實驗動物由台中榮總醫學研究部提供實驗動物寄養於動物中心,實驗室
環境條件設定為室溫﹙23 ±℃﹚,日夜控制各 12 小時,白天於 8:00AM 開始之前禁食十二小時以上。大白鼠 Sprague Dawley Rat ﹙年齡約 10 週,體重 280-440 公克﹚,隨機分為對照組及實驗組。實驗組依照文獻 記載的方式用 2Hz 電針針刺兩側足三里穴 Zusanli﹙ST 36 points﹚,而 對照組則以相同的方式處理唯不給予用 2Hz 電針針刺兩側足三里穴 Zusanli ﹙ST 36 points﹚,實驗動物用 Urethane﹙200 mg/kg i.p﹚麻醉 後,大白鼠體溫透過回饋控制系統維持溫度在 37℃, 並繼注射
Urethane﹙20 mg/kg/hr i.v﹚維持麻醉狀態, 待其完全麻醉狀態後固定 於手術木板上,然後用手術刀片將右側或左側股動靜脈區毛髮刮除乾淨 並消毒之後即切開皮膚,使動脈或靜脈連接至全自動血液檢體收集儀自 動微量血液檢測儀系統(Auto Micro-Blood Sampling System)及動脈監 視器(polygraph arterial monitor).
第二節 穴位之選取(Meridian Selection)
兩側足三里穴 Zusanli﹙ST 36﹚ points (1) 選取取用自 Dr. Zeng Z, Li Y. 所 發 表 之 方 法 , 足 三 里 Zusanli 則 位 於 小 腿 脛 前 肌 ﹙ anterior-tibia muscle﹚近膝側的位置. 針具採用 0.5 寸 32 號針﹙千輝公司產品﹚,垂直刺 入結締組織肌肉層約 2-5 mm,並接上電針機﹙Han’s Intrusment Taiwan﹚,
而在小腿脛前肌﹙anterior-tibia muscle﹚近膝側位置的右側足三里 Zusanli
﹙ST 36﹚接正極,左側足三里 Zusanli﹙ST 36﹚接負極後,各別施以頻率 2 Hz, /10mA ﹙1 ms﹚閾遁值的電刺激, 電針刺激 30 分鐘後,停止電針刺
激 1.5 小時後,再唯給予用 2Hz 電針針刺兩側足三里穴 Zusanli ﹙ST 36 points﹚電針刺激 30 分鐘後,再停止電針刺激 2 小時。
如圖 3-2.1針具採用 0.5 寸 32 號針﹙千輝公司產品﹚
如圖3-2.1針具採用0.5寸32號針﹙千輝公司產品﹚
第三節 實驗模型製作
如圖3-3-1實驗動物模型
如圖 3-3.2 電生理剌激器
如圖 3-3.3 微透析自動微量血液檢測儀系統﹙Auto Mico-Blood Sampling System﹚
圖 3-4.1 微透析技術自體內移出化學物質而不用抽取體液且可導入化學 化質以觀察反應
第四節 實驗室之檢驗(Laboratory Examination)
1.血糖(blood sugar), 丙酮酸(Pyruvate), 乳酸(lactate) 之檢測: 使用全 自動血液檢體收集儀自體內移出化學物質而不用抽取體液且可導入化 學化質以觀察反應。由全自動血液檢體收集儀取得的樣品不僅乾淨且可 以立即使用各種不同分析技術加以分析,因此全自動血液檢體收集儀對 於生物醫學和臨床研究上是非常有潛力的一種生物分析採樣技術,,本研 究應用全自動血液檢體收集儀技術在電針刺激大白鼠俞穴釋出調控神 經化學物質之分析提供新的研究方法(methodology)
如圖 3-4.2
實驗室之檢驗
CMA 600 Microdialysis Analyser
第五節 計算與統計分析﹙
Calculation and Statistical Analysis﹚
實驗所收集之樣本測量值,使用 SPSS/WIN 套裝軟體進行資料之建檔 與統計分析。描述性統計以次數、平均值、標準差呈現資料分布狀況,使用 統計檢定採無母數統計分析之 Friedman Test 及 Wilcoxon Signed Ranks U Test 進行差異比較。第四章 結 果
一、欲知以 2 Hz 電針大白鼠兩側足三里穴 Zusanli﹙ST 36 points﹚對 血糖﹙blood sugar﹚、丙酮酸﹙Pyruvate﹚、乳酸﹙lactate﹚之影 響,詳述如下:
自插針 1hr 後,以 2Hz 電擊足三里 30 min 之後休息 1.5 hr , 此 段實驗過程計有七隻大白鼠,期間觀察大白鼠之 Glucose、Lacate 及 L/G 之 變 化 情 形 , 結果如表 4-1 得 知 : Glucose 、 Lacate 於 插 針
