第二章 文獻探討
第四節 高脂肪餐點與脂肪代謝基因
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s y s t e m s , L t d , L b a r a n k i , J a p a n ) 測 定 。
貳 、 總 膽 固 醇
血 漿 中 總 膽 固 醇 以 商 業 試 劑 組 ( Wa k o , O s a k a , J a p a n ) 及 自 動 化 分 析 儀 ( H i t a c h i 7 0 2 0 , H i t a c h i S c i e n c e s y s t e m s , L t d , L b a r a n k i , J a p a n ) 進 行 檢 測 。
参 、 高 密 度 脂 蛋 白 及 低 密 度 脂 蛋 白
血 漿 中 高 密 度 脂 蛋 白 以 商 業 試 劑 組 ( K Y O WA , O s a k a , J a p a n ) 及 自 動 化 分 析 儀 ( H i t a c h i 7 0 2 0 , H i t a c h i S c i e n c e s y s t e m s , L t d , L b a r a n k i , J a p a n ) 檢 測 。
低 密 度 脂 蛋 白 計 算 公 式 如 下 :
L D L - C = T C - H D L - ( T G / 5 )
( F r i e d e w a l d , L e v y, & F r e d r i c k s o n , 1 9 7 2 )
肆 、 載 脂 蛋 白 A
血 漿 中 載 脂 蛋 白 A 濃 度 以 商 業 試 劑 組( R a n d o x , R A N B U T, U K ) 及 自 動 化 分 析 儀 ( H i t a c h i 7 0 2 0 , H i t a c h i S c i e n c e
s y s t e m s , L t d , L b a r a n k i , J a p a n ) 檢 測 。
伍 、 載 脂 蛋 白 B
血 漿 中 載 脂 蛋 白 B 以 商 業 試 劑 組 ( R a n d o x , R A N B U T, U K ) 及 自 動 化 分 析 儀 ( H i t a c h i 7 0 2 0 , H i t a c h i S c i e n c e s y s t e m s , L t d , L b a r a n k i , J a p a n ) 做 檢 測 。
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確 定 沒 有 任 何 氣 泡 後 , 再 放 到 反 應 器 進 行 反 應 ( i Q 5 M u l t i c o l o r R e a l - T i m e P C R D e t e c t i o n S y s t e m ) 。
所 有 基 因 表 現 結 果 以 C ( t ) 值 ( c y c l e t h r e s h o l d ) 表 示 。 相 對 基 因 表 現 差 異 計 算 方 法 如 下:
∆ C ( t ) = C ( t ) t a r g e t – C ( t ) r e f e r e n c e = C ( t ) 目 標 基 因 – C ( t ) β - a c t i n 相 對 基 因 表 現 量 = 2 - ∆ C ( t )
, 即 2 的 - ∆ C ( t ) 次 方 基 因 改 變 率 的 計 算 方 式 為
基 因 改 變 率( % )= {( s a m p l e C ( t ) - b a s e l i n e C ( t ) )÷ b a s e l i n e C ( t ) } × 1 0 0
第 十 節 統 計 方 法
所 有 受 測 者 數 值 皆 以 平 均 數± 標 準 誤 表 示 。 使 用 重 複 量 數 單 因 子 變 異 數 分 析 法 比 較 不 同 組 別 及 時 間 點 之 基 因 表 現 與 血 液 生 化 值 , 若 有 達 顯 著 , 則 再 以 B o n f e r r o n i 法 進 行 事 後 比 較 。 統 計 顯 著 水 準 定 為 p < 0 . 0 5 。 所 有 統 計 數 據 使 用 統 計 軟 體 S P S S 1 2 . 0 分 析 。
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都 有 上 升 的 趨 勢 , 且 在 運 動 後 持 續 上 升 ; O F T T- 3 h G 組 的 改 變 量 下 降 , 其 他 三 組 仍 然 持 續 上 升 ; 在 O F T T- 6 h 時 F + E X 組 改 變 量 下 降 , 其 他 三 組 則 上 升 , 其 中 F 、 G 兩 組 的 改 變 量 皆 高 於 F + E X 、 G + E X 組 ( 圖 十 五 )。
伍 、 V L D L R
F + E X 組 的 V L D L R 相 對 基 因 表 現 在 運 動 後 略 為 下 降 , 餐 後 3 小 時 達 到 最 高 值;F 組 則 在 餐 後 有 逐 漸 上 升 的 趨 勢;G + E X 組 在 補 充 飲 品 後 下 降 , 運 動 後 上 升 , 在 餐 後 3 小 時 略 下 降 再 度 上 升 , 趨 勢 與 L D L R 的 表 現 類 似 ; G 組 則 是 補 充 飲 品 後 下 降 , 運 動 後 逐 漸 上 升 到 餐 後 3 小 時 達 到 最 高 值 , 且 在 餐 後 6 小 時 回 到 空 腹 時 水 準( 圖 十 六 )。 在 補 充 飲 品 後 及 運 動 後 四 組 的 改 變 量 並 無 明 顯 差 異 。 補 充 飲 品 之 後 F + E X 組 的 改 變 量 有 些 微 上 升 , 而 運 動 使 G + E X 組 改 變 量 也 有 些 微 上 升 的 趨 勢 ; 在 O F T T 後 F + E X 組 的 V L D L R 改 變 量 是 四 組 中 最 明 顯 的( 圖 十 七 )。
