禽畜肉品中氟苯並嘧唑氨基甲酸（flubendazole）
檢驗方法之探討
施如佳 張美華 林玉含 鄭秋真 周薰修 第四組
摘 要
本研究以高效液相層析法，建立豬肉、豬肝、雞肉、雞肝和雞 蛋中氟苯並嘧唑氨基甲酸（flubendazole）殘留量之檢驗方法。檢體
以乙 萃取，經過過濾，再以乙 飽和之正己烷去除油脂、雜質及
濃縮後，以Bond Elut C18 樣品處理匣淨化，最後利用高效液相層析 儀分析定量。所使用的液相層析管柱為 Luna 5µ C18（25 cm × 4.6 mm i.d., 5µm），並採用乙 與水（7:13, v/v）溶液為移動相溶液，
以紫外光檢測器偵測。經添加0.01、0.02 及 0.04 ppm flubendazole 標 準品之回收試驗，結果，豬肉部份的回收率為 92.7∼100.4%，變異係 數介於 0.8∼2.2%；豬肝的回收率為 97.7∼100.4%，變異係數介於 0.6∼2.1%；雞肉的回收率為 93.9∼99.1%，變異係數介於 1.4∼3.4%；
雞肝的回收率為91.6∼102.0%，變異係數介於 1.4∼5.1%；雞蛋於 0.02
、0.04 及 0.08 ppm 的添加回收率為 93.3∼95.3%，變異係數介於 0.5∼2.0﹪。本方法檢體的最低檢出限量，除了雞蛋為 8 ppb 外，其餘 均為 4 ppb。將此方法應用於市售豬肉、雞肉之殘留量分析，結果，
20 件檢體均未檢出。
關鍵詞： 動物用藥（veterinary drug）、氟苯並嘧唑氨基甲 酸 （ flubendazole ） 、 高 效 液 相 層 析 （ High Performance Liquid Chromatography）。
前 言
氟苯並嘧唑氨基甲酸（flubendazole）是 白色結晶性粉末，不易溶於水，為獸醫界和 醫藥界廣泛使用的驅蟲藥，許多國家核准使 用於飼料內投藥，可用於豬隻、家禽、狗、
貓 等 動 物 之 驅 蟲 (1) 。 flubendazole 是
Benzimidazole carbamate 類的化合物，具有 驅絲蟲（filarial parasites）和腸蟲（helminths parasitic worms）等寄生蟲之功效，主要能中 斷絲蟲（尤其是 Onchocerca volvulus）的胚 胎發育、排空肝醣以及減少糖類輸送(2)。文 獻顯示此類化合物對某些動物的胚胎有毒（
embryotoxic）和致畸型胎（tetratogenic）(3)
，因此訂定和管理禽畜肉品的限量是有其必 要性。
行政院農委會於民國 85 年 11 月公告之
「動物用藥使用手冊」中詳列 flubendazole 之使用動物種類、用法劑量、用途及停藥期 等。但是如果飼養業者於飼料中添加過高用 量、濫用及未能嚴格遵守停藥期之規定等，
不僅容易產生抗藥性而浪費經濟資源，而且 會導致藥物殘留於禽畜肉中，經由人體的攝 食而影響人體健康，故對於這些殘留問題的 管理，除了農政單位加強動物用藥使用者之 管理與輔導外，衛生單位加強上市肉品之檢 測與監控，亦可收相輔相成之效(4)。
行政院衛生署為防治動物用藥之濫用，
於 86 年 4 月公告之「動物用藥殘留標準」
，另於89 年增列了包括 flubendazole 等多種 動物用藥之殘留標準。其中規定豬肉和豬肝 之殘留不得高於 0.01 ppm、於家禽類肌肉之 殘留不得高於0.2 ppm、於肝臟不得高於 0.5 ppm、於蛋中則不得高於 0.4 ppm。因此本研 究為配合衛生標準之訂定的政策，進行禽畜 肉品中flubendazole 之檢驗方法探討。
材料與方法
一、檢體來源
本研究所使用之檢體係89 年 10 月至 11 月間購自台北地區各超級市場，其中豬肉和 雞肉各10 件。
二、試藥
對照標準品：
氟苯並嘧唑氨基甲酸（flubendazole）購 自日本關東化學株式會社。其結構式如
（圖一）所示。
化學名— Methyl 5-(4-fluorobenzoyl)-2- benzimidazolecarbamate 分子式— C18H12FN3O3
