進口,主要作為休閒食品、糕餅烘焙、養生及素 食食品,96年進口量為開心果2150.8公噸,杏仁 3616.4公噸,葵花子1566公噸,南瓜子3004.6公 噸及西瓜子3307.0公噸(9)。美國進口食品檢測,
於2007年9月至2008年8月間, 開心果中黃麴毒素 超出限量有3次,南瓜子有2次,西瓜子2次(10);歐 盟之食品飼料快速警示系統(Rapid Alert System for Food and Feed, RASFF)於2007年進口及市售 食品檢測的不合格食品警示中,開心果中黃麴毒 素超出限量有176次,杏仁76次,西瓜子有17次
(11);日本於2007年,開心果中黃麴毒素超出限量 者有2次,杏仁有8次(12)。本局96年市售堅果類中 黃麴毒素含量調查(13),開心果檢體25件,檢出5件 (20%),有2件不合格(8%);杏仁檢體26件,檢出 4件(15.4%),無不合格者;瓜子類則尚未進行計 畫性之調查。為降低黃麴毒素暴露風險,維護國 人健康,於97年度針對開心果、杏仁、葵瓜子、
南瓜子及西瓜子等產品進行黃麴毒素污染情形調 查,本次調查檢驗結果可提供衛生行政主管機關 參考。
材料與方法 前 言
黃麴毒素(aflatoxin, AF)是一群結構相似且相 當安定的黃麴黴菌二級代謝產物,毒素種類包 括B1、B2、G1及G2,經常污染花生、玉米及棉花 籽,其他穀類、堅果類、瓜子類及香辛類食品 也會受其污染,黃麴黴菌Aspergillus flavus及A.
parasiticus為黃麴毒素的主要產生菌,前者僅產生 B型黃麴毒素,後者可生成B型及G型(1,2)。黃麴毒 素B1主要在肝臟經細胞色素系統(cytochrome P450, CYP)轉化成代謝產物,其中黃麴毒素B1外環氧化 物(AFB1-8,9 exo-epoxide),會與DNA的Guanine結 合,最後形成穩定的AFB1–formamidopyrimidine 結合物(AFB1- FAPY adduct),直接傷害DNA,且 具致突變性(mutagenecity)(3-6)。高劑量黃麴毒素會 造成肝病變或死亡,未達致死劑量(sublethal dose) 長期暴露可導致免疫抑制(immunosupression)及營 養不良(malnutrition),不論劑量高低其累積效應 (cumulative effect)均會增加罹癌風險,黃麴毒素 暴露與感染B型肝炎病毒對肝癌形成有協同作用
(2,7,8)。
我國堅果類及瓜子類食品絕大多數係自國外
市售開心果、杏仁及瓜子中黃麴毒素含量調查
陳銘在 傅曉萍 徐錦豐
東部檢驗站摘 要
為瞭解市售開心果、杏仁及瓜子產品中黃麴毒素污染情形,於97年4月至6月間委請7個 縣、市衛生局抽樣,共計111件,包括開心果25件,杏仁21件,葵瓜子22件,南瓜子25件及 西瓜子18件。依據行政院衛生署公告指定之食品中黃麴毒素檢驗法檢測,結果有109件符 合規定,開心果及葵瓜子檢體各有1件發現含有超出限量之黃麴毒素,檢出量分別為17.6及 28.4 ppb,不合格率為1.8%。衛生局已依法對業者加以處辦。本調查結果已於97年6月5日及 7月25日在衛生署消費者資訊網發布1則食品紅綠燈資訊及2則不合格食品資訊。
關鍵詞:開心果、杏仁、葵瓜子、南瓜子、西瓜子、黃麴毒素
一、檢體來源
97年4月至6月間由本局規劃委請臺北市、臺 北縣、臺中縣、臺中市、臺南市、高雄市及花蓮 縣等7個縣、市衛生局進行開心果、杏仁與瓜子採 樣,不重複抽樣,檢體寄送至本局東部檢驗站檢 驗,總抽樣件數為111件,如表一。送驗檢體之品 名係以送驗單或外包裝之標示為主,收到檢體後 先拍照存證並儘速檢驗,無法立即檢驗者及驗餘 檢體以冷凍(-20℃)方式保存。
二、儀器與設備
㈠ 免 疫 親 和 性 管 柱 : 採 用 內 含 對 黃 麴 毒 素 AFB1、AFB2、AFG1、AFG2具專一性單株抗 體之美國Vicam公司AflaTest-P管柱。