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趨 勢 ; H M G C R 基 因 表 現 與 過 去 研 究 結 果 並 不 ㄧ 致 , 需 要 更 進 ㄧ 步 實 驗 探 討 有 關 於 高 脂 肪 餐 後 H M G C R 的 影 響 。
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第 六 章 結 論
過 去 有 許 多 研 究 為 長 期 補 充 葡 萄 糖 或 果 糖 對 於 血 漿 生 化 值 的 影 響 , 少 數 研 究 觀 察 對 P B M C 上 肝 臟 脂 肪 代 謝 相 關 基 因 的 變 化 。 而 本 研 究 主 要 觀 察 單 次 補 充 不 同 碳 水 化 合 物 飲 品 與 運 動 介 入 對 餐 後 脂 肪 代 謝 相 關 基 因 之 影 響 , 也 檢 測 了 P B M C 上 脂 肪 代 謝 相 關 基 因 的 變 化 。 目 前 數 據 顯 示 補 充 不 同 碳 水 化 合 物 飲 品 及 運 動 介 入 與 否 對 高 脂 肪 餐 後 脂 肪 代 謝 相 關 基 因 影 響 並 不 大 。 雖 然 結 果 並 未 達 顯 著 差 異 , 但 我 們 發 現 補 充 果 糖 有 較 高 的 血 漿 中 A p o A - I、 較 低 的 T C、 L D L - C 及 V L D L R 基 因 表 現 等 趨 勢 。 未 來 可 增 加 受 試 者 人 數 以 減 少 受 試 者 間 差 異 性 , 並 更 進 一 步 研 究 探 討 關 於 P B M C 對 肝 臟 脂 肪 代 謝 相 關 基 因 之 機 轉 。
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表一、食品製造商
品牌 製造商 電話 購買地點
PRESIDENT 總統牌鮮奶油
Latalis International SNC
台灣聯馥食品有限公司(代理商 ) (02)28982488 家樂福
乳瑪琳 遠東化學工業有限股份公司 (03)3612248 興農超市
瑞穗鮮奶吐司 統一企業公司 0800037520 7-11
芝司樂
Fonterra Ltd, 紐西蘭
香港商遠東恆天然乳品有限公司 台灣分公司 (進口商 )
家樂福
家樂氏什錦果麥
家樂氏公司泰國瑞陽廠
美 商 家 樂 氏 行 銷 有 限 公 司 (進口商 )
0800888929 家樂福
健康果仁 菓風食品實業有限公司 (02)27721557 興農超市
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表二、Primer (Tm:melting temperature,變性溫度)
Gene Primer Sequence Size ( bp) Tm (℃)
ApoA-I (F)CTCTCAAGGAGAACGGCGGC
(R)CTTAGTGTACTCCTCGAGAGCG 176 55
ApoB (F)CATACAGTGAGCCAGCCTTGC
(R)GTTCCTCCTCCCCCAAGTTTA 181 57.1 LDL receptor (F)GCGTCCCTGTACAGATAGTGG
(R)GCCACTCATACATACAACGG 284 61.4 HMG-CoA Reductase (F)CCACGAACGCTCTTAGCTTTC
(R)CTAAGAGGCTCTCCATGCTGC 215 64.5 VLDL receptor (F)ACCTCTGGCCAAATATGCAC
(R)CACTCAGTCTTTGCAAACCTCC 304 61.4
β-actin (F)GGATGCAGAAGGAGATCACTG
(R)CGATCCACACGGAGTACTTG 90 61.4
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表三、受測者基本資料
基本資料 平均數±標準誤
年齡 23.1±0.7 身高(公分) 174.4±2.5 體重(公斤) 68.9±2.0
BMI(公斤/公尺2) 22.6±0.4
最大攝氧量(毫升/公斤/分) 47.7±1.6
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圖一、實驗流程圖。F+EX:果糖加運動組 F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:
葡萄糖組。
補充碳水化合物 採血點 白血球 RNA 0 30 90 150 210 270 330 390 450
運動
高脂肪餐點 1. F+EX 2. F 3. G+EX 4. G
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TG(mmol/l)
0 1 2 3 4
5 F+EX
F G+EX G
圖二、血漿中總三酸甘油脂濃度變化,數值以平均數±標準差表示。F+EX:果糖加 運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。§ 則是 F+EX 組與 F+EX 的baseline 比較有顯著差異,※F 組與 F 組 baseline 比較有顯著差異,#則 G+EX 組與G+EX baseline 比較有顯著差異,*為 G 組與 G 組 baseline 比較有顯著差異。
0 30 90 120 150 210 270 330 390 450 時間(分)
*
#
§
§
※
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TC(mmol/l)
0 2 4 6
8 F+EX
F G+EX G
圖三、血漿中總膽固醇濃度變化,數值以平均數±標準差表示。F+EX:果糖加運動
組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。﹢為 G 與 G+EX 兩組比較有
顯著差異
﹢
0 30 90 120 150 210 270 330 390 450
時間(分)
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HDL-C(mmol/l)