﹙ Baseline ﹚ 後 雖 有 些 微 上 升 但 未 呈 顯 著 意 義 ﹙ Friedman Test, p>0.05﹚,L/G 之 Ratio 值亦未有顯著的差異,再經刺激電擊足三里 30 分鐘,初測 Glucose、Lacate 雖有上升,L/G 值有下降,然均未呈統 計顯著性差異,其後 Glucose、Lacate 均有下降, 僅 Glucose 達顯 著性差異 (Wilcoxon Signed Ranks Test, p<0.05),Lacate 與 L/G 值 均無顯著差異,終止電擊後約 1hr,Glucose 則有顯著上升,而 Lacate 與 L/G 值的變化均未達顯著差異。﹙詳見表 4.1﹚
表4.1 以 2 Hz 電針大白鼠兩側足三里穴 Zusanli﹙ST 36 points﹚對血糖
﹙blood sugar﹚、丙酮酸﹙Pyruvate﹚、乳酸﹙lactate﹚之影響差異 比較
Glucose Lactate L/G
Mean (SD) P value Mean (SD) P value Mean (SD) P Value
二、欲知以 2 Hz 與 80~100 Hz 電擊大白鼠兩側足三里穴 Zusanli﹙ST 36 points﹚對血糖﹙blood sugar﹚、丙酮酸﹙Pyruvate﹚、乳酸﹙lactate﹚
之影響如何﹖
再次以 80~100Hz 電擊足三里 30min,電擊中其葡萄糖﹙Glucose﹚值 趨平穩並無太大的變化,然其值有高於以 2Hz 電擊時。
如圖 4.2 所示:此隻實驗鼠以 2Hz 電擊足三里,其乳酸﹙lactate﹚
隨即上升,後又下降,停止電擊後之 1.5hr 其乳酸﹙lactate﹚值亦無變 化,再經 80~100Hz 電擊足三里 30min,電擊初其乳酸﹙lactate ﹚值有 稍微的上升,其後雖有起伏然亦無明顯的變化。而兩次電擊時的乳酸
﹙lactate﹚值亦無差別。
如上述,乳酸﹙lactate﹚值所有微微的起伏,然整體而言,其為平 穩而無明顯的變化,故 L/G 值的變化情況是受葡萄糖﹙Glucose﹚值的 影響,如圖 4.3 所示:因此隻實驗鼠於 2Hz 電擊足三里之後,休息 1hr 內其 L/G 值一直下降,後半小時緩和的上升,再次以 80~100Hz 電擊 足三里 30min,電擊中其 L/G 值趨平穩並無太大的變化,然其值有低於 以 2Hz 電擊時。
此結果與 Dr. Li H’s. findings 所發表之實驗結果略同。.
圖 4.1:電針大白鼠兩側足三里穴其葡萄糖﹙Glucose﹚變化情形
10 min 1 hr 30 min 1.5 hr 30 min 1.5 hr
電擊(足三里)
2Hz 80~100Hz
電擊2Hz
(足三里)
插針
A1 A2 B1 B2 B3 B4 E1 E2 R1 R2 R3 R4 R5 R6 E3 E4 R7 R8 R9 R10 R11 R12
0 500 1,000 1,500 2,000 2,500 3,000
圖 4.2:電針大白鼠兩側足三里穴其乳酸﹙lactate﹚變化情形
圖 4.3:電針大白鼠兩側足三里穴其 L/G 值的變化情形
10 min 1 hr 30 min 1.5 hr 30 min 1.5 hr
電擊(足三里)
2Hz 80~100Hz
電擊2Hz
(足三里)
插針
A1 A2 B1 B2 B3 B4 E1 E2 R1 R2 R3 R4 R5 R6 E3 E4 R7 R8 R9 R10 R11 R12
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4
三、欲知前後兩次以 2 Hz 電擊大白鼠兩側足三里穴 Zusanli﹙ST 36 points﹚對血糖﹙blood sugar﹚、丙酮酸鹽﹙Pyruvate﹚、乳酸﹙lactate﹚
之影響如何﹖
自插針 1hr 後,以 2Hz 電擊足三里 30 min 之後休息 1.5 hr , 再 次以 2Hz 電擊足三里 30min,本研究實驗僅 2 隻大白鼠完成此段實驗 檢測。
由圖 4.1,圖 4.2 及圖 4.3 所示:兩次 2Hz 電擊足三里時之葡萄糖
﹙Glucose﹚、乳酸﹙lactate﹚及 L/G 值並無明顯的差別,兩次電擊間 歇 1.5hr,三項檢測值亦多起伏並無顯著的變化。
如圖 4.6 所示:對實驗鼠電擊穴位足三里與非穴位,其 L/G 值無 明顯的差異變化。
