3 - 1 問卷調查
問卷調查分為兩部分進行,一是進行抗腫瘤化學藥物平均使用 量調查,二是進行抗腫瘤化學藥物之廢棄物清運、收集及處理現況調 查。
3 - 1 - 1 調查對象
本研究針對全省 100 家區域醫院以上,醫學中心及癌症專科醫 院,進行問卷調查。
3 - 1 - 2 問卷內容 如表 3-1 及表 3-2。
3 - 2 殘量分析:
(1)5-FU 藥物用瓶,以醫院廢棄物中 5-FU 藥物瓶進行實測之殘量 分析。
(2)將所有藥物採最常用十五種藥物,(含不同劑量)藥物用瓶(共 20 種瓶子),做模擬標準添加及抽取步驟,以 4-Nitroaniline
3 - 2 - 1 5 - F U 醫院用藥之藥瓶品實測殘量分析 3 - 2 - 1 - 1 儀器與藥物
(1)醫院用葯:5-FU 250mg/5ml 2167298 UN1011 (2)5-FU 原廠葯(純度 99%) Lot:2000856 (3)CH3OH HPLC 級 Lot:707049 (4)H2O HPLC 級 Lot:611047
(5)HPLC Shimadzu LC-6A NOC20353103144 SA (6)HCOONH4 Ammonium Formate 昭和化學 SH-26455 (7)4-Nitroaniline TRADE TCI MARK Lot NO119 (8)1ml 2ml 4ml 之 pipet
(9)1.8ml 及 4ml 20ml 的 Vial
(10)UV BECKMAN DU650 NO.000130 (11)單盤天平 SER 12302876
(12)Column 管柱 Metachem Technologies Inc.
(13)3ml 的注射針筒
3 - 2 - 1 - 2 儀器分析條件及其作業流程:
(1)至醫院中取得已使用過的 5-Fu 之 Ample 點滴,回實驗 室備用。
(2)取 100ml 的 CH3OH 及 HCOONH4精確秤取 0.63g,於 1L 定 量瓶中,以 H2O 完全溶解,稀釋至刻度處,配成 1L 內 含 0.01N 的 HCOONH4之 10%CH3OH/H2O 溶液,此為 HPLC 的移動相。
(3)5-FU 之標準品以 CH3OH 溶解於 UV(BECKMAN DU650)偵測 器檢測得到,5-FU 最大吸收波長在 266μm 處。如圖 3-1
(4)在 HPLC 下設定波長為 266μm 處,移動相流速為 1.0ml/min,Column 為 Metachen Technologies Inc.
以上面配好之移動相,開機穩定一個小時後測定。
(5)以醫院用葯 5-FU 為標準品,用 CH3OH 稀釋成 1/20000,
於 HPLC 下測定 7 次,求 HPLC 之穩定度及再現性。
(6)以 5-FU 的標準品(Standard ) ,用 CH3OH 稀釋成 1.37
×10-7、4.11×10-7、1.23×10-6、3.70×10-6、1.11×
10-5、3.33×10-5、1.00×10-4M 之 7 種濃度,於 HPLC 同一條件下測定,求其 area 值,推算濃度與吸收面積 的直線相關值,斜率及截距,即得到 5-FU 的檢量線。
如圖 3-2,表 3-3。
(7)取醫院用葯 5-FU 之原液,用 CH3OH 稀釋成 1/60000,於
HPLC 用同一條件下測定其吸收面積,將吸收面積之值 代回檢量線,估算其儀器檢測回收率。
