二、對抗發炎及抗過敏活性試驗
第一節 猿尾藤之成分鑑定
一、化合物 H-1
23 O
3
24
25 26
27
28
29 30
2 1
4
friedelin
化合物 H-1 經氯仿及正己烷再結晶後得白色針狀結晶，熔點 247-252℃。TLC 片經溶媒(chloroform:n-hexane=1:2)展開後 Rf 值為 0.6，噴 10% H2SO4加熱後呈紫色。對 Liebermann-Büchard 試劑呈陽 性反應(由紅色轉成紫色最後轉成褐黃色)，故初步推定化合物 H-1 為
植物固醇或三 類化合物。
紅外光光譜（Chart 1）顯示，在 1713cm-1有 C=O 官能基的吸收 峰，也有一般三 類含有的吸收峰(1459, 1389, 1266, 1104, 803 cm-1)，
無不飽和 C-H 伸縮振動的吸收。
由 EI-MS 圖譜（Chart 2）顯示 m/z 426 [M+]為分子離子峰，即分 子量為 426。由碎片 m/z 411, 341, 302, 273, 246, 205, 191 的斷裂式如 下，推測化合物可能為 friedelin(25,26)。
O
1H-NMR 圖譜（Chart 3）顯示δ0.73 (3H, s, H-24)、0.86 (3H, s, H-25)、0.89 (3H, d, J=6.6Hz H-23)、0.95 (3H, s, H-29)、1.00 (6H, s, H-26, 30)、1.05 (3H, s, H-27)、1.18 (3H, s, H-28)有八個甲基吸收訊號，八個 甲基分別為 C-24、C-25、C-23、C-29、C-30、C-26、C-27、C-28 的 甲基訊號，配合 EI-MS 質譜的斷裂方式，推測應為 friedelin 類化合物
(27-29)。
13C-NMR 圖譜（Chart 4）顯示其共有三十個碳原子吸收訊號，其 中δ 213.0 為 C=O 基之吸收訊號。另外有八個碳原子訊號是屬於 CH3， 分別為δ34.9 (C-30)、32.0 (C-28)、31.7 (C-29)、20.2 (C-26)、18.6 (C-27)、17.9 (C-25)、14.1 (C-24)、6.7 (C-23)。有十一個碳原子訊號屬 於 CH2，分別為 δ18.1 (C-7)、22.2 (C-1)、30.4 (C-12)、32.3 (C-21)、
32.7 (C-15)、35.2 (C-19)、35.5 (C-11)、35.9 (C-16)、39.2 (C-22)、41.2 (C-6)、41.4 (C-2)。有四個碳原子屬於 CH，分別為δ δ59.4 (C-10)、
58.1 (C-4)、53.0 (C-8)、42.7 (C-18)。其餘的六個碳原子訊號屬於四級 碳，在最低磁場出現的δ 213.2 是來自於 C-3 的 C=O，剩下的訊號分 別為δ28.0 (C-20)、29.8 (C-17)、37.2 (C-9)、38.1 (C-14)、39.4 (C-13)、
41.9 (C-5)。
Table 5.1 化合物 H-1 碳譜數據與文獻(27-29)碳譜數據比對表
二、化合物 H-2 呈紫紅色。對 Liebermann-Bürchard 試劑呈陽性反應(紫紅色轉藍紫 色)，故初步推測化合物為植物固醇。
紅外光光譜（Chart 6）顯示，在 3200-3600cm-1(br)為-OH group 的吸收帶，2955 cm-1為 CH2的特性吸收帶，1466 cm-1為-CH2 的特性 吸收帶，1373 cm-1是-CH3的吸收帶，1057 cm-1有 C-O 基伸縮振動的 吸收訊號。
由 EI-MS 圖譜（Chart 7）顯示其 m/z 414(39) [M+]為主要的分子 離子峰，412 (5)及 400 (6)為次要化合物之分子離子峰， 即分量為 414、412、400，故推測化合物 H-2 可能為 â-sitosterol、stigmasterol、
campesterol 的混合物。
1H-NMR 圖譜（Chart 8）顯示在δ 5.36 ( 1H, d)為雙鍵上 H-6 之質 子訊號；δ 4.90~5.34 為支鏈雙鍵 H-22，H-23 之質子訊號；δ 3.53 ( 1H, m)為 C-3 連接-OH 之次甲基的質子訊號；δ 0.75~2.30 (m)為植物固醇 特有訊號。
13C-NMR 圖譜（Chart 9）顯示δ 140.5、121.5 別為環上雙鍵 C-5 及 C-6 之碳原子訊號；δ 138.1 及 129.0 則為支鏈雙鍵 C-22 及 C-23 之 碳原子訊號，δ 71.56 為帶有-OH 基的 C-3 之碳原子訊號。
DEPT 圖譜 (Chart 10)顯示δ 19.7, 19.3, 18.9, 18.7, 11.9, 11.8 為 CH3之碳原子訊號；δ 42.2, 39.7, 37.2, 33.8, 31.6, 29.0, 28.2, 25.9, 24.2, 23.0, 21.0 為 CH2之碳原子訊號；δ 138.2, 121.6, 71.7, 56.7, 55.9, 50.6, 45.7, 36.1, 31.8, 28.9 為 CH 之碳原子訊號。
