3-1
、︑､STZ 誘發第⼀一型糖尿病造成體重下降與⾼高⾎血糖及代謝參數變化
為了確定實驗使⽤用之動物是否罹患第⼀一型糖尿病，並且衡量其⽣生 理代謝參數的變化，我們在誘發後四周間量測各組⾎血糖、︑､體重、︑､飲⽔水
量、︑､排尿量、︑､攝⾷食量與排遺量的變化。︒｡在誘發第⼀一型糖尿病後的四周 後，罹患第⼀一型糖尿病之組別所增加的體重百分⽐比（-0.4±19%, N=6） 顯著低於其控制組（+37.2±14%, N=6）（p<0.05），同時罹患第⼀一型糖
尿病與⾼高⾎血壓之組別（-16.6±3%, N=6）之體重增加百分⽐比亦顯著低 於僅罹患⾼高⾎血壓組（+19.9±7%, N=6）（p<0.05）（圖 1）。︒｡誘發四周後
罹患第⼀一型糖尿病組之⾎血糖值（439±131 mg/dL, N=6） 相較於控制 組（81±17 mg/dL, N=6）有顯著提升（p<0.01），同時罹患第⼀一型糖尿
病與⾼高⾎血壓之組別⾎血糖值（537±77 mg/dL, N=6）亦顯著⾼高於僅罹患
⾼高⾎血壓組（69±12 mg/dL, N=6）（p<0.01）（圖 2）。︒｡
罹患第⼀一型糖尿病組別之攝⾷食量（WKY-STZ: 31.6±1.6 g, N=6;
SHR-STZ: 29.2±5.4 g, N=6）與排遺量（WKY-STZ: 28.7±7.6 g, N=6;
SHR-STZ: 29.7±14.8 g, N=6） 皆 顯 著 ⾼高 於 其 控 制 組 之 攝 ⾷食 量
（WKY-CON: 22.6±2.5 g, N=6; SHR-CON: 22.2±5.1 g, N=6）與排遺量
（WKY-CON: 14.6±1.4 g, N=6; SHR-CON: 16.5±4.2 g, N=6）（p<0.05）
（圖 3）。︒｡罹患第⼀一型糖尿病組別之飲⽔水量（WKY-STZ: 100.7±2.3 ml,
N=6; SHR-STZ: 97.5±0.7 ml, N=6）與排尿量（SHR-STZ: 89.0±11.5 ml,
N=6; SHR-STZ: 82.5±17.7 ml, N=6） 皆顯著⾼高於其控制組之飲⽔水量
（WKY-CON: 36.5±6.4 ml, N=6; SHR-CON: 34.7±4.5 ml, N=6） 與排
尿量（WKY-CON: 16.5±2.12 ml, N=6; SHR-CON: 9.3±1.2 ml, N=6）
（p<0.01）（圖 4）。︒｡由結果可知，我們所使⽤用的糖尿病誘發⽅方式可成
功的誘發第⼀一型糖尿病，且在四周內之⾎血糖與代謝數值即出現明顯的 改變。︒｡
3-2
、︑､⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病造成⾎血液⾃自由基增加⾼高⾎血壓與糖尿病皆可能造成體內氧化壓⼒力的提升，⽽而不正常的氧 化壓⼒力增加除了會直接造成組織的損害，也可能誘發計劃性細胞死亡 或發炎造成進⼀一步的損害，進⽽而影響勃起功能。︒｡因此我們測量各組⽼老
⿏鼠⾎血液中超氧陰離⼦子與帶氫⾃自由基量，以了解不同傷害所造成的氧化
壓⼒力變化。︒｡
本實驗結果顯⽰示，同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組⾎血液超氧陰 離⼦子（CL Count = 5820±259/120 sec, N=6）顯著⾼高於⾼高⾎血壓組（CL
Count = 784±452/120 sec, N=6）、︑､第⼀一型糖尿病組（CL Count =
643±192/120 sec, N=6）與控制組（CL Count = 445±160/120 sec, N=6） (圖 5)。︒｡另⼀一⽅方⾯面，第⼀一型糖尿病組（CL Count = 393±158/120 sec, N=6） 與⾼高⾎血壓組（CL Count = 741±132/120 sec, N=6） ⾎血液中帶氫⾃自由基
顯著⾼高於控制組（CL Count = 117±74/120 sec, N=6），且同時罹患⾼高
⾎血 壓 與 第 ⼀一 型 糖 尿 病 組 ⾎血 液 中 帶 氫 ⾃自 由 基 （ CL Count =
