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探討不同添加物對蛹蟲草生長的影響

第四章 實驗結果

第二節、 探討不同添加物對蛹蟲草生長的影響

實驗中配方 1 為本實驗室於 2012 年發表於 Cell Death & Disease 國際 期刊,已證實其配方活性。將基礎培養配方與配方一互相比較由表三發 現,配方 2 及配方 3 之成長直徑無統計差異,但在成長速度比配方 1 快 速且生物量(Biomass)可增加成長量。在表三發現配方 5 有抑制蛹蟲草菌 絲 體 成 長 的 情 形 , 所 以 在 後 續 研 究 將 不 在 納 入 探 討 。

2-1 討論維他命 A(Vitamin A)添加對蛹蟲草生長的影響

維他命可分為水溶性及脂溶性,水溶性的維他命容易經由代謝流失,

而脂溶性維他命不容易經由代謝流失,會停留於細胞內。本實驗使用脂 溶性維他命 A(Vitamin A),探討對於維他命 A 對蛹蟲草菌絲體的成長影 響。

由表四及圖四分別是在蛹蟲草四種基礎培養基配方中加入 1-2%維他 命 A(Vitamin A),在不同天數下。觀察蛹蟲草生物量及直徑紀錄圖表。隨 著固態培養天數增加,發現只有在基礎培養基 HKS2 配方組有統計差異,

可 增 加 蛹 蟲 草 菌 絲 體 成 長 直 徑 及 速 度 , 其 餘 配 方 組 皆 會 降 低 蛹蟲草菌絲體生長速度。但在基礎配方 1 中添加維他命 A(Vitamin A)後 配方 6 及 7,雖然沒有統計差異,但生物量(Biomass)卻是有明顯提高,

又 以 添 加 1 % 維 他 命 A ( V i t a m i n A ) 為 佳 。

表四、蛹蟲草在不同基礎培養基配方加入維他命 A(Vitamin A)之成長

1 CM 0.0176 2.023

R²=0.9954

6 CM+

1%A 0.0332 1.821

R²=0.9982

7 CM+

2%A 0.0318 1.814

R²=0.9976

2 HKS1 0.0348 1.767

R²=0.9920

3 HKS2 0.0226 1.475

R²=0.9861

4 HKS3 0.0914 2.132

R²=0.9818

Day

圖四、蛹蟲草在不同基礎培養基加入維他命 A(Vitamin A)之平均成 長直徑圖(A)配方 1、(B)配方 2、(C)配方 3、(D)配方 4

A B

C D

2-2 討論綜合維他命(Centrum)添加對蛹蟲草生長的影響

在過去文獻發現添加不同維生素、礦物質及微量元素等的實驗中,發 現可以刺激蛹蟲草菌絲體成長[33, 32],本實驗以綜合維他命(Centrum)為 實驗藥劑。綜合維他命(Centrum)內成份有 14 種維生素(5 種脂溶性維生素 和 9 種水溶性維生素)和 17 種微量元素组成的複方製劑[41],實驗將探討 綜 合 維 他 命 對 蛹 蟲 草 菌 絲 體 的 成 長 影 響 。

由表五及圖五分別為蛹蟲草四種基礎培養基配方加入綜合維他命 (Centrum)經在不同天數下的蛹蟲草菌絲體生長的生物量(Biomass)及成長 直徑紀錄圖表。隨著固態培養天數增加,發現在基礎培養基配方 1 及配 方 2 組成長直徑並無統計差異,但均能增加成長速度。在生物量(Biomass) 表 現 上 , 只 有 在 配 方 1 能 增 加 生 物 量 。

表五、蛹蟲草在不同基礎培養基配方添加綜合維他命(Centrum)之成

1 CM 0.0176 2.023

R²=0.9954

14 CM+

cen 0.0220 2.383

R²=0.9674

2 HKS1 0.0348 1.767

R²=0.9920

3 HKS2 0.0226 1.475

R²=0.9861

4 HKS3 0.0914 2.132

R²=0.9818

Day

2-3 討論魚油(Fish oil)添加對蛹蟲草生長的影響

在文獻發現加入油脂,可增加蛹蟲草菌絲體產量[36, 35],但由於文獻 中所加入的油脂均為植物性油脂,所以本實驗以動物性油脂,魚油(Fish oil)作為實驗油脂。探討添加魚油(Fish oil)對蛹蟲草菌絲體的成長影響。

