實驗共收集 7 位子癲前症病人胎盤及 7 位正常剖腹生產者胎盤，這 14 位孕婦的臨床資料(表三)，分析其基本資料後發現：母親生產體重在子 癲前症病人比正常者來的重(表四)，懷孕妊娠週數及胎兒出生體重在子 癲前症病人則明顯不足正常者，胎兒出生狀況(Apgar score)在子癲前症 病人，分數也明顯較低。而子癲前症者胎盤重量比正常者平均較重，但 這並無達到統計學意義。
2. Apoptosis Expression
細胞凋亡的評估是以 TUNEL 方法來表現，在滋養層細胞經 TUNEL stain 為棕色者代表陽性(圖一)，在子癲前症胎盤裡陽性比例平均值 0.37% ± 0.04%，而正常者為 0.18% ± 0.05%(表五)，具統計學意義。
3. Bcl-2 Expression
Bcl-2 protein 免疫組織化學染色在子癲前症與正常者胎盤 trophoblast cells 如 ( 圖 二 ) ， 經 IRS(Semiquantitative immunohistochemical Remmele score)分析兩者平均值(圖三)，在子癲前症胎盤裡陽性比例平 均值 4.03 ± 1.25，而正常者為 3.70 ± 0.86，雖然子癲前症滋養層細胞 質內Bcl-2 蛋白表現較正常者較低，但並無統計明顯顯著。
4. Ki-67 Expression
任何深棕色細胞核染色代表是陽性反應(圖四)，計算在陽性反應細則核 數目所占所有細胞百分比後(staining index)，子癲前症滋養層細胞 Ki-67 positive index 是 4.60 ± 0.20%，正常胎盤則為 3.96 ± 0.39% ，子癲前 症表現比正常者較明顯(表六)，P < 0.05。
5. VEGF & VEGF receptor-I
VEGF 免疫組織化學染色在子癲前症與正常滋養層細胞如(圖五)，經 IRS(Semiquantitative immunohistochemical Remmele score)分析與正 常者平均值(圖六)，在子癲前症胎盤裡陽性比例平均值 7.02 ± 1.15，而
正常者為 6.68 ± 0.73，雖然子癲前症滋養層細胞質內 VEGF 蛋白表現 較正常者較高，但並無統計明顯顯著(P>0.05)。VEGF receptor-I 在正常 胎盤中並無發現，而在子癲前症病人的胎盤絨毛內血管的內膜細胞及滋 養層細胞上卻可以發現(圖七)。
6. BMP family (bone morphogenetic protein)
BMP family (bone morphogenetic protein)包括 BMP-2、BMP-6、BMP-7，BMP-receptor，除了在 BMP-receptor 有輕度染上外，其他 BMP protein 則無發現染色結果(表七)，在子癲前症與正常者表現並無差異(圖
第四章 討論
第一節 結果討論
胎盤的凋亡是一種正常的生理現象，相較於 first-trimester 的胎 盤，third-trimester 的胎盤發生凋亡機率的確是比較高，而發生位置也不 因距離臍帶遠近而影響 14。雖然診斷細胞凋亡可以藉由顯微鏡下的特殊 形 態( 例 如 ： condensation of nuclear heterochromatin, first as a crescent apposed to nuclear membrane, later into single or multiple dense bodies) ， 但 這 並 不 是 簡 單 的 事 ， 而 電 子 顯 微 鏡 (electron microscopy)則是鑑別凋亡的” gold standard” 15，但昂貴器材並不是容易 取得。本實驗標本先經過 H&E stain ，但在光學顯微鏡下並無法確實區 分兩者明顯異常凋亡。再採用 TUNEL 方法評估胎盤凋亡。正常胎盤的 發生率，在 使用 TUNEL 檢測的 median rate 是 0.51%16，我們結果是 正常胎盤為 0.18%，子癲前症則為 0.37%，雖然較其他學者研究結果較 低；但子癲前症較正常胎盤的確較明顯。目前已經證實，子癲前症的胎 兒會有生長遲緩(intrauterine growth retardation)和子宮胎盤的循環不 良，增加組織的缺氧及凋亡。
Bulmer17 發現大部份的滋養層細胞核內有 Ki-67 的活性。Gerard18 更是發現隨著懷孕週數的增加，Ki-67 的表現逐漸減少。欲研究滋養層細
現，子癲前症的胎盤滋養層細胞Ki-67 的表現比正常者明顯，這結果和其 他學者相同 20，原因為何？目前尚未定論，認為可能因為子癲前症的胎 盤滋養層細胞受到傷害，為了修復受傷細胞，促使細胞核增殖反應，Ki-67 活性也增加。
正常懷孕情況下胎盤滋養層細胞會侵入母體子宮 decidua，remodel the spiral arteries，改變為低阻力血管(low resistance vessels)，以利母 體與胎兒血液交換；而對於子癲前症的滋養層細胞其侵入至子宮功能是異 常的，造成胎盤血流量不足及胎兒缺氧 26，而缺氧導致胎盤減少分泌 placenta growth factor (PlGF)27，up-regulate VEGF expression28，這推 論和我們的結果有相吻合，我們結果發現 VEGF 在子癲前症的表現(mean
± SD, 7.02 ± 1.15)比正常來的較多(mean ± SD, 6.68 ± 0.73)，雖然統計 學上並無明顯差別。VEGF 表現的增加可能不是子癲前症的特有改變，但 確是和胎盤功能的不正常和缺氧有關。VEGF 和其接受體是胚胎血管發育 的基本元素，即使破壞a single VEGF allele 導致死亡 21,25，VEGF 和接 受體在整個懷孕過程中均有作用 29，而病態的懷孕如子癲前症，其表現的 強度和疾病的嚴重程度及懷孕週數有關30。
VEGF 接 受 體 有 三 種 ： VEGFR-1 and VEGFR-3 主 要 在 syncytiotrophoblastic layer，而 VEGFR-2 則主要在胎盤的血管內膜細胞
上 ， 我 們 的 結 果 則 發 現 子 癲 前 症 的 滋 養 層 細 胞 及 內 膜 細 胞 上 均 有 VEGFR-1 表現，而正常者幾乎不表現。
BMPs 具有調節細胞之增生、分化及凋亡作用，目前已知部份疾病 與胚胎時期 BMPs 基因受到抑制或過度表現相關。BMPs 在子癲前症的 角色未知，我們研究資料發現 BMP protein 在胎盤子癲前症上的表現不 管正不正常均不明顯，而 BMP receptor 在子癲前症則為弱陽性，如何解 釋這表現是須要更深入的研究才能證實。
CD34 是一種 transmembrane glycoprotein，存在血管的內膜細胞 上，我們的結果顯示子癲前症與正常者在免疫組織化學表現強度上(stain intensity)無明顯差異，這和 Egbor, M. 31學者部份吻合，因為單純子癲前 症而無胎兒生長遲緩者(fetal growth restriction)，胎盤絨毛在長度、體 積、直徑、表面積是與正常無差別；但若合併有胎兒生長遲緩則在胎盤 絨毛及血管形狀則有明顯與正常不同。因為我們病人中並非全為嚴重子 癲前症，且數量不夠多，無法就胎兒體重不足者再分類。
第二節 研究限制
在利用光學顯微鏡分析計算結果時，由於所計算數目不少，例如一個 病人胎盤就數超過 2000 個細胞，長時間下來或許增加判斷上的誤差。本篇
蛋白質萃取分析，則像 BMP family, CD34, VEGF( vascular endothelial growth factor) & VEGF receptor-II，則會更是完美。
第五章 結論與建議