第三章 研究方法
第三節 分析項目與方法
一、水質分析
本研究試驗之水質監測項目為〆化學需氧量 (COD)、總固體物 (TS)、
懸浮固體物 (SS)、鹼度 (Alkalinity)及揮發酸 (Volatile acid)。均以中華民國 行政院環境保護署之環境檢驗所公告之水質檢驗標準方法 (NIEA)操作之,
唯揮發酸是採用Dilallo Albertson (1961)直接滴定法來進行分析。其水質檢驗 標準方法如下〆
(一)水中化學需氧量檢測方法-重鉻酸鉀迴流法 (NIEA W515.53A)
( 二) 水中總溶解固體及懸浮固體檢測方法- 103℃-105℃ 乾燥 (NIEA 10.57A)
(三)水中鹼度檢測方法-滴定法 (NIEA W449.00B)
二、pH 值及氧化還原電位 (ORP 值)
以 pH meter、ORP meter (AI-ON MP-6100 pH meter)進行直接量測。
三、產氣量及氣體組成成份分析
以集氣設備收集並記錄各試程之產氣量,然後以氣相層析儀 (Gas Chromatograph〆GC)進行甲烷(CH4)、氫氣(H2)與二氧化碳(CO2)成份 之定量分析。
氣相層析儀操作條件如下 (林明正,1999)〆
(一) Shimadzu GC-14A Gas Chromatograph (GC 主機) 1.Detector-TCD〆100℃
2.Carrier gas-N2〆50 mL/min
3.Column〆2m×3.2mm ID*,max. temp.〆150℃
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4. Stuff〆HayeSep Q on 80/100 mesh
5.Temperature〆Injector 100 ℃、Oven 55 ℃、Detector 100 ℃ (二) Shimadzu C-R6A Chromatograph (積分儀)
1.Width〆5 sec 2.Slope〆65 μv 3.Min. Area〆50 μv 4.Stop Time〆4 min 5.Speed〆5 mm/min
四、揮發酸濃度測定〆
Hp 4890 Gas Chromatograph (一).檢測器(FID)〆175 ℃
(二)載流氣體〆N2(流速〆2 ml/min)
(三)層析管柱〆30m ×0.25mm ID,max.temp.250 ℃之毛細管柱 (四)管柱填充物〆FON 10% on 80/100 mesh Ceilite 545(A)
(五)操作溫度〆
1.Injector 200℃。
2.Oven 45℃停留3分鐘後以30℃/min升溫至200℃停留2分鐘。
3.Detector 200℃。
五、MLSS 測定
將Whatman Glass Microfiber Filters GF/B 濾紙置於 105℃的烘箱內,乾 燥24 小時,冷卻後秤重,得 W0(mg)。再由各個反應槽之取樣口,取出反 應槽中之污泥,以吸量管量取A mL 污泥以濾紙過濾,再次於 105℃的烘箱 內,乾燥24 小時,冷卻後秤重,得 W1(mg)。由(W1–W0)的差值,在除 以過濾污泥之體積(A/1,000 L),即可得單位反應槽體積的生物量大小
(mg/L)。
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六、數值分析分法
Gompertz equation 為指數型的非線性方程式,因此利用數值分析軟體 SigamaPlot V10.0 來 進 行 參 數 迴 歸 求 解 , 其 方 法 為 利 用 該 軟 體
“statistics”→“Dynamic Fit Wizard”功能,選取Gompertz equation模式,將修正 後方程式輸入,並將批次試驗各組數據代入,即可求得遲滯期(λ)、產能潛勢 (P)、最大反應速率(Rm)等參數之解。
七、醣類測定法
測定方法為Anthrone-Sulfuric Acid Method (Koehler, 1952),試藥與操 作步驟如下所示〆
(一)試藥〆(1) 1g Anthrone/1L conc. H2SO4