由表六及圖六分別為蛹蟲草四種基礎培養基配方加入魚油(Fish oil) 後,在不同天數下的觀察蛹蟲草生物量(Biomass)及成長直徑紀錄圖表。

由圖六發現隨著固態培養天數增加,所有基礎培養基加入魚油(Fish oil) 後 成 長 直 徑 均 無 統 計 差 異 , 並 會 降 低 成 長 速 度 。 但 在 蛹 蟲 草 之 生物量(Biomass)的表現,如表六所示,大部份基礎培養基加入魚油(Fish oil)後,即配方 18、19 及 20 皆可增加其生物量(Biomass),唯有配方 21 其生物量(Biomass)是下降的。

表六、蛹蟲草在不同基礎培養基配方添加魚油(Fish oil)之成長比較表

1 CM 0.0176 2.023

R²=0.9954

18 CM+

oil 0.0451 1.618

R²=0.9927

2 HKS1 0.0348 1.767

R²=0.9920

3 HKS2 0.0226 1.475

R²=0.9861

4 HKS3 0.0914 2.132

R²=0.9818

Day

2-4 討論酪氨酸(L-Tyrosine)添加對蛹蟲草生長的影響

酪氨酸(L-Tyrosine)是細胞用來合成蛋白質的 22 種必須胺基酸之一,

在細胞中可用於合成蛋白質,在過去文獻中並無添加酪氨酸在蛹蟲草菌 絲體上,所以本實驗將探討添加酪氨酸(L-Tyrosine)對蛹蟲草菌絲體的成 長影響。

由 圖 七 及 表 七 分 別 為 蛹 蟲 草 四 種 基 礎 培 養 基 配 方 加 入 酪 氨 酸 (L-Tyrosine)在不同天數下的蛹蟲草觀察生物量(Biomass)及成長直徑紀錄 圖表。隨著固態培養天數增加,發現在基礎培養基配方添加酪氨酸 ( L - Ty r o s i n e ) 即 配 方 2 2 、 2 3 、 2 5 , 在 成 長 直 徑 上 無 統 計 差 異 。

在生物量(Biomass)的表現,如表七所示,在基礎培養基配方加入酪氨 酸(L-Tyrosine)後,即配方 22、23 及 24 皆可增加其生物量(Biomass)。

表七、蛹蟲草在不同基礎培養基配方酪氨酸(L-Tyrosine)之成長比較

1 CM 0.0176 2.023

R²=0.9954

22 CM+

tyr 0.0177 1.977

R²=0.9990

2 HKS1 0.0348 1.767

R²=0.9920

3 HKS2 0.0226 1.475

R²=0.9861

4 HKS3 0.0914 2.132

R²=0.9818

Day

2-5 討論硫酸亞鐵(FeSO4)添加對蛹蟲草生長的影響

在文獻添加硫酸亞鐵(FeSO4)的實驗中,發現可以刺激蛹蟲草菌絲體 成長[32],本實驗中有四種不同基礎培養基,以硫酸亞鐵(FeSO4)為實驗 添加劑。探討添加硫酸亞鐵(FeSO4)的基礎培養基對蛹蟲草菌絲體的成長 影響。

表八為蛹蟲草四種基礎培養基配方加入硫酸亞鐵(FeSO4)在不同天數 下的蛹蟲草觀察成長直徑紀錄圖表。發現加入硫酸亞鐵(FeSO4)均會抑制 蛹蟲草菌絲體成長。

表八、蛹蟲草在不同基礎培養基配方添加硫酸亞鐵(FeSO4)之成長表

配方代號 配方 第0天 第14天 第28天 第35天

26 CM+

1%FeSO4

27 HKS1+

1%FeSO4

28 HKS2+1%

FeSO4

29 HKS3+

1%FeSO4

2-6 討論氯化亞鐵(FeCl2•4H2O)添加對蛹蟲草生長的影響

在實驗中添加 1% 硫酸亞鐵(FeSO4),發現會抑制蛹蟲草菌絲體成長,

所以實驗中使用另一種鐵劑,氯化亞鐵(FeCl2•4H2O)也無文獻使用於蛹蟲 草菌絲體。探討添加氯化亞鐵(FeCl2•4H2O)的基礎培養基對蛹蟲草菌絲體 的成長影響。

表 九 為蛹蟲草四種基礎 培養基配方加入 氯化亞鐵 (FeCl2•4H2O) 在不同天數下的蛹蟲草觀察成長直徑紀錄圖表。發現加入 氯化亞鐵 ( F e C l 2 • 4 H 2 O ) 均 會 抑 制 蛹 蟲 草 菌 絲 體 成 長 。

表九、蛹蟲草在不同基礎培養基配方添加氯化亞鐵(FeCl2•4H2O)之成 長表

配方代號 配方 第0天 第14天 第28天 第35天

30 CM+

1%FeCl2

31 HKS1+

1%FeCl2

32 HKS2+

1%FeCl2

33 HKS3+

1%FeCl2

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