㈡ 高效液相層析儀(High performance liquid chromatograph): 日本Hitachi公司製造之 L-2300幫浦、螢光檢出器(Fluorescence detector)、L-2300自動樣品注射器,數據處 理則使用Hitachi公司之EZChrom Elite軟體。
㈢ 液相層析管柱:採用日本Nacalai公司製造 之Cosmos÷ 5C18-MS (5 μm,內徑4.6 mm × 150 mm)管柱。
㈣ 碘衍生化反應裝置:以日本Hitachi公司製造 之L-2300幫浦推動碘液,再接上三通接頭,
將業經HPLC管柱分離過之流出液與0.05%碘 液混合,續通過置於70℃恆溫槽之0.05 mm 內徑(ID)之PTEE材質管中以進行衍生化反 應。
三、試藥
㈠ 黃麴毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2標準 品為美國Supelco公司AflatoxinMix Kit-M之 產品,原液(溶劑為甲醇)濃度為AFB1 1 μg/
mL、AFB2 0.3 μg/mL、AFG1 1 μg/mL、AFG2
0.3 μg/mL,使用時以50%甲醇溶液稀釋至所 需之濃度。
㈡ 碘為試藥特級純品,甲醇為LC級,液相層析 移動相之水使用去離子水。
四、方法
依據衛生署90.01.09衛署食字第0900002652 號公告指定之中國國家標準總號4090類號N6097
「食品中黃麴毒素檢驗法」(14)檢驗,流程如下:
㈠萃取及淨化
檢體充分混合均勻後取100 g磨碎混勻,稱 取已磨碎檢體約25 g,精確稱定,置於不銹 鋼杯中,加氯化鈉5 g,加60%甲醇溶液125 mL,以15,000 rpm均質2分鐘後,以Whatman 1號濾紙過濾,取濾液20 mL加去離子水20 mL,以玻璃綿濾紙過濾,取濾液10 mL以1滴 /秒之流速通過免疫親和管柱,以去離子水10 mL清洗2次,抽乾,取甲醇1 mL以1滴/秒之 流速通過免疫親和管柱,收集流出液於有容 量刻度之褐色玻璃管中,加去離子水定容成2 mL,供作檢液。
㈡HPLC條件
層析 管柱:Cosmosil 5C18-MS,5 μm,內徑 4.6 mm × 150 mm。
螢光 偵測器:激發波長為360 nm,發射波長 為440 nm。
檢液 注射量:50 μL。
移動 相溶液:45%甲醇溶液,流速1.0 mL/
min。
衍生 化碘液:0.05%碘液,流速0.3 mL/min。
㈢ 本方法對AFB1、AFB2、AFG1、AFG2之檢出 限量分別為0.2、0.2、0.3及0.3 ppb。
結果與討論
一、調查結果本次調查計有7個縣市衛生局協助參與抽樣工 作,包含臺北市、臺北縣、臺中縣、臺中市、臺 南市、高雄市及花蓮縣,總計抽樣檢體111件,包 括開心果25件,杏仁21件,葵瓜子22件,南瓜子 25件及西瓜子18件,如表一。以上檢體依據行政 院衛生署公告指定方法進行黃麴毒素B1、B2、G1
及G2之檢驗。檢驗結果依據行政院衛生署82.01.04 衛署食字第8189322號公告食品中黃麴毒素限量標 準,堅果類及其他食品均為10 ppb(15)予以判定。
結果於111件檢體中,檢出黃麴毒素8件(7.2%),
其中有1件開心果及1件葵瓜子超出限量,不合格 率為(1.8%)如表二。依檢體種類區分,25件開心 果檢體中,有5件(20.0%)檢出黃麴毒素,檢出量 為0.2~17.6 ppb,其中有1件(4.0%)超出限量,檢 出量為17.6 ppb;杏仁21件中,檢出2件(9.5%),
檢出量分別為0.3與0.6 ppb;葵瓜子22件檢出1件 (4.5%),檢出量為28.4 ppb,判為不合格(4.5%);
至於南瓜子25件及西瓜子18件,均未檢出黃麴毒 素,如表二。以檢出黃麴毒素種類分析,8件檢體 檢出黃麴毒素之種類詳如表三所示,其中5件開心 果及2件杏仁檢出B型黃麴毒素,葵瓜子1件檢出B 型及G型黃麴毒素。