分子量— 313.29
圖一、Flubendazole 之結構式
Fig. 1. Chemical structure of Flubendazole
溶劑：
乙 、正己烷、甲醇及正丙醇均購自德 國 Merck 公司（Darmstadt），純度為 HPLC 級。
樣品處理匣：
Bond Elut C18 樣品處理匣（Bond Elut C18 cartridge）：C18 含量約 500 mg/3 mL，購自美國瓦里安(Varian)公司。
液相層析管柱：
Luna 5µ C18 (25 cm × 4.6 mm i.d., 5 µm) 購自美國 phenomenax 公司（Torrance, California 產品）。
三、儀器設備
均 質 機 （ACE homogenizer ） ： 日 本 Nihonseiki 公司（東京產品）。
減壓濃縮裝置（rotary evaporator）：瑞 士Buchi 公司（Herisau 產品。）
高效液相層析（high performance liquid chromatograph）Shimadzu LC-10 AT 溶 液輸出系統，配有紫外光/可見光檢測器
（Shimadzu SPD-10A），日本 Shimadzu 公司（京都產品）。
四、標準溶液之調製
標準原液
精確稱取flubendazole 標準品 100 mg，
以甲醇溶解並定容至 1000 mL，供作標 準原液。
標準溶液
精確量取上述標準原液以乙 稀釋，配 製成0.2∼5.0 µg/mL 之標準溶液備用。
五、分析方法 萃取
豬肉、豬肝、雞肉、雞肝和雞蛋檢體均 質後，取檢體約5 g（雞蛋 2.5 g），精 確稱定，置於均質機中，加入乙 30 mL，攪拌均質 3 分鐘後，以布赫納氏漏 斗抽氣過濾，再以乙 30 mL 充分洗滌 攪拌均質機，洗液再經過濾，合併濾液
，移入分液漏斗，加入乙 飽和之正己
烷50 mL，振盪 5 分鐘。乙 層移入濃 縮瓶中，加入正丙醇5 mL，於 40℃水 浴減壓濃縮至乾。
Bond Elut C18 樣品處理匣淨化 將上述檢體濃縮物以甲醇/水（4/6, v/v）
溶液10 mL 溶解，注入預先以甲醇/水（
4/6, v/v）溶液 10 mL 潤洗之樣品處理匣
，原濃縮瓶再以甲醇/水（4/6, v/v）溶液 5 mL 清洗三次，洗液亦注入樣品處理匣
，棄流出液。原濃縮瓶再以甲醇/水（
8/2, v/v）溶液 5 mL 清洗二次，洗液亦 注入 C18 固相萃取匣沖提，收集沖提液
，於 40℃水浴減壓濃縮至乾，殘留物以 甲醇溶解並定容至1 mL，經濾膜過濾後
，供作檢液，進行HPLC 定量分析。
HPLC 定量分析 HPLC 分析條件
層析管柱：Luna 5µ C18（25cm ×
4.6 mm i.d., 5µm）美國 phenomenax 公司（Torrance, California）產品。
移動相溶液：乙 ／水（7:13，v/v
）。
檢測波長：313 nm。
注入量：10 µL 標準曲線之製作
取 flubendazole 標準品依前述標準溶 液之調製配成 0.02、0.05、0.2、0.5、
1.0、2.5 及 5.0 µg/mL 七種濃度，精 確量取各 10 µL，分別注入高效液相 層析儀，依上述 HPLC 條件進行分析
，由積分儀之波峰面積與濃度作圖，
經回歸分析即可製成標準曲線。
含量測定
精確取上述檢液及標準溶液各 10 µL，
分別注入高效液相層析儀，就檢液與標 準溶液所得波峰之滯留時間及吸收光譜 圖比較鑑別之，並由標準曲線中求得 flubendazole 之含量，計算式如下：
檢體中flubendazole 的含量（ppm）
C × V ＝
W
C：由標準曲線中求得檢液中 flubendazole 濃度（µg/mL）
V：檢液最後定容之體積（mL）
W：取樣分析檢體之重量（g）
六、回收試驗
取均質後豬肉、豬肝、雞肉、雞肝檢體
（5 g）及雞蛋檢體（2.5 g），分別添加 0.05、0.10 及 0.20 µg/mL flubendazole 標 準溶液各 1mL，每一添加量作三重複，