(2) Dextrose solution 100mg/L 無水 Dextrose/1L H2O
(二)實驗步驟〆(1) 取一支洗淨且乾燥試管。
(2) 加入 2mL 水樣。
(3) 加入 4mL Anthrone 試藥,並立即混合均勻。
(4) 將試管置入沸水中水浴加熱 10 分鐘後取出冷卻。
(5) 以波長 625μm 測吸光度。
八、纖維素分析方法 (一)樣本前處理〆
1.以纖維素測定儀收集樣本,先倒入 100mL 熱水再倒入樣本過濾後,再 倒入200mL 熱水清洗乾淨。
2.在 105℃強制通風箱乾燥 16 小時以上。
3.在乾燥氣中冷卻 1 小時,稱取樣本總重。
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(二)中洗纖維(NDF)
1.試劑〆
A.中性洗劑溶液〆蒸餾水溶解 EDTA(Disodium Ethylenediaminetetraacetate
( C10H14N2NaO8*2H2O )) 18.61g 、 Sodium Borate decahydrate ( Na2B4O7*10H2O ) 6.81g 、 Disodium Hydrogenphosphate(Na2HPO3)4.56g、Triethylene glycol 10mL、Sodium Lauryl Sulfate(C12H25OS3Na)30g。
B.α-Amylase 溶液,每樣本 0.64mL amylase(10,000 units)
C.Acetone 2.樣品萃取〆
(1)在 105℃強制通風箱乾燥坩鍋,在乾燥器中冷卻坩鍋 1 小時(及樣本),
稱重並紀錄坩鍋重量。
(2)取 1.0g 樣品(準確度±0.001g),置於坩鍋(W1)。在加熱器上加熱洗劑。
(3)熱萃取〆加 100ml 中性洗劑溶液及 α-Amylase 溶液,滴入 3-4 低消泡 劑(n-Octand)。大火(刻度 6)加熱煮沸,快煮沸時降低火強度(刻度 4),沸騰 60min。
(4)關閉加熱器,靜置 1min,觀察液面上是否出現脂質小球或液溶呈現乳 白狀,即樣本頇先進行冷萃取
(5)以 100mL 熱水清洗內容物,過濾 3min,進行二次。
(6)以 25mL(約坩鍋高度)Acetone 清洗內容物,過濾 3min,進行二次,
置於室溫10min。
(7)在 105℃強制通風箱乾燥 5 小時以上。
(8)在乾燥器中冷卻坩鍋,稱重並紀錄(W2)。
(9)在 525℃灰化爐中 5 小時。註〆置入樣本後加熱至 525℃在開始計時。
(10)降溫至 250℃以下,在乾燥器中冷卻 1 小時,稱重並紀錄(W3)。
中洗纖維乾物質量的計算如下〆
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(6)以 25mL(約坩鍋高度)Acetone 清洗內容物,過濾 3min,進行二次,
置於室溫10min。
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(四)酸洗木質素(ADL)
1.試劑〆
(1)72% Sulfuric acid(H2SO4)10N H2SO4比重〆1.84,濃度〆95%
72% H2SO4比重〆1.634 500*0.72*1.634*0.95=588.24g
500*0.72*1.634*0.95/1.84=319.6957mL (2)Acetone
2.樣品萃取〆
(1)可用酸洗纖維分析的原始重量(W1),置於冷萃取儀器上。
(2)加入 25mL 72% H2SO4,以玻棒攪拌成糊狀。
(3)將玻棒留在坩鍋中,每小時加一次,連續 3 小時,同時攪拌內容物。
(4)先以低壓過濾,若需再逐漸增加壓力。
(5)以 100mL 熱水清洗內容物,過濾 3min,進行二次。
(6)在 105℃強制通風箱乾燥 5 小時以上。
(7)在乾燥器中冷卻坩鍋,稱重並紀錄(W2)。
(8)在 525℃灰化爐中 3 小時。註〆置入樣本後加熱至 525℃在開始計時。
(9)降溫至 250℃以下,在乾燥器中冷卻 1 小時,稱重並紀錄(W3)。
中洗纖維乾物質量的計算如下〆
1 100 3
%NDF 2
W
W
W
65