圖 4.4:電針大白鼠兩側足三里穴與非穴位其葡萄糖﹙Glucose﹚的變化情形
電擊2Hz
圖 4.5:電針大白鼠兩側足三里穴與非穴位其乳酸﹙Lacate﹚的變化情形
電擊2Hz ( Skin ) 電擊2Hz
(足三里)
A1 A2 B1 B2 B3 B4E1 E2 E3 E4 E5 E6 R1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 E1 E2 E3 E4 E5 E6 R1 2 3 4 5 6 0
200 400 600 800 1,000 1,200 1,400
1,600 插針
10 min 1 hr 30 min 3 hr 30 min 30 min
圖 4.6:電針大白鼠兩側足三里穴與非穴位其 L/G 值的變化情形
電擊2Hz ( Skin ) 電擊2Hz
(足三里)
A1 A2 B1 B2 B3 B4 E1 E2 E3 E4 E5 E6R1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12E1 E2 E3 E4 E5 E6R1 2 3 4 5 6 0.0
0.5 1.0 1.5
2.0 插針
10 min 1 hr 30 min 3 hr 30 min 30 min
從輸出電壓的頻率響應圖,換算出經絡與周圍組織的電阻性電位降。
顯示經絡比周圍的組織的導電度要高許多,兩者的差異很明顯。人體對高頻 信息的導電度比對低頻的高,與大白鼠相似。換言之,高頻的電信息在人體 內傳送時,能量的損耗會比較低,所以能夠傳很遠信息還相當強。愈往高頻 區域看,發現經絡和非經絡的導電度差異也有愈小的趨勢。
至於電抗的電位降,約在小於 100Hz 的低頻率區域內,經絡比非經絡 呈現較低的容抗,當頻率升高時經絡的容抗更低,更昇高頻率時經絡的容抗 漸昇,通過電抗為零之後,即出現電感性漸昇的現象。
第五章 討 論
年,美國托尼多醫學院幾位醫生用藥物及針刺對狗的一系列實驗,所得 用,另外電針胃脘下俞 Weiwanxiashu 穴,三陰交穴血中胰島素的上升幅 度大於電針足三里穴。 源發嗎啡多? ,而 5-羥色胺﹙5 HT﹚、serotonin、P 物質﹙substance P﹚
和前列腺素﹙prostaglandin﹚等,均可誘發嚴重疼痛。從而激發機體的 心理 ... 同時,對相應神經根處的刺激,可以發揮閘門控制作用,另 100Hz 電針刺激使可能激活內啡? 、腦啡? 。
4. 在 活 體 大 白 鼠 上 偵 測 血 糖 ﹙ blood glucose ﹚ 及 其 代 謝 物 丙 酮 酸 鹽
﹙Pyruvate﹚、 乳酸﹙lactate﹚的這項技術,將對了解電針及針刺穴位如 何影響血糖﹙blood glucose﹚及其代謝物丙酮酸鹽﹙Pyruvate﹚、乳酸
能精巧結合的演化結果。
由這种技術將能更讓我們進一? 了解它和單胺神經元功能之相關性, 觀察電針及針刺穴位對細胞外及細胞內血糖﹙blood glucose﹚及其代謝 物丙酮酸鹽﹙Pyruvate﹚、乳酸﹙lactate﹚之變化對中樞神經系統之作用,
以及電針及針刺穴位有效性之原理,及針刺俞穴產生不同的影響。
第六章 結 論
的,且穴位的導電性大小與機體生理及病理變化有關。關於電場改變早於形 激反應﹙stress response﹚中,組織中心的激活將維持機體正常的形態與 功能。電針灸將加速創傷治癒過程,並且導致機體創傷治癒及應激反應的擴
體收集儀技術在電針刺激俞穴科學化
本研究使用全自動血液檢體收集儀自體內移出化學物質而不用抽取體 液且可導入化學化質以觀察反應。由微透析技術取得的樣品不僅乾淨且可以 立即使用各種不同分析技術加以分析,因此全自動血液檢體收集儀對於生物 醫學和臨床研究上是非常有潛力的一種生物分析採樣技術,,本研究應用全 自動血液檢體收集儀連線技術在電針刺激大白鼠俞穴釋出調控神經化學物 質之分析提供新的研究方法﹙methodology﹚使針刺微透析科學化及應用全 自動血液檢體收集儀技術在電針刺激俞穴科學化。
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Different central manifestations in response to electroacupuncture at
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