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
2.5 F+EX
F G+EX G
圖四、血漿中高密度脂蛋白膽固醇濃度變化,數值以平均數±標準差表示。F+EX:
果糖加運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。$為 F+EX 組與
F+EX 組第 90 分鐘比較有顯著差異,※為 F 組與 F 組 baseline 比較有顯著差異。
0 30 90 120 150 210 270 330 390 450 時間(分)
※ ※
$
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LDL-C(mmol/l)
0 1 2 3 4
5 F+EX
F G+EX G
圖五、血漿中低密度脂蛋白膽固醇濃度變化,數值以平均數±標準差表示。F+EX:
果糖加運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。※F 組與 F 組 baseline 比較有顯著差異,§ 則是 F+EX 組與 F+EX 的 baseline 比較有顯著差異。
0 30 90 120 150 210 270 330 390 450 時間(分)
※
§
36 時間(分)
ApoA-I (mmol/l)
0 2 4 6 8
F+EX F G+EX G
圖六、血漿中載脂蛋白A-I 濃度變化,數值以平均數±標準差表示。F+EX:果糖加
運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。
0 30 90 120 150 210 270 330 390 450 時間(分)
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ApoA-I / beta-actin (arbitrary units)
0 5 10 15
20 F+EX
F G+EX G
baseline pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
圖八、載脂蛋白A-I 相對基因表現,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果糖加運
動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖。Baseline:第 0 分,pre-exercise:
第30 分,post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:第 450 分。
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pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
ApoA-I 改變量 (%)
-200 0 200 400 600 800 1000
F+EX F G+EX G
圖九、載脂蛋白A-I 基因改變率,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果糖加運動
組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖。pre-exercise:第 30 分,
post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:第 450 分。
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ApoB / beta-actin (arbitrary units)
0 5 10 15 20
F+EX F G+EX G
baseline pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
圖十、載脂蛋白B 相對基因表現,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果糖加運動
組F:補充果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。Baseline:第 0 分,
pre-exercise:第 30 分,post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:
第450 分。
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pre-exercise post-exercise OFTT 3h OFTT 6h
ApoB 改變量 (%)
-200 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600
F+EX F G+EX G
圖十一、載脂蛋白B 基因改變率,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果糖加運動
組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖。pre-exercise:第 30 分,
post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:第 450 分。
pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
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LDLR / beta-actin (arbitrary units)
0 5 10 15 20
25 F+EX
F G+EX G
baseline pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
圖十二、低密度脂蛋白相對基因表現,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果糖加 運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖。Baseline:第 0 分,