綜合以上光譜資料與文獻(30-36)比對，推定此合物為 ß-sitosterol、
Stigmasterol 及 campesterol 混合物。
三、化合物 H-3
HO
23 24
25 26
27
29 30
28
Friedelinol
化合物 H-3 以甲醇、氯仿再結晶得白色片狀結晶，270-273℃其 TLC 片經溶媒(Choloroform)展開後呈紫色。對 Liebermann-Büchard 試劑呈陽性反應(紅色轉成褐色)，初步推測化合物為植物固醇或三 類化合物。
由 EI-MS(Chart 11)圖譜顯示 m/z 428(M+)為子離子峰，即分子量 為 428。其碎片離子峰在 m/z 413(M+)、395(M+-15-18)、304、275、
257、207、165，推測此化合物 H-3 可能為 3-epi-friedelinol(25,26)，其 質譜的斷裂方式推測如下：
HO
13C-NMR 圖譜(Chart 13)顯示共有三十碳原子訊號。有八個碳原 子訊號屬於 CH3，分別為 ä 11.6(C-23)、16.4(C-24)、18.2(C-25)、
18.6(C-26)、20.1 (C-27)、31.7(C-29)、32.0(C-28)、35.0(C-30)。有十
一個碳原子訊號屬於 CH2，分別為 ä 15.7(C-1)、17.6(C-7)、30.6(C-12)、
32.3 (C-15) 、 32.7(C-21) 、 35.3(C-19) 、 35.4(C-2) 、 35.5(C-19) 、 35.9(C-16)、39.2(C-22)、41.6(C-6)。有五個碳原子訊號屬於 CH，其 中在最低磁場 ä 72.7 是來自 C-3，其它的訊號分別為 ä 42.7(C-18)、
49.1(C-4) 、 53.1(C-8) 、 61.3(C-10) 。 四 級 碳 原 子 訊 號 分 別 為 ä 39.7(C-13)、38.3(C-14)、37.8(C-5)、37.0(C-9)、30.0(C-17)、28.1(C-20)。
將本化合物的碳譜數據與文獻(37-39)上 3-epi-friedelinol 的碳譜數據做 比較如 Table 5.3 所示。
Table 5.2 化合物 H-3 碳譜數據與文獻(37-39)碳譜數據比對表
綜合以上光譜資料與文獻(37-39)比對，推定此合物為 friedelinol。
四、化合物 C-1
betulinic acid
化合物 C-1 於氯仿層中得到，為白色片狀結晶，以氯仿-甲醇再
HO
COOH
m/z 456 Betulinic acid
H2C
COOH
m/z 248 +
HO
CH2+
m/z 207
1H-NMR 圖譜（Chart 17）顯示δ0.82、1.02、1.04、1.09、1.20、
1.89（s）分別為六個四級碳上甲基之質子訊號；δ4.75、4.91（2H,br.
s），為雙鍵上 H-29 之質子訊號；δ3.49（1H, m）為 C-3 連接-OH 之 次甲基的質子訊號。
13C-NMR 圖譜（chart 18）顯示δ150.8、109.5 分別為外環雙鍵 C-20、C-29 之碳原子訊號；δ77.6 為接-OH 基 C-3 之碳原子訊號。
δ178.4 為 COOH 上 C-28 之碳原子訊號。
Table 5.3 化合物 C-1 碳譜數據與文獻(41)碳譜數據比對表
五、化合物 C-2
â-sitosterol-3-O-â-glucoside 及 stigmasterol-3-O-â-glucoside
化合物 H-4 以氯仿-甲醇再結晶，得到白色顆粒狀結晶，熔點 290-293℃。其 TLC 片經溶媒(CHCl3:MeOH=7:1)展開後 Rf 值為 0.55，
噴 10 % H2SO4加熱後呈紫色。對 Libermann-Bürchard 試劑呈陽性反 子量為 576。故推測化合物可能為 â-sitosterol-3-O-â-glucoside 及 stigmasterol-3-O-â-glucoside 的混合物。
氫譜(Chart 22)顯示 ä 5.32(1H, br)是 C-6 上之烯基氫的吸收訊 號；H-22、H-23 的吸收訊號在 ä5.00-5.30(m)的多重峰中；ä3.95-4.53(m) 為糖基上質子的吸收訊號。
碳譜(Chart 23)顯示在 ä 140.5、121.4 及 131.0、128.8 的訊號是雙 鍵 C-5、C-6 及 C-22、C-23 之吸收；ä102.1、78.0、77.7、74.8、71.2、
62.4 分別為葡萄糖上 C-1’、C-3’、C-5’、C-2’、C-4’、C-6’的吸收訊 號 ， 經 與 文 獻(41-43)比 對 得 知 為 â-sitosterol-3-O-â-glucoside 及 stigmasterol-3-O-â-glucoside 的混合物。