同時作空白試驗，依前述分析方法操作
，經 HPLC 定量後，與原來已知標準溶
液濃度比較，即可計算出回收率。
七、最低檢出量試驗
將檢體分別添加各種濃度之標準溶液，
依前述方法進行測試。以訊號/雜訊比（S/N ratio）大於 3 作為判定基準，估算其最低檢 出量。
結果與討論
一、高效液相層析條件之探討 最適偵測波長之選擇
根據文獻，一般對於 Benzimidazole 類 驅蟲藥的檢驗，可採用紫外光分光光度 計(5)或以附紫外光檢測器、螢光檢測器 之高效液相層析法(3,6,7,8,9,10)分析，故本 研 究 首 先 以 紫 外 光 分 光 光 度 計 對
flubendazole 進行最適偵測波長的掃瞄。
（圖二）為 flubendazole 以紫外光分光 光度計於波長 200∼400 nm 之區間偵測 所 得 之 吸 收 圖 譜 。 由 圖 譜 顯 示 ， flubendazole 在 250 nm 及 313 nm 附近 各有極大吸收值。學理上 aromatic rings
（如苯環和芳香雜環）π鍵間的電子轉 移在 250 nm 波長附近會有能量吸收，
可能將造成干擾(11)。（圖三）便是添加 標準品至雞肉檢體時，以波長 250 nm 檢測時所發現的基質干擾，而在313 nm 波長則無此現象。Marti 等人(3)也提到在 UV 250 nm 波長偵測動物用藥時，其移 動相本身就會有吸收。因此flubendazole 在250 nm 的吸收波峰值雖高於 313 nm 的吸收波峰，本研究仍選擇 313 nm 為 最適之偵測波長。
圖二、Flubendazole 標準品溶於甲醇之紫外光吸收圖譜 Fig. 2. UV-absorption spectrum of Flubendazole in methanol.
(1).217 nm (2).222nm (3).225 nm (4).250nm (5). 313nm.
retention time (min) retention time (min) 圖三、在波長250nm 空白檢體出現之基質干擾高效液相層析圖譜
Fig. 3. HPLC chromatograms of matrix effect of the blank sample at 250 nm.
(A). Blank sample (B). flubendazole spiked into sample
移動相之確定
文獻中有關flubendazole（Benzimidazole 類）動物用藥的分析方法，大部分是多 重殘留分析方法，因此其移動相溶液大 都採用梯度式(8)或調整離子強度的緩衝 溶液(3)。因此本研究參考村山和齋藤(9) 的分析單一 flubendazole 液相層析條件
，以乙 ／去離子水（7：13）當作移 動相溶液，經注入不同濃度之標準品溶 液後，均可得到穩定和極佳的波峰，因 此本研究乃選擇此為移動相溶液。本研 究亦嘗試調整乙 和水的比例為 8：13 測試，結果分析時間減少，但用於分析
添加標準品的檢體溶液時分離效果較差
，僅可當例行性的篩檢工作用。
二、前處理之探討 溶媒萃取之探討
文獻上對於禽畜肉中 flubendazole 動物 用藥之前處理，大多先以乙酸乙酯(9)、
乙 (3,10)或甲醇／乙 ／偏磷酸溶液(8)萃
取後，再經 Sep-pak Alumina A 樣品處 理匣或C18 樣品處理匣進行固相萃取等 淨化步驟。高等人(4)指出以甲醇/偏磷酸 溶液或乙 ／偏磷酸溶液為萃取溶媒時
，會造成減壓濃縮費時較長，且於往後
固相萃取淨化步驟中，較易阻塞管柱，
增加操作之困擾。因此本研究針對乙酸 乙酯、乙 進行實驗後發現，乙酸乙酯 會將檢體中的油脂大量萃取出來，即使 再經正己烷液處理都無法完全去除，結 果造成干擾和回收不穩定的現象。若以
乙 作為萃取溶媒，則無上述現象，而
且再經乙 飽和之正己烷溶液可去除多 餘的脂質和油溶性雜質，故本研究選擇 乙 為最佳萃取溶媒。
淨化條件之探討
將檢體以乙 萃取，經乙 飽和之正己
烷溶液脫脂後，直接以 HPLC 分析，發 現肉類檢體的 HPLC 圖譜雜質干擾較少
