抗體B

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血液

(2) 血漿略呈淡黃色，其成分中約90%是水，7～8%是血漿 蛋白，其餘為養分、廢物或氣體等。 血漿中的蛋白質種類 繁多，如抗體、激素、酵素等，具有各種重要功能。

55%

45%

https://www.youtube.com/watch?v=yKIUPHHCkAI (2:48)

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wiki/造血幹细胞

血球分化

人體的血液由紅血球、白血球、血小板和血漿組成。紅血 球為雙凹圓盤狀，無核，直徑約 7-8μm。白血球可依其型 態與功能分為下列數種：

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血球

出自: 高醫大生物系實驗課講義

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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白血球

單核球多核球

血型鑑定

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實驗材料與步驟介紹

實驗材料

載玻片、酒精棉、採血針、抗 A抗原抗體(anti-A antibody)、

抗B抗原抗體(anti-B antibody)

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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實驗步驟

 1. 取酒精棉擦拭、局部消毒指尖採血部位，並待酒精自然揮發

 2. 以採血針自消毒指尖採血，由第二指節向指尖方向輕握施壓，使血液自 採血處自然滲出，並將流出之第一滴血液拭去不用

 3. 分別滴兩滴血液於載玻片上

 4. 取一滴anti-A抗體與一滴anti-B抗體分別與上述兩滴血液混合，以牙籤輕 微攪拌後，觀察凝集反應，判別血型

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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血液抹片製作

(免疫血球細胞觀察)

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實驗原理與技術介紹

實驗材料

載玻片數片、酒精棉、採血針、顯微鏡、

劉氏染劑(Liu’s stain)

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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劉氏染劑 (Liu stain):

酸性染料伊紅 (Liu A)鹼性染料亞甲藍 (Liu B)

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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LiuA含有Eosin Y(伊紅)，可將 細胞質、 血紅蛋白、嗜酸性顆 粒(嗜酸性物質)等染成紅色。

LiuB則含有methylene blue (亞甲 藍)，可和細胞核蛋白、嗜鹼性白 血球與淋巴細胞胞漿(嗜鹼性物質) 作用，染成藍紫色。

http://youthyear.blogspot.com/2010/08/liu-stain.html

實驗步驟

 1. 準備乾淨載玻片兩片至數片

 2. 取酒精棉擦拭、局部消毒指尖採血部位，並待酒精自然揮發

 3. 以採血針自消毒指尖採血，由第二指節向指尖方向輕握施壓，

使血液自採血處自然滲出，並將流出之第一滴血液拭去不用

 4. 立即將一小滴血液滴於載玻片一側離邊緣約 1公分處

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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 5. 迅速將另一片載玻片以

40~45度夾角接觸滴有血液之

 6. 將上方之載玻片維持傾斜角 度朝原相反方向快速而穩定推 出，使血液均勻塗抹於載玻片 上

 7. 將抹片自然陰乾後染色

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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染色步驟 (Liu stain)



1. 以Liu A 染劑均勻覆蓋於血液抹片30秒



2. 直接加上Liu B染劑，與Liu A 染劑混合均勻後靜置90秒

（Liu B染劑的量需為 Liu A 染劑的兩倍）



3. 以細微流水將抹片上之染劑及沉澱物沖掉



4. 將染色完成之血液抹片陰乾後，即可置於顯微鏡下觀察

出自: 高醫大生物系實驗課講義

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