二、 國內外訂定之堅果及瓜子類中黃麴毒 素限量標準之比較
各國對堅果及瓜子類中黃麴毒素含量訂有限 量標準,美國將總黃麴毒素限量訂為20 ppb;中 國香港訂定總黃麴毒素及黃麴毒素B1限量均為15 ppb;伊朗訂定總黃麴毒素限量為15 ppb、黃麴毒 素B1限量為5 ppb;日本訂定黃麴毒素B1限量為10 ppb;歐盟訂定總黃麴毒素限量為4 ppb、黃麴毒 素B1為2 ppb(16),我國則訂定總黃麴毒素限量為10 ppb(15),顯示以歐盟對堅果及瓜子類中黃麴毒素所 訂之限量最為嚴格,如表四。
三、本調查與國內外文獻調查結果比較 伊 朗 為 我 國 開 心 果 第 一 大 進 口 國 , 於 2002~2003年間該國的開心果黃麴毒素不合格 率為7.5%(17);美國於1987~1997年間監測進口 開心果,黃麴毒素超量之比率為6.8%(1);另於 表一、各縣市衛生局送驗市售堅果及瓜子情形
縣市別 抽 樣 件 數
開心果 杏仁 葵瓜子 南瓜子 西瓜子 合計
臺北市 4 4 4 5 4 21
臺北縣 7 3 3 3 3 19
臺中市 3 3 3 3 3 15
臺中縣 2 2 2 2 2 10
高雄市 4 5 4 5 3 21
臺南市 2 2 4 4 1 13
花蓮縣 3 2 2 3 2 12
合 計 25 21 22 25 18 111
表二、市售堅果及瓜子檢出黃麴毒素情形 檢體
種類
抽驗 件數
檢出件數 (%)
總黃麴毒素量 範圍(ppb)
不合格件數 (%) 堅果類 46 7 (15.2) 0.2-17.6 1 (2.2)
開心果 25 5 (20) 0.2-17.6 1 (4.0)1
杏 仁 21 2 (9.5) 0.3 0
瓜子類 65 1 (1.5) 28.4 1 (1.5) 葵瓜子 22 1 (4.5) 28.4 1 (4.5)2
南瓜子 25 0 未檢出 0
西瓜子 18 0 未檢出 0
合計 111 8 (7.2) 0.2-28.4 2 (1.8) 1. 檢體抽樣自臺北縣,總黃麴毒素量為17.6 ppb
2. 檢體抽樣自臺南市,總黃麴毒素量為28.4 ppb
表三、市售堅果及瓜子檢出黃麴毒素種類情形 檢體
種類
黃麴毒素種類及含量(ppb) B1 B2 G1 G2 B1+ B2+G1+G2
開心果 0.3 - - - 0.3
開心果 0.2 - - - 0.2
開心果 15.9 1.7 - - 17.6
開心果 1.6 - - - 1.6
開心果 0.6 - - - 0.6
杏仁果 0.3 - - - 0.3
杏仁角 0.3 - - - 0.3
葵瓜子 18.6 2.9 6.5 0.4 28.4
表四、各國於堅果類與瓜子類檢體中之限量標準
國別 限量標準(ppb)
B1+B2+G1+G2 B1
美國 20 -
歐盟 4 2
日本 - 10
中國香港 15 15
伊朗 15 5
臺灣 10 -
1999~2002年間調查開心果原料中黃麴毒素含 量,不合格率則為1.1%(18);英國於2004年調查市 售開心果,黃麴毒素限量依照歐盟限量標準,則 不合格率高達19.2%(19);我國於1984年抽驗市售 開心果,均未檢出黃麴毒素(20),2007年抽驗市售 開心果25件,其不合格率為8%(13),2008年抽驗25 件,不合格率為4%,連續2年總計3件檢出開心果 含超量黃麴毒素,該3件開心果均進口自伊朗。
1987~1997年間美國監測進口杏仁,黃麴毒 素超量的比率僅1.2%(1),英國於2004年抽驗市售 杏仁,不合格率為7.1%(19),我國於1984、2007及 2008年3次抽驗市售杏仁,均無不合格者。美國 於1987~1997年間監測進口葵瓜子、南瓜子及西 瓜子,黃麴毒素超量的比率分別為10.0%,1.5%
及5.9%(1),我國於2008年首次抽驗市售葵瓜子、