，但肝臟類檢體則因肝臟是生物體的物 質代謝中樞，具有氧化還原、解毒、轉 變、排泄等多種作用，因此其中含有許 多酵素、蛋白質、荷爾蒙等複雜成份，
極易造成干擾而無法判別定量，因此須 將萃取物淨化處理。
村山和齋藤(9)提出以Sep-pak Alumina A 樣品處理匣淨化檢體，其回收可達 80%
以上。經初步實驗發現，添加高濃度 flubendazole 標準品（1.0 ppm）至雞肉 檢 體 進 行 回 收 試 驗 ， 回 收 率 可 達 88.4∼96.6﹪（三重複），但是在低濃度 標準品添加回收試驗時卻發現回收不穩 且 不 佳 。 根 據 多 次 測 試 發 現 Sep-pak Alumina A 樣品處理匣無法完全吸附 flubendazole，此現象在高濃度時影響不
大，但對低濃度檢測及最低偵測極限的 建立有很大的影響。故必須重新選擇其 他淨化方式。
Marti 等人(3,10)以C18 管柱淨化肉類檢體
，村山和齋藤(9)也提到對於肝臟等基質 干擾嚴重的檢體，除了以 Alumina-A 樣 品處理匣淨化外，會再輔以C18 樣品處 理匣加強淨化效果。而 Horie 等人(8)曾 對於日本市售的不同品牌C18 樣品處理 匣進行多種動物用藥的淨化試驗，結果 發現添加0.1 ppm flubendazole 之標準品 至豬肉檢體，並以C18 的樣品處理匣淨 化時均能有穩定且良好的回收效果（
90%以上）。
沖提液之選擇
一般C18 樣品處理匣處理過程是先以甲 醇活化、水洗，最後改變沖提液極性將 所要的物質沖提出來。本研究參考 Hsu 等人(12)、高等人(4)的沖提條件，經再三 修改測試後，發現將檢體濃縮物以甲醇/
水（4/6，v/v）溶液 10 mL 溶解，注入 預先以甲醇/水（4/6，v/v）溶液 10 mL 潤洗之樣品處理匣，最後再以甲醇/水（
8/2，v/v）溶液 15 mL 沖提等淨化步驟
，不僅能將雜質干擾明顯降低（尤其是 肝臟類），而且也不會妨礙回收效果。
因此基於上述探討，本研究乃採用具最 佳回收率的C18 (Bond Elut)為最佳樣品 處理匣（圖四）。本檢驗方法的整個操 作流程如（圖五）。
retention time (min) retention time (min)
圖四、雞肝中添加flubendazole 標準品 0.04 ppm 以 C18 處理匣淨化前後之高效液相層析圖譜 Fig. 4. HPLC chromatograms of flubendazole 0.04 ppm spiked into chicken liver samples and cleaned
up with C18 cartridge. (A). before clean-up (B).after clean-up Sample
Extrated with 30 mL of CH3CN for 3 min and filtered Filtrate
Partitioned with 50 mL of n-hexane saturated with CH3CN for 5 min
n-Hexane layer CH3CN layer
(discarded) Added with 5 mL of n-propanol Evaporated to dryness
Residue
Dissolved with 10 mL of MeOH：H2O (4：6，v/v)
before use
Bond Elut C18 cartridge (500 mg)
Washed with 15 mL of MeOH：H2O(4：6，v/v) Eluted with 10 mL of MeOH：H2O(8：2，v/v) Eluate
Evaporated to dryness Residue
Dissolved with 1 mL of MeOH HPLC-analysis
圖五、檢液製備的流程圖
Fig.5. Analytical procedure of Flubendazole in meat samples.
