之後隨著新一期之丹參開始種植,作者即在宜蘭縣三星地區開始一連串之密
菌落為白色透明,菌落邊緣略有不規則凹凸,顯微鏡下可見菌落邊緣為不均勻波
影響,同時考慮到田間同時期之丹參因季節進入春天,開始進入快速成長期,故 在接種前給予肥料促進試驗用之盆苗加速生長,以期植株狀態能符合田間植株狀 態。
在更新接種方式及植株狀態等各種因子後,以病原菌 YL-1(Pectobacterium carotovorum)接種丹參盆苗之試驗方式獲得了成功,接種發病率可達 100%,但其 率達 95%,證實此病株 YL-1(Pectobacterium carotovorum)確實為丹參軟腐病之病原 菌。
本研究在進行離體根段接種時,原先考慮田間發病部位多為中央主根及地基 部等較為粗大之部位,故初期選取直徑約 2cm 之根段進行注射接種,經多次實驗 均失敗,發病率為 0%,因此後來決定採用稍具破壞性之接種法,並給予適宜發病 之高濕度環境,將接種根段置於培養皿之中進行實驗,同時進行不同粗細之根段 發病比較。此法果然造成丹參之軟腐病徵出現,即在 0.5cm 以下、0.5~1cm、1cm 以上等三組處理中,發病率分別為 53%、44%及 33%,且發病根段中央皆呈嚴重
質,故不會受感染,但此抗菌物質在表面消毒過程中溶於酒精之中,因此抗性下 序,定序結果在美國國家生物技術信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)進行序列比對後,結果顯示 Pc 與 Pectobacterium carotovorum 序 列相似度達 99%以上,此菌為著名軟腐病原,會在十字花科、菊科、馬鈴薯等作 物上造成各部位之軟腐病害,且為土媒性病害,十分不易根除。而 Psc 於 16S rDNA 序列分析後發現其與 Pseudomonas cichorii 相似度達 99%以上,而此菌也是著名之 病原菌,在菊科上常造成細菌性葉枯病,而此菌在 2013 年 4 月份被發表證實為一
五. 水份對丹參軟腐病發病率之影響
因前述在丹參之病原性檢定過程中,發現到水份、溼度等因子可能是影響病 原菌 Pectobacterium carotovorum 感染丹參之重要因子,可決定感染成功與否及感 染後之發病程度。而水分對於細菌性病害之發病有所影響已屬共識,好發環境描
組發病率為 17%,顯示土壤水分確實對發病率有所影響,但與前項同時給予水分 生長。根據前人指出,影響 Pectobactrium 屬細菌性軟腐病發病的環境因子當中,
以溫度與濕度最為重要(陳,1991)。Pcc 被報導之最適生長溫度為 28-30℃,相對 濕度為 70~100%、故田間多雨潮濕季節再加上氣候溫暖時,尤以颱風過後,最容 易發病(Pérombelon & Kelman, 1980 )。但在丹參軟腐病進行之試驗及調查中,發現 其好發季節在春初至春夏之交,此與前人研究相較,溫度因子在此病害似乎不是 最重要之項目,水份及營養等植株生理特性之影響似乎相對較大。
八. 丹參軟腐病之藥劑防治試驗
在本項藥劑防治試驗中,起初試圖參考植物保護手冊其他根莖類軟腐病之推 薦藥劑做為測試參考,但發現目前無推薦藥劑,因此係選擇常用之抗生素類藥物
藥劑,另選擇針對水稻常見細菌性病害白葉枯病之兩項系統性藥劑克枯爛及撲殺 熱參加測試。
本項試驗結果中發現鏈四環黴素 100ppm 之表現最佳,其防治率在本次試驗到 達 100%,但在 125ppm 之處理組中,防治率卻僅有 25%,類似情形同樣發生在安 比西林之處理組 400ppm 濃度之防治率有到達 50%,但在 800ppm 處理下防治率卻 是 0%,在濃度較高但無藥害情況下防治率卻相對下降,因此筆者將之解釋為接種 上造成之人為誤差,或為重複數較少所致,而系統性防治藥劑克枯爛及撲殺熱則 不論濃度,皆幾乎沒有效果。
九. 丹參軟腐病分離株對其他 Pectobacterium carotovorum 之 寄主植物感病性測試
為了解丹參軟腐病菌是否對其他同屬 Pectobacterium carotovorum 之寄主作物 造成感染,故以前述具病原性之分離株 YL-1 對不同植物進行感病性測試。
即將 NB 震盪培養之分離株 YL-1 接種至蘿蔔及高麗菜,但對蘿蔔之發病率及再分 離率皆可達 100%,而對高麗菜梗之發病率僅 58%,此應與高麗菜梗之含水率較低 有關,間接證實前述認為此菌感染丹參與植體水分有正相關之推論。
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