Date
2009 基因工程技術原理實驗進度表
值日組09/17 Check in
09/24* Culture E. coli DH5 (pCU1) in 3 ml LB (Amp), and E. coli DH5 (pBluescript SK+) in LB
(Amp) at 37oC overnight for plasmid DNA isolation.(前一天養菌,隔天收菌進行 Exp.3) (1) Plasmid (pCU1 and pBluescript SK+) isolation (Exp. 3),
(2) Restriction enzyme digestion (Exp. 5)
(隔天收並存於 4oC 供下一周使用，plasmid 存於-70oC 供下周使用)
G 1
10/01(1) Gel electrophoresis (Exp. 6), and construction of pCU1 restriction map (2) Restriction enzyme digestion of pCU1 and pBluescript SK+ (vector) (Exp. 7) (隔天收並存於 4oC 供下一周使用)
G2
10/08(1) Gel electrophoresis, and extraction of a DNA fragment from agarose gel. (Exp. 7).
(2) pBluescript SK+ phenol extraction, and ethanol precipitation (存於 4oC 供下一周使 用)
G3
10/15* Culture E. coli DH5 in 5 ml LB at 37oC overnight for competent cell preparation.(實
驗前一天準備)
(1) CIAP of pBluescript SK+ and fill-in DNA fragment from pCU1 (Exp. 8).
(2) Ligation of a DNA fragment from pCU1 to pBluescript SK+ vector with CIAP treated
(Exp. 9). (存於 4oC 供下一周使用). 6
(3) Competent cell preparation (Exp. 10). (存於-70oC 供下一周使用)
G4
10/22(1) Transformation by heat shock and plate on LA (Amp). Incubate at 37oC overnight (Exp.11). (隔天觀察並存於 4oC)
G5
10/29(1) Amplified DNA fragment and check the results of ligation by PCR (Exp. 12) (存於-70oC 供製備 DNA Probe 使用).
G6
11/05 實驗期中考 G1
11/12 期中考週
11/19(1) Total DNA isolation (Exp.13), restriction enzyme (EcoRI or HindIII) digestion.
(隔天收並存於 4oC 供下一周使用).
G2
11/26(1) Gel electrophoresis, and transfer DNA from gel to membrane for Southern blot analysis (Exp. 15). (隔天收並存於 4oC 供 hybridization 使用)
(2) DNA probe preparation (Exp. 16) (隔天收並存於 4oC 下一周沉澱).
G3
12/03(1) DNA probe preparation (酒精沉澱) (Exp. 16)
(2) Dot blotting. (Exp.14), (membrane 保存於 4oC 以供後續實驗)
G4
12/10* Culture E. coli BL21 (DE3)(pET29a-A) in 3 ml LB (kanamycin), at 37oC overnight.
(前一天養菌,隔天收菌進行 Exp.18).
(1) Gene expression in E.coli and SDS polyacryamide gel electrophoresis of protein.
(Exp.18)(SDS-page 作好存於 4oC ,sample 煮沸後存在-70oC 供下一周電泳使用).
G5
12/17(1) SDS polyacryamide gel electrophoresis of protein. (Exp.18).
(2) Southern hybridization (Exp.16 , Exp. 14) (隔天收並存於 4oC 下一周呈色).
G6
12/24(1) Color development of Southern blotting and dot blotting.(Exp. 17 ) (2) check out
12/31 實驗數據及實驗分析（各組上台報告）
01/06 實驗期末考
基因工程實驗 (營養科學系)
(一) 上課時間、地點：
時間：每星期四上午8 :30 開始點名 (不補點名) 地點：LS301 教室
(二) 實驗規則：
1. 準時到堂上課，中途離開需先告知助教 2. 實驗桌上不可堆放書包衣物並保持清潔 3. 實驗室內禁止抽煙、吃東西、喝飲料 4. 學生於實驗期間，一律穿著實驗衣
5. 每組於實驗完畢需將實驗結果給助教簽退才可離開 6. 每組使用完畢之實驗器具交值日組簽收
7. 請珍惜實驗儀器及物品，如有損壞照價賠償，並扣期末分數五分。
(三) 作業：
1. 準備 A4 活頁紙
2. 上課前應預習實驗內容，以備小考
3. 實驗結果及紀錄於實驗結束時，交助教簽退 4. 結報由小助教統一收齊繳交至助教辦公室 123R
(遲交一日扣 10 分，遲交三日以上則該次作業不予計分)
5. 講義之後的問題及需於每次上課後各組自行討論解題，期中期末大小考由此出題，
並於適當的時間，請負責各部分的小組上台解題 6.作業內容：
本實驗課為二到三次實驗交一次結報，可不附預報，但須將各實驗之操作紀錄詳細 預報：
A.實驗名稱 B. 目的 C.實驗步驟(Procedure) 結報：
D. 實驗紀錄 [Data record]
E. 結果 [Result]
F. 討論 [Discussion]-結果討論、問題、相關資料補充 G..參考資料 [Reference]-書名、作者、出版社、頁數 (四) 計分方式：
期中考 (含小考) 30 % 期末考試 (含小考)30 % 作業
（含報告） 25 % 實驗精神（含出席） 15 %
註1：點名不到者，超過 20 分鐘以曠課論；曠課三次即扣考
註2：請假注意事項：事假需事先請，病假可於當日請 (必須附上請假證明單) (五) 每週值日組負責工作：
1. 借音箱鑰匙及 LS301 鑰匙 (A 或 C 門) (系辦午休時間 12:00~PM1:00 勿打擾) 2. 抄黑板
3. 當日實驗組需最後離開
助教：周宜芳 分機:3594 LS301 Lab：3727
4. 負責實驗室總清理，實驗器材歸位
5. 於前一週簽退時與助教約時間準備藥品及實驗課當天早上 08:00 至 LS123 找助教 6. 值日生工作結束後通知下一值日組