三、標準曲線之製作及添加回收試驗 將 flubendazole 標準品依前述標準曲線 製 作 方 法 繪 製 得 標 準 曲 線 （y=153896x ＋
1542.3），其線性迴歸係數（r2）為0.9999，
表示 flubendazole 在 5 ug/mL 內之濃度與波 峰面積有良好之正比例關係（圖六）。
圖六、Flubendazole 之標準曲線圖 Fig. 6. Standard curves of Flubendazole
將豬肉、豬肝、雞肉及雞肝檢體均質絞 碎後各取約 5 g，精確稱定，分別添加 0.05
、0.10 及 0.20 ppm 之 flubendazole 標準品
，每一添加量作三重複，同時作空白試驗，
依本檢驗方法進行回收試驗，結果如（表一
）所示。豬肉之回收率為 92.7∼100.4﹪，變 異 係 數 為 0.8∼2.2 ﹪ ； 豬 肝 之 回 收 率 為 95.8∼100.4﹪，變異係數為 0.6∼2.1﹪；雞肉 之 回 收 率 為 93.9∼99.1 ﹪ ， 變 異 係 數 為 1.4∼3.4﹪；雞肝之回收率為 91.6∼102.00﹪，
其變異係數為1.4∼5.1﹪間；雞蛋檢體則是取 全蛋，均質後精稱 2.5 g，分別添加 0.05、
0.10 及 0.20 ppm 之 flubendazole 標準品，
每一添加量也作三重複及空白試驗，依本檢 驗 方 法 進 行 回 收 試 驗 ， 結 果 回 收 率 為 93.3∼95.3﹪，變異係數為 0.5∼2.0﹪。（圖七 至圖十一）分別為豬肉、豬肝、雞肉、雞肝 及雞蛋之空白檢體及添加 flubendazole 標準 品之回收試驗HPLC 圖譜。
y = 153896x + 1542.3 R 2 = 0.9999
0 200000 400000 600000 800000 1000000
0 1 2 3 4 5 6
conc (ppm)
peak area
表一、豬肉、豬肝、雞肉、雞肝及雞蛋中添加Flubendazole 之回收率
Table 1. Recoveries of flubendazole spiked into swine muscle, swine liver, chicken muscle, chicken liver, and egg
Sample Spiked level
(ppm)
Recoverya (%) Swine muscle 0.01
0.02 0.04
100.4 (2.2)b 93.2 (1.0) 92.6 (0.8)
Swine liver 0.01 0.02 0.04
100.4 (0.6) 95.8 (1.3) 98.4 (3.4)
Chicken muscle 0.01 0.02 0.04
102.0 (3.4) 97.6 (1.4) 91.6 (5.1)
Chicken liver 0.01 0.02 0.04
95.3 (2.0) 93.3 (1.0) 93.4 (0.5)
Chicken egg 0.02 0.04 0.08
95.3 (2.0) 93.3 (1.0) 93.4 (0.5)
a: average of triplicate
b: value in the parenthesis is coefficient of varitation (%)
retention time (min) retention time (min) retention time (min) 圖七、豬肉檢體中添加0.04 ppm flubendazole 標準品 之高效液相層析圖譜 (A) flubendazole 標準
品 (B)豬肉空白檢體 (C) flubendazole 添加於豬肉中
fig.7. HPLC chromatograms of (A). flubendazole standard at 0.04 ppm (B). swine muscle blank (C).
swine muscle spiked with 0.04 ppm flubendazole
retention time (min) retention time (min) retention time (min) 圖八、豬肝檢體中添加0.04 ppm flubendazole 標準品 之高效液相層析圖譜 (A) flubendazole 標準
品 (B)豬肝空白檢體 (C) flubendazole 添加於豬肝中
Fig. 8. HPLC chromatograms of (A). flubendazole standard at 0.04 ppm (B). swine liver blank (C). swine liver spiked with 0.04 ppm flubendazole
retention time (min) retention time (min) retention time (min) 圖九、雞肉檢體中添加0.04 ppm Flubendazole 標準品之高效液相層析圖譜(A)flubendazole 標準品
(B)雞肉空白檢體(C)flubendazole 添加於雞肉中
Fig. 9. HPLC chromatograms of (A). flubendazole standard at 0.04 ppm (B). chicken muscle blank (C).