南瓜子及西瓜子,則僅有葵瓜子1件(1.9%)檢出黃 麴毒素超量,該不合格之葵瓜子檢體係進口自中 國,如表五。
四、黃麴毒素之風險評估
根據美國FDA資料,一位曾企圖自殺之實驗 室工作人員,連續兩天食入12 μg/kg體重之黃麴 毒素B1,間隔6個月後,再連續14天食入11 μg/kg 體重之黃麴毒素B1,相當於每日食入0.66 mg黃 麴毒素B1,食用後產生短暫之起疹、噁心及頭痛 等症狀,經過14年追蹤,其身體狀況和肝功能皆 屬正常(21)。而本次調查污染量最高的葵瓜子中黃 麴毒素為28.4 μg/kg,其中黃麴毒素B1含量為18.6 (μg/kg),要達到上述案例劑量,需連續兩週每日 食用35.5公斤葵瓜子。WHO所屬之國際癌症研究
表五、臺灣與美國、英國及伊朗堅果類中黃麴毒素含量調查之比較
種類 國 別 年 別 檢出件數/抽驗件數(%) 不合格件數(%)
開心果
臺灣
19851 0/4 0
20072 5/25 (20.0) 2 (8.0)
2008 5 /25 (20.0) 1 (4.0)
美國 1987-19973 20/207 (9.7) 14 (6.8)
1999-20024 214 /2333 (9.2) 26 (1.1) 伊朗 2002-20035 2,852/10068 (28.3) 755 (7.5)
英國 2003-20046 16/26 (61.5) 5 (19.2)
杏仁
臺灣
19851 0/101 0
20072 4 /26 (15.4) 0
2008 2/21 (9.5) 0
美國 1987-19973 2/85 (2.3) 1 (1.2)
英國 2003-20046 6/14 (42.8) 1 (7.1)
葵瓜子 臺灣 2008 1/22 (4.5) 1 (4.5)
美國 1987-19973 3/20 (15.1) 2 (10.0)
南瓜子 臺灣 2008 0/25 0
美國 1987-19973 28/262 (10.7) 4 (1.5)
西瓜子 臺灣 2008 0/18 0
美國 1987-19973 46/252 (18.2) 15 (5.9)
1.取自曾等.1984.核果類污染黃麴毒素之調查(20) 2.取自陳等.2007. 市售堅果類中黃麴毒素含量之調查(13)
3.取自Counc÷ for Agricultural Science and Technology, Ames, Iowa, USA. 2003(1) 4.取自CCAFC, 35th Sessçn. (2003). Agenda item 15(d):1-7(18)
5.取自Cheraghali et al. (2007). Incidence of aflatoxins in Iran pistachç nuts(17) 6.取自FSA, UK. (2004). Survey of edible nuts for aflatoxin.(19)
中心(International Agency for Research on Cancer, IARC)已於1987年確認黃麴毒素為一級致癌物
(22),研究顯示,黃麴毒素暴露者的肝癌罹患率會 增加約3倍,B型肝炎病毒感染者(HBV infection) 會增加約7倍,同時具有2種危險因子,罹患率增 至約60倍(4,7,23),基於黃麴毒素的基因毒性與致癌 性,FAO/WHO未制定每日可耐受攝取量(tolerable da÷y intake, TDI),建議採用As Low As Reasonably Achievable (ALARA)原則,即食品中黃麴毒素含 量應盡量減少至合理可達到之範圍(16),在我國 還要考量B型肝炎病毒帶原在成人中的高盛行率 (15~20%)(24),加強可能污染黃麴毒素產品之源頭 管制,才能降低風險,維護國民健康。