(8)將之前收集得到 5-FU 之 Ample 點滴,用 CH3OH 稀釋成 適當濃度,於 HPLC 同一條件下測定其吸收面積,將吸 收面積之值代回檢量線(如圖 3-3,表 3-3),再以回收 率測其實際殘餘的 5-FU 體積。
3 - 2 - 2 模擬試驗:
(1)取 4-Nitroaniline 標準品,用 CH3OH 溶解成適當濃 度,於 UV(BECKMAN DV650)偵測器檢測得知,
4-Nitroaniline 最大吸收波在 370μm 處。如圖 3-4。
(2)在 HPLC 下設定波長為 370μm 處,移動相流速為 1.0 ml/min column 為 Metachen Technologies lnc.以上 面配好之移動相,開機穩定 1 個小時後測定。
(3)取 4-Nitroaniline 0.138g 溶入 CH3OH 於 1 公升的定 量瓶中稀釋成定量,配成 4-Nitroaniline 之後 0.001M 的 CH3OH 標準溶液。
(4)4-Nitroaniline 溶液用 CH3OH 稀釋成 5.2×10-6、1.04
×10-5、2.09×10-5、4.18×10-5、8.35×10-5、1.67×
10-4、5.0×10-4、1.00×10-3M 之 8 種濃度,於 HPLC 同 一條件下測定,求其 Area 值,推算濃度與吸收面積的 直線相關值,斜率及截距,即得到 4-Nitroaniline 的 檢量線。如圖 3-5,表 3-3。
(5)取 4-Nitroaniline 的 1.00×10-3M 溶液,用 CH3OH 稀 釋成 1/200,於 HPLC 下測定 7 次,求 HPLC 之穩定度 及再現性。
(6)取 4-Nitroaniline 的 1.00×10-3M 溶液,用 CH3OH 稀 釋成 1/200,於 HPLC 用同一條件下測定其吸收面積,
將吸收面積之值代回檢量線,估算其儀器檢測回收率。
(7)將之前收集得到 5-FU 之 Ample 及點滴瓶洗乾淨,把配 好的 0.001M 之 4-Nitroaniline 溶液裝入,然後再模 擬醫護人員抽出瓶中溶液。最後用 CH3OH 溶解其中的 殘留液,於 HPLC 用同一條件下測定其吸收面積,將吸 收面積之值代回檢量線,再以回收率測其實際殘餘原 濃度的 4-Nitroaniline 體積。與實測實驗體積作比 對。
(8)將之前收集得到上述 15 種藥物 Ample 洗乾淨,把配好 的 0.001M 之 4-Nitroaniline 溶液裝入,然後再模擬
醫護人員抽出瓶中溶液(由藥師按標準步驟進行)。最 後用 CH3OH 溶解其中的殘留液,於 HPLC 用同一條件下 測定其吸收面積,將吸收面積之值代回檢量線,再以 回收率測其實際殘餘原濃度的 4-Nitroaniline 體積。
3 - 3 裂解試驗( T G A 等溫加熱速率) :
本研究以 5-FU 化療藥物為例,分別在氮氣環境中進行等溫裂解試 驗,以瞭解其破壞去除率,與溫度作用之間的關係,以及其裂解過程 中可能產生之氣體。
3 - 3 - 1 實驗設備:
其 TGA 設備圖如圖 3-6 (1)天平
吊線:Pt.; Dia: 0.18mm。
吊盤:石英;Dia:20mm;2mm thicknss。
(2)反應管 (3)加熱爐
(4)爐體溫度控制器 (5)電腦
(6)數據擷取系統
(7)氮氣筒:騰詳;高純度氮氣。
(8)流量計:浮子流量計
3 - 3 - 2 實驗藥物 5-Fu 標準品。
3 - 3 - 3 實驗步驟
(1)檢查設備功能:洩漏測試、天平、控制器、加熱器、電腦….