chicken muscle spiked with 0.04 ppm flubendazole
retention time (min) retention time (min) retention time (min) 圖十、雞肝檢體中添加0.04 ppm Flubendazole 標準品之高效液相層析圖譜(A)flubendazole 標準品
(B)雞肝空白檢體(C)flubendazole 添加於雞肝中
Fig. 10. HPLC chromatograms of (A). flubendazole standard at 0.04 ppm (B). chicken liver blank (C).
chicken liver spiked with 0.04 ppm flubendazole
retention time (min) retention time (min) retention time (min)
圖十一、雞蛋檢體中添加0.08 ppm flubendazole 標準品之高效液相層析圖譜 (A) flubendazole 標準 品 (B)雞蛋空白檢體 (C) flubendazole 添加於雞蛋中
Fig. 11. Chromatograms of (A). flubendazole standard at 0.08 ppm (B). egg blank (C). egg spiked with 0.08 ppm flubendazole
將豬肉、豬肝、雞肉、雞肝及雞蛋檢體 添加各種濃度之 flubendazole 標準溶液，以 本檢驗方法分析，當波峰高度為雜訊之 3 倍 高時，檢體中 flubendazole 之含量為最低檢
出限量。經試驗結果，豬肉、豬肝、雞肉及 雞肝檢體之最低檢出量為 4 ppb，雞蛋之最 低檢出量為 8 ppb。（圖十二）為檢體中 flubendazole 最低檢出量之 HPLC 圖譜。
retention time (min) retention time (min)
retention time (min) retention time (min) retention time (min)
圖十二、檢體中flubendazole 最低檢出量之高效液相層析圖譜 Fig. 12. HPLC chromatograms for detection limit of flubendazole.
(A) swine muscle spiked with 4 ppb flubendazole (B) swine liver spiked with 4 ppb flubendazole (C) chicken muscle spiked with 4 ppb flubendazole (D) chicken liver spiked with 4 ppb flubendazole (E) egg spiked with 8 ppb flubendazole.
四、本研究建立之檢驗方法與相關文獻之比 較
文獻上探討肉品中 flubendazole 檢驗方 法的有村山和齋藤(9)的單一檢驗法和 Marti 等人(3)、Horie 等人(8)、Hitoshi 等人(10)之多重 殘留方法。村山和齋藤(9)檢測豬肉、豬肝、
雞肉、雞肝及雞蛋中 flubendazole 殘留量，
是先以乙酸乙酯萃取，再經Sep-pak Alumina A 樣品處理匣淨化，最後以高效液相層析儀 配合紫外光檢測器分析。添加標準品於豬肉
、豬肝、雞肉、雞肝的回收率在 83.9∼95.4﹪
間；雞蛋部份添加 0.4 ppm 濃度之回收率為 90.6﹪，但 0.055 ppm 部份則僅有 78.2﹪，
回收效果差。其所顯示之 HPLC 圖譜基線不 平穩，雜質干擾多，而且波峰分離效果不佳
。Marti 等人(3)提出以乙 萃取，再以C18 管 柱淨化，配合高效液相層析儀偵測的檢驗流 程，分析肝、腎和肉類檢體之多種動物用藥 殘留。當添加0.1 mg/kg flubendazole 標準品 至肝、腎和肉類檢體中，其回收率分別是 70
﹪、74﹪及 73﹪；Horie 等人(8)分析禽畜肉 和魚肉中包括flubendazole 等 13 種動物用藥
，先以 0.25% metaphosphoric acid-methanol- acetonitrile （6:2:2, v/v）萃取，再以 Oasis HLB（60 mg）的樣品處理匣淨化。結果添 加 0.05 ppm flubendazole 標準品至牛肉、豬 肉 、 雞 肉 中 進 行 三 重 複 回 收 試 驗 分 別 為 83.5±2.8 ﹪ 、 81.3±3.3 ﹪ 、 87.7±2.9 ﹪ ； Hitoshi 等 人(10)分 析 豬 肉 和 豬 肝 中 包 括 flubendazole 等 6 種 Benzimidazole 類的動物
用藥，先以乙 萃取，再以經乙 飽之正己
烷溶液去除雜質後，以 Sep-pak C18 管柱淨 化，若檢體為肝臟則會再以 silica 管柱淨化
。結果添加 1 ppm flubendazole 標準品至豬
肉 和 豬 肝 中 進 行 五 重 複 回 收 試 驗 分 別 為 90.3±4.6﹪和 96.7±10.7﹪。但是該方法僅進 行單一種濃度的回收試驗，而且豬肝部份的 回收變動較大。相較之下，本研究所建立的
方法係以乙 作為萃取溶媒，經乙 飽之正
