第四章 結果與討論
一、 Indican 於大鼠體內之代謝動力學
本研究開發HPLC-UV 方法，分析血清檢品。血清以含內標之 甲醇去蛋白，16 分鐘內即可完成分析。Indican 檢量線之濃度範圍為 0.78 ~ 50.0 μg/mL，檢量線方程式 y = 0.6096 x－0.0144 ，濃度與波峰 面積比值間顯現良好之線性關係 ( r2=0.9999 )。有關分析方法的確 效，分別進行了同日內及異日間的精密度及準確度分析。結果如Table 10 及 Table 11 所示。顯示此分析方法在同日內及異日間之變異係數 ( C.V. ) 均小於 10 %，相對誤差 ( relative error ) 均小於 20 %。血清 中indican 之回收率為 94.6~100.0 %，如 Table 8 及 Table 9 所示。Indican 之最低可定量極限 ( LLOQ )為 0.78 μg/mL，檢測極限 ( LOD )為 0.1 μg/mL。確效結果顯示，本分析系統之精密度、準確度及回收率皆良 好。
大鼠口服 20 mg/kg indican 後，血中有 indican 及 indoxyl sulfate 存在。 Indican 及 indoxyl sulfate 之平均血峰濃度分別為 27.9 ± 3.1 和13.8 ± 4.2 nmol·mL-1，平均血藥面積分別為1349.9 ± 158.1 和 31255.6 ± 4805.9 nmol·min·mL-1，平均滯留時間分別為49.7 ± 6.5 和
2373.3 ± 16.9 min，如 Table 6 所示。 Indoxyl sulfate 之平均血藥面 積為indican 之 23.2 倍，而平均滯留時間為 indican 之 47.5 倍，如 Table 6 所示。
大鼠口服 40 mg/kg indican 後，indican 及 indoxyl sulfate 之平均 血峰濃度分別為75.8 ± 18.2 和 24.2 ± 8.5 nmol·mL-1，平均血藥面積 分別為3956.4 ± 669.4 和 28130.8 ± 1121.5 nmol·min·mL-1，平均滯留 時間分別為46.1 ±1.7 和 2105.0 ± 84.1 min， indoxyl sulfate 之平均 血藥面積為indican 之 7.1 倍，而平均滯留時間為 indican 之 46.6 倍，
如Table 6 所示。
大鼠尾靜脈注射 10 mg/kg indican 後，血中 indican、indoxyl sulfate 之濃度、個別與平均血藥經時變化圖分別如Table 6 及 Fig 9 所示，
indican 及 indoxyl sulfate 之平均血藥面積分別為 1008.7 ± 141.5、
39456.8 ± 5850.4 nmol·min·mL-1，平均滯留時間分別為73.5 ± 21.5、
2522.3 ± 84.1 min，indoxyl sulfate 之血藥面積為 indican 的 39.1 倍。
顯示indican 進入血中後，亦發生葡萄糖之水解，並立即代謝成 indoxyl sulfate。比較口服 20 與 40 mg/kg 兩種劑量的動力學行為顯 示，indoxyl sulfate 之血藥面積分別為 indican 的 23.2 倍與 7.1 倍。
兩劑量的indoxyl sulfate 之血藥面積並無明顯差異，顯示 indoxyl sulfate 血中暴露並未隨 indican 劑量增加而增加，可以推測由
indican 代謝成 indoxyl sulfate 的過程可能於 20 mg/kg 劑量下已達 飽和。因此可以推論，indican 具非線性動力學行為。
Indican 口服後，二小時內有 indican 的原型存在於血中，但 二小時之後， indican 幾乎偵測不到。而代謝物 indoxyl sulfate 為 主要存在於血中的形式。口服後血藥經時變化圖顯示 indican 快速 代謝成indoxyl sulfate，後者在體內的滯留時間相當長，可能因為 indoxyl sulfate 有腸肝循環。
本研究結果顯示，無論口服或靜脈注射投予 indican，皆主要 以代謝物 indoxyl sulfate 存在於血中，且滯留時間相當長。單次給藥 後的72 小時，血中 indoxyl sulfate 的濃度仍明顯高於內生性的 indoxyl sulfate。有文獻指出 indoxyl sulfate 在慢性腎臟病人身上為一個重要 的指標 indoxyl sulfate 不正常的蓄積會抑制藥物與血清中白蛋白的 結合、甲狀腺功能失常及抑制腎小管的主動分泌，並且加速腎功能 的損壞（Tsuneo, 2003）。因此 indican 及含 indican 中藥久服之後的 腎毒性值得關注。