五、不符規定檢體之後續追蹤與改善情形 經檢驗不合格檢體,均以檢驗結果速報單傳 真至衛生署食品衛生處及原抽樣衛生局,並請衛 生局依法儘速進行後續處理。不合格開心果產品 係抽樣自臺北縣之超級市場,檢出量為17.6 ppb (B1:15.9 ppb,B2:1.7 ppb),原料是由伊朗進 口。不合格之葵瓜子產品係抽樣自臺南市,檢出 量為28.4 ppb (B1:18.6 ppb,B2:2.9 ppb,G1: 6.5 ppb,G2:0.4 ppb),原料係由中國進口,進口 業者開啟貨櫃時發現部份葵瓜子已發黴,業者將 目視未發黴之葵瓜子售予食品加工廠分裝出售,
而使不合格產品流入市場。上述2件不合格產品衛 生局均已依法要求業者下架、回收並加以銷毀。
結 論
本調查檢測堅果及瓜子類製品共111件,結 果有1件開心果及1件葵瓜子黃麴毒素超出限量標 準,檢出濃度分別為17.6及28.4 ppb,不合格率 為1.8%。我國市售開心果、杏仁及瓜子類食品絕 大多數自國外進口,進口業者應選用符合我國黃 麴毒素限量規定的原料,同時加強原料運送及儲 存環境之控管,避免黴菌滋生,加工廠應加強原 料中黃麴毒素含量之自主檢驗,及儲藏環境之控 管,消費者選購上述商品時應選擇信譽良好廠商 之產品,如此才能有效降低國人黃麴毒素暴露風 險,以確保國人健康。
本調查結果已於97年6月5日及7月25日在衛生 署消費者資訊網發布1則食品紅綠燈資訊及2則不 合格食品資訊。
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Survey of Aflatoxin in Pistachios, Almonds and Seeds
MING-TZAI CHEN, HSIAO-PING FU AND JIIN-FUNG SHYU
Eastern Regçnal Laboratory
ABSTRACT
A survey of aflatoxin content in retailed pistachio, almond, and edible seeds was conducted by the Bureau of Food and Drug Analysis. One hundred and eleven samples including 25 pistachio, 21 almond, 22 sunflower seed, 25 pumpkin seed and 18 melon seed samples were collected by the local health officials from retailers from April to June in 2008. Samples were analyzed by the Chinese National Standard Method 4090. Eight samples (7.2%) contained aflatoxin ranging from 0.2 to 28.4 ppb. Among them, one pistachio and one sunflower seed samples (1.8%) were identified to contain aflatoxin at the levels of 17.6 ppb and 28.4 ppb respectively, which didn’t comply with the regulatory limits (10 ppb) of aflatoxin in nut and seed set in Taiwan.
Penalty was enforced by the local authority according to the Food Sanitation Management Act.
Key words: pistachio, almond, sunflower seed, pumpkin seed, melon seed, aflatoxin