4550±1537/120 sec, N=6）顯著⾼高於各組（圖 6）。︒｡由結果可知，⾼高⾎血 壓與第⼀一型糖尿病皆為造成實驗動物⾎血液氧化壓⼒力提升的因⼦子，且兩
者具有加成作⽤用。︒｡
3-3
、︑､⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病嚴重影響陰莖海綿體勃起內壓在成功誘發第⼀一型糖尿病四周後，我們量測各組別⽼老⿏鼠在短暫電
刺激陰莖海綿體神經時的陰莖海綿體內壓變化（圖 8），並且在進⾏行
⼀一氧化氮探針校正（圖 9）後量測海綿體組織⼀一氧化氮含量（圖 10）。︒｡
結果顯⽰示罹患第⼀一型糖尿病組（WKY-STZ: 29.78±2.25 mmHg, N=6）
與同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組（SHR-STZ: 36.40±1.20 mmHg,
N=6） 其 陰 莖 海 綿 體 勃 起 時 最 ⼤大 海 綿 體 內 壓 顯 著 低 於 控 制 組
（WKY-CON: 43.47±1.09 mmHg, N=6）（p<0.01）（圖 11）。︒｡
當將⾎血壓的因素計⼊入後，我們發現在海綿體內壓（圖 12）與平 均動脈內壓（圖 13）做⽐比值時，罹患第⼀一型糖尿病組（WKY-STZ:
0.43±0.01, N=6）與罹患⾼高⾎血壓組（SHR-CON: 0.45±0.01, N=6）其⽐比 值相較於控制組有降低的趨勢但無顯著差異（WKY-CON: 0.47±0.01,
N=6）； 同 時 罹 患 ⾼高 ⾎血 壓 與 第 ⼀一 型 糖 尿 病 組 其 ⽐比 值 （ SHR-STZ:
0.37±0.01, N=6）顯著低控制組（p<0.01）、︑､第⼀一型糖尿病組（p<0.05）
與⾼高⾎血壓（p<0.05）（圖 14）。︒｡由實驗結果可知，第⼀一型糖尿病與⾼高⾎血 壓皆為造成⼤大⿏鼠勃起功能惡化的因⼦子，且同時罹患兩者時對於勃起功
能的傷害具有加成作⽤用。︒｡
3-4
、︑､左旋精氨酸與 CCL5 對由⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病所引起之勃起失常之治療效果
經由頸靜脈給予適當劑量的左旋精氨酸（L-Arginine, Sigma, Missouri, USA）（25 mg/kg body weight）之後，控制組（WKY-CON:
0.53±0.04, N=6）與第⼀一型糖尿病組（WKY-STZ: 0.45±0.01, N=6）勃 起時陰莖海綿體內壓與平均動脈壓之⽐比值（圖 14）相較於注射前皆 有改善的趨勢但無顯著差異；⾼高⾎血壓組（SHR-CON: 0.52±0.01, N=6）
及同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組（SHR-STZ: 0.46±001, N=6）勃 起時陰莖海綿體內壓與平均動脈壓之⽐比值相較於注射前皆有顯著改
善 （ p<0.05 ）。︒｡ 在 給 予 eNOS 抑 制 劑
N- 硝 基 -L- 精 氨 酸 甲 酯
（
N
ω-Nitro-L-Arginine methyl ester hydrochloride, L-NAME, Sigma,
Missouri, USA）（3 mg/kg body weight）後，各組別勃起時陰莖海綿體 內 壓 與 平 均 動 脈 壓 之 ⽐比 值 相 較 於 注 射 前 亦 皆 有 顯 著 的 下 降
（WKY-CON: 0.32±0.01, N=6; WKY-STZ: 0.28±0.02, N=6; SHR-CON:
0.19±0.00, N=6; SHR-STZ: 0.19±0.01, N=6）（p<0.01）。︒｡可知，勃起前 適量的給予左旋精氨酸對由⾼高⾎血壓或第⼀一型糖尿病引起之勃起功能
失常具有改善的效果。︒｡
我們也在控制組裡測試在給予 CCL5 之後勃起時陰莖海綿體內壓。︒｡
結果顯⽰示，相較於給予⽣生理⾷食鹽⽔水，在給予相同劑量予⼈人⼯工合成之
NO donor CysaCysd Lu5 (CCL5) 時（1
µg/300g body weight