pre-exercise:第 30 分,post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:
第450 分。
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LDLR 改變量 (%)
-1000 0 1000 2000 3000 4000 5000
6000 F+EX
F G+EX G
pre-ex post-ex OFTT 3h OFTT 6h
圖十三、低密度脂蛋白接受器基因改變率,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果 糖加運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖。pre-exercise:第 30 分,
post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:第 450 分。
pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
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HMGCR / beta-actin (arbitrary units)
0 2 4 6 8
10 F+EX
F G+EX G
baseline pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
圖十四、羥甲戊二醯輔酶A 還原酶相對基因表現,數值以平均數±標準誤表示。
F+EX:果糖加運動組 F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。Baseline:
第0 分,pre-exercise:第 30 分,post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,
OFTT-6h:第 450 分。
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HMGCR 改變量 (%)
0 1000 2000 3000 4000 5000
F+EX F G+EX G
pre-ex post-ex OFTT 3h OFTT 6h
圖十五、羥甲戊二醯輔酶A 還原酶基因改變率,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:
果糖加運動組F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖。pre-exercise:第 30 分,post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:第 450 分。
pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
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VLDLR / beta-actin (arbitrary units)
0 5 10 15 20 25
30 F+EX
F G+EX G
baseline pre-exercise post-exercise OFTT-3h OFTT-6h
圖十六、極低密度脂蛋白相對基因表現,數值以平均數±標準誤表示。F+EX:果糖
加運動組 F:果糖組;G+EX:葡萄糖加運動組;G:葡萄糖組。Baseline:第 0 分,
pre-exercise:第 30 分,post-exercise:第 90 分,OFTT-3h:第 270 分,OFTT-6h:
第450 分。
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VLDLR 改變量 (%)
-5000 0 5000 10000 15000 20000 25000
F+EX F G+EX G
圖 十 七 、 極 低 密 度 脂 蛋 白 接 受 器 基 因 改 變 率 , 數 值 以 平 均 數
± 標 準 誤 表 示 。 F + E X : 果 糖 加 運 動 組 F : 果 糖 組 ; G + E X : 葡 萄 糖 加 運 動 組 ;G : 葡 萄 糖 。 p r e - e x e r c i s e: 第 3 0 分 , p o s t - e x e r c i s e : 第 9 0 分 , O F T T- 3 h : 第 2 7 0 分 , O F T T- 6 h : 第 4 5 0 分 。
p r e - e x e r c i s e p o s t - e x e r c i s e
O F T T 3 h O F T T 6 h
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49
50
51
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i n m e n w i t h m e t a b o l i c s y n d r o m e . J o u r n a l o f A p p l i e d P h y s i o l o g y , 1 0 3 ( 4 ) , 1 3 3 9 .
Z h a n g , J . , T h o m a s , T. , & B a l l , S . ( 1 9 9 8 ) . E f f e c t o f e x e r c i s e t i m i n g o n p o s t p r a n d i a l l i p e m i a a n d H D L c h o l e s t e r o l s u b f r a c t i o n s . J o u r n a l o f A p p l i e d P h y s i o l o g y , 8 5 ( 4 ) , 1 5 1 6 .
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