己烷溶液去除油脂和雜質後，以C18 樣品處 理匣淨化，最後以 HPLC 定性定量，方法極 為簡便，HPLC 圖譜之波峰形狀及分離效果 極佳；而且添加標準品於五種檢體的回收率 均可達 90%以上，具有良好的精確性和再現 性，本方法確具可行性，可作為衛生單位檢 驗禽畜肉品中flubendazole 之依據。
五、市售禽畜肉品中flubendazole 之殘留量 調查
由台北市各超級市場抽購豬肉及雞肉檢 體各 10 件，依本研究建立之方法檢測，結 果均未檢出。依我國現行之「動物用藥殘留 標準」規定，flubendazole 在豬肉和豬肝之殘 留不得高於 0.01 ppm；於家禽類肌肉之殘留 不得高於0.2 ppm、於肝臟不得高於 0.5 ppm
、於蛋中則不得高於0.4 ppm，則此 20 件檢 體均符合規定。
結 論
本研究探討豬肉、豬肝、雞肉、雞肝及 雞蛋中 flubendazole 之檢驗方法。檢體中之 flubendazole 以乙 萃取，經乙 飽和之正己 烷去除油脂、雜質後，經C18 樣品處理匣淨 化，最後以 HPLC 配合紫外光檢測器檢測分 析。添加 flubendazole 於五種檢體之回收率 分別介於 91.6∼102.0﹪之間。最低檢出量除 雞蛋為8 ppb 外，其次均為 4 ppb。本檢驗方 法檢驗過程簡單，分析時間短而且精確性和 再現性均極佳，可以廣泛用於定性定量禽畜
肉品中之 flubendazole 之殘留。因本研究主 要是建立禽畜肉品中 flubendazole 之快速精 確分析方法，因此調查部份僅抽驗北部地區 之禽畜肉品檢體，如欲了解全國禽畜肉品中 flubendazole 的殘留情形，尚待進一步市售品 之全面性抽驗。
參考文獻
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Determination of Flubendazole in Swine muscle, Swine liver , Chicken muscle, Chicken liver, and Egg by High
Performance Liquid Chromatography
Ru-Chia Shih, Mei-Hua Chang, Yu-Han Lin, Chieu-Chen Cheng and Shin-Shou Chou Division of Food Chemistry
ABSTRACT
A simple and sensitive detection method based on C18 reversed-phase high performance liquid chromatography （HPLC） with UV-detection at 313 nm was presented for the residual determination of flubendazole in swine and chicken muscle, swine and chicken liver, and egg. Flubendazole was extracted from samples with acetonitrile, then filtered. The extract was partitioned with n-hexane, evaporated to dryness, and then cleaned up through C18 cartridge before quantitatively determinated by HPLC. Flubendazole was analyzed by HPLC on a column of Luna 5µ C18（25cm × 4.6 mm i.d., 5µm）
using acetonitrile/ water（7/13，v/v） as eluent，and determined by UV detector. The average recoveries of flubendazole spiked into samples at the levels of 0.01, 0.02, and 0.04 ppm were in the range of 92.7∼100.4﹪for swine muscle，97.7∼100.4﹪for swine liver，93.9∼99.1﹪for chicken muscle，
91.6∼102.0﹪for chicken liver respectively. Similarly spiking into egg at the levels of 0.02, 0.04, and 0.08 ppm were in the range of 93.3∼95.3﹪. Coefficients of variation were less than 5.1﹪. The detection limits were 4 ppb in all tissue samples but was 8 ppb for egg. No residue of flubendazole was detected in twenty samples which were purchased from various supermarkets in Taiwan.
Key words: veterinary drug, flubendazole, high performance liquid chromatography.