），陰莖海 綿體勃起時海綿體內壓隨給予的電刺激強度增加（3V and 6V）（圖 16）。︒｡在給予不同劑量 CysaCysd Lu5 (CCL5) （1
µg, 2 µg, 3 µg and 4
µg/300g body weight
）靜脈注射後進⾏行陰莖海綿體神經電刺激，隨著 劑量的增加，陰莖海綿體勃起時海綿體內壓也隨之增加（圖 19）。︒｡上述結果顯⽰示 CCL5 具有提升勃起功能之潛在研究價值。︒｡
3-5
、︑､⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病嚴重影響陰莖海綿體組織⼀一氧化氮釋放能⼒力與 eNOS 表現量
在成功誘發第⼀一型糖尿病四周後，我們量測各組別⽼老⿏鼠在短暫電 刺激陰莖海綿體神經時的陰莖海綿體組織⼀一氧化氮釋放量變化（圖
17）。︒｡結果顯⽰示罹患第⼀一型糖尿病組（WKY-STZ: 2.79±0.05 nA, N=6）
勃起時陰莖海綿體內⼀一氧化氮含量有低於控制組（WKY-CON:
3.95±0.64 nA, N=6）的趨勢但無顯著差異；同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型 糖尿病組（SHR-STZ: 1.28±0.14 nA, N=6）顯著低於控制組（p<0.05）、︑､
第⼀一型糖尿病組（p<0.01）與罹患⾼高⾎血壓組（SHR-CON: 5.44±0.79 nA,
N=6）（p<0.05）。︒｡由實驗結果可知，第⼀一型糖尿病為造成海綿體內⼀一 氧化氮減少的因⼦子，且同時罹患⾼高⾎血壓時會使⼀一氧化氮的減少情形更 加惡化。︒｡
免疫組織化學染⾊色結果顯⽰示，⾼高⾎血壓組、︑､第⼀一型糖尿病組與同時 罹患兩者組之陰莖海綿體組織與動脈周遭 eNOS 蛋⽩白質表現較控制 組顯著減少（圖 26）。︒｡此結果顯⽰示⾼高⾎血壓與糖尿病的環境可能導致
eNOS 表現量改變或破壞 eNOS 蛋⽩白導致⼀一氧化氮合成能⼒力失常，也 為前述所觀察到陰莖勃起功能失常及陰莖組織⼀一氧化氮量減少之現
象提供⼀一個有⼒力地解釋。︒｡
3-6
、︑､左旋精氨酸改善勃起時陰莖組織⼀一氧化氮釋放能⼒力在勃起過程中，內⽪皮釋放⼀一氧化氮使陰莖海綿體平滑肌舒張讓更
多⾎血液流⼊入海綿體組織，因此⼀一氧化氮在勃起過程中扮演了關鍵的⾓角
⾊色。︒｡為了找尋因⾼高⾎血壓或糖尿病所導致的勃起功能失常，我們嘗試給 予內⽪皮細胞⽤用於製造⼀一氧化氮的前驅物左旋精氨酸（L-Arginine）（25
mg/kg）以改善勃起功能。︒｡在給予左旋精氨酸靜脈注射之後。︒｡勃起時 控制組陰莖海綿體組織內⼀一氧化氮含量（圖 17）（WKY-CON:
5.67±0.35 nA, N=6）相較於注射前（WKY-CON: 4.49±0.28 nA, N=6） 有顯著增加（p<0.05）；罹患第⼀一型糖尿病組陰莖海綿體組織內⼀一氧
化氮含量（WKY-STZ: 4.70±0.33 nA, N=6）相較於注射前（WKY-STZ:
3.05±0.26 nA, N=6）顯著的提升（p<0.05）；罹患⾼高⾎血壓組陰莖海綿體 組織內⼀一氧化氮含量（SHR-CON: 5.82±0.21 nA, N=6）相較於注射前
（SHR-CON: 4.68±0.28 nA, N=6）顯著的提升（p<0.05）；同時罹患⾼高
⾎血壓與第⼀一型糖尿病組陰莖海綿體組織內⼀一氧化氮含量（SHR-STZ:
2.24±0.33 nA, N=6）相較於注射前（SHR-STZ: 2.75±0.0.91 nA, N=6） 有增加的趨勢但無顯著差異。︒｡各組別在給予 eNOS 抑制劑
N-
硝基-L-精氨酸甲酯
（N
ω-Nitro-L-Arginine methyl ester hydrochloride, L-NAME,
Sigma, Missouri, USA）（3 mg/kg body weight）後，陰莖海綿體組織 內⼀一氧化氮含量相較於注射⽣生理⾷食鹽⽔水，控制組（WKY-CON:
2.78±0.14 nA, N=6）與第⼀一型糖尿病組（WKY-STZ: 0.99±0.29 nA, N=6）有顯著降低（p<0.01），⾼高⾎血壓組（SHR-CON: 4.42±0.34 nA, N=6） 與同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組（SHR-STZ: 1.89±0.07 nA, N=6）
有下降的趨勢但無顯著差異。︒｡我推測左旋精氨酸具有改善因⾼高⾎血壓或 糖尿病所導致的陰莖⼀一氧化氮釋放量不⾜足的潛在效果。︒｡
3-7
、︑､⾼高⾎血壓誘發陰莖海綿體組織、︑､⾎血管與神經細胞發炎反應於誘發第⼀一型糖尿病⼀一個⽉月後，西⽅方墨點的結果顯⽰示，第⼀一型糖 尿病組（WKY-STZ: 1.230±0.050 fold, N=6）、︑､⾼高⾎血壓組（SHR-CON:
1.742±0.043 fold, N=6） 及 同 時 罹 患 ⾼高 ⾎血 壓 與 第 ⼀一 型 糖 尿 病 組
（SHR-STZ: 1.937±0.095 fold, N=6）陰莖組織的發炎指標蛋⽩白 CD68 表現量顯著⾼高於控制組（WKY-CON: 1 fold, N=6）（p<0.01）。︒｡且⾼高⾎血
壓組及同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組陰莖組織的發炎指標蛋⽩白
CD68表現量皆顯著⾼高於第⼀一型糖尿病組（p<0.05）（圖 20）。︒｡免疫組 織化學染⾊色結果亦顯⽰示，相較於控制組，其他各組於陰莖海綿體、︑､⾎血 管與神經皆有顯著的發炎性蛋⽩白質CD68表現與代表發炎的肥⼤大細胞
(Mast cell) 的出現（圖 28）。︒｡
3-8
、︑､⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病誘發陰莖海綿體組織、︑､⾎血管與神經細胞凋亡
於誘發第⼀一型糖尿病⼀一個⽉月後，由西⽅方墨點的結果顯⽰示，罹患第
⼀一 型 糖 尿 病 組 （ WKY-STZ: 1.083±0.036 fold, N=6）、︑､ ⾼高 ⾎血 壓 組
（SHR-CON: 1.097±0.047 fold, N=6）及同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿 病組（SHR-STZ: 1.298±0.093 fold, N=6）陰莖組織的凋亡蛋⽩白
cleaved-Caspase-3 表現量較控制組（WKY-CON: 1 fold, N=6）有顯著 的增加（p<0.01）；且同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組陰莖組織的 凋亡蛋⽩白 cleaved-Caspase-3 表現量較罹患第⼀一型糖尿病組有顯著的
增加（p<0.05）（圖 21）。︒｡在 TUNEL 染⾊色裏可以發現罹患第⼀一型糖尿 病、︑､⾼高⾎血壓及同時罹患第⼀一型糖尿病與⾼高⾎血壓組的陰莖海綿體組織、︑､
⾎血管與神經細胞皆有出現凋亡的情形（圖 29）。︒｡
3-9
、︑､⾼高⾎血壓誘發陰莖海綿體組織、︑､⾎血管與神經細胞⾃自噬於誘發第⼀一型糖尿病⼀一個⽉月後，由西⽅方墨點的結果顯⽰示，罹患低
⼀一⾏行糖尿病組（WKY-STZ: 1.049±0.019 fold, N=6）、︑､罹患⾼高⾎血壓組
（SHR-CON: 1.123±0.023 fold, N=6）與同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿 病組（SHR-STZ: 1.158±0.043 fold, N=6）陰莖組織的細胞⾃自噬蛋⽩白
Beclin-1 表現量顯著⾼高於控制組（WKY-CON: 1 fold, N=6）（p<0.01）。︒｡
且⾼高⾎血壓組與同時罹患⾼高⾎血壓與第⼀一型糖尿病組陰莖組織的細胞⾃自
噬蛋⽩白 Beclin-1 表現量顯著⾼高於罹患低⼀一⾏行糖尿病組（p<0.05）（圖
22）。︒｡在免疫組織化學染⾊色結果裡顯⽰示，相較於控制組，其他各組於 陰莖海綿體、︑､⾎血管與神經皆有顯著的細胞⾃自噬蛋⽩白 Beclin-1 表現量提
22）。︒｡在免疫組織化學染⾊色結果裡顯⽰示，相較於控制組，其他各組於 陰莖海綿體、︑､⾎血管與神經皆有顯著的細胞⾃自噬蛋⽩白 Beclin-1 表現量提