等
功能之檢查。
(2)秤約 5.0mg±0.3mg 之樣品,放入反應管內之吊盤上。
(3)讓氮氣充氣至少 60min 以上。
(4)調整氮氣流量約 50ml/min。
(5)天平歸零,內部校正,待天平穩定後才開始進行下一步驟。
(6)鍵入密碼(10)。
(7)設定最終溫度(600℃)。
(8)設定加熱速率(1K/min、3K/min、5K/min)。
(9)開始加熱,同時擷取樣品重、溫度、時間….等資料,直至溫
度達最終溫為止。
(10)停止加熱。
3 - 4 焚化試驗( 瞬間加溫) :
仍以 5-FU、Cisplatin 、MTX 化療藥物為例,進行瞬間加溫焚 化試驗以瞭解其破壞去除率,並其與溫度作用之間的關係。
3 - 4 - 1 實驗設備 其設備圖如圖 3-7
(1)包括燃燒皿 (2)空氣進氣口 (3)廢氣排氣口
(4)電極與壓力、溫度量測裝置 (5)外界的空氣氣源
(6)訊號截取器、訊號處理器
3 - 4 - 2 實驗藥物 ( 1)5-Fu 標準品。
(2)Methotrexate 標準品。
(3)Cisplatin 標準品。
3 - 4 - 3 實驗步驟
(1)開啟電腦及溫度壓力量測軟、硬體。
(2)檢查儀器之安全性與校準。
(3)量測適當份量,於燃燒室內置放所需分析之汽油及化療藥物 (0.1g)。
(4)封閉燃燒室。
(5)進行灌氣。將氧氣或空氣,由高壓鋼瓶注入封閉後之燃燒 室,達 10 大氣壓,若灌入氧氣,假設空氣與氧氣為均勻混合,
並以總壓力算出含氧與氮氣之比值。若灌入空氣,則設以標準 空氣計算。灌入氣體以一次為原則,不得洩出,否則會把已揮 發的汽油氣排出,影響實驗精度。
(6)確定所有閥門關閉。
(7)以電腦記錄溫度與壓力之變化。
(8)點火引燃。
(9)注入氧氣後,再排放廢氣,使有害氣體可以部份與氧化合,
減少毒 性。(*在燃燒塑膠等含毒氣體,需注意有毒氣體的危 害。)
(10)再重覆注入氧氣,至少三次以後,拆卸燃燒裝置,並進行 適當之清除動作。(*以安全為原則,小心清除燃燒室之有害 物質,如氯化氫、戴奧辛….等)
(11)整理數據,繪成圖表。
3 - 5 氣體分析
為了瞭解化療廢棄物裂解後之燃氣組成,特以高溫爐在無氧(氦 氣)狀態下,分別設定 200℃至 600℃之溫度,將化療藥物取適當量放 入爐內裂解,在整個裂解過程中,以氦氣作 carry gas ,並以液態 氮利用其-196℃的溫度環境,會將產生之氣體固化特性,而收集到我 們所要之裂解產氣,再打入 GC-Mass 作氣體分析。
3 - 5 - 1 實驗設備 其設備圖如圖 3-8
(1) 高溫爐 (DF30, 溫度範圍:1200℃,溫度控制器:微電腦 P.I.D 自動演算功能、精度±1℃﹪、。
(2) 自行設計之 chamber (長 10cm*直徑 3.5cm*2πγ) (3) 容積 10ml 之玻璃瓶
(4) 液態氮 (5) 高氦氣 (6) 精密天秤
(7) K-type thermocouples (8) 浮子流量器
(9) GC-Mass (GC8000 series, MD800) (10) 空針
3 - 5 - 2 實驗藥物 ( 1)5-Fu 標準品。
(2)Methotrexate 標準品。
(4)Cisolatin
3 - 5 - 3 實驗步驟
(1) 設定高溫爐溫度。
(2) 準確量取所需之化療藥物(0.1g)放入玻璃瓶,再放入 chamber。
(3) 將 chamber 與高溫爐外之 carry gas (He) 管路接好,再 和放在液態氮內之收集裂解氣體之 Trap 管路接好。
(4) 設定 carry gas (He) 為 10cc/min 之流速,先通氦氣到 高溫爐內 30-40 分鐘以上。
(5) 啟動高溫爐開始加溫裂解,直到所設定之溫度(600℃),
關閉高溫爐開關。
(6) 從 trap 管抽取裂解氣體打入 GC/Mass,( GC/Mass 之設定 條件為從 a 每分鐘升溫 30℃,直到 45℃,持續 10 分鐘; b 每分鐘升溫 20℃,直到 100℃,持續 5 分鐘; c 每分鐘升溫 10℃,直到 230℃,維持 50 分鐘。分子量設定 20scan,氦 氣為 5SPI,oven dealy 為 0.02 秒。等待分析結果。
(7) 重覆此流程。