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4-1 兩性共聚物結構鑑定分析

4-1-2 G0.5 PUAD、G1.5 PUAD、G2.5 PUAD FT-IR 光譜鑑定

G0.5、G1.5、G2.5 之最外圍官能基為 NCO ,其 IR 光譜圖為圖 12,主要吸 收峰為 3327 cm-1(N-H ,urethane)、2272 cm-1(NCO,isocyanate)、1700 cm-1 (C=O , urethane )。

圖 12、G0.5 PUAD、G1.5 PUAD、G2.5 PUAD FT-IR 光譜圖 4-1-3 G1.0 PUAD、G2.0 PUAD、G3.0 PUAD FT-IR 光譜鑑定

G1.0、G2.0、G3.0 之最外圍官能基為 O-H ,其 IR 光譜圖為圖 13,其中主 要的吸收峰為 3340 cm-1(O-H)、1699 cm-1 (C=O,urethane)。而 2272 cm-1 (NCO,

isocyanate)消失。

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圖 13、G1.0 PUAD、G2.0 PUAD、G3.0 PUAD FT-IR 光譜圖

4-1-4 G3.0 PUAD-EA FT-IR 光譜鑑定

G3.0 PUAD-EA 樹枝狀高分子的外圍的官能基為 CH3,IR 光譜為圖 14,

主要吸收峰為 3334 cm-1(N-H,amide)、1747cm-1(C=O,Ethyl isocyanatoacetate)、

1700cm-1(C=O,urethane)、1202cm-1(C-O,Ethyl isocyanatoacetate)。

圖 14、G3.0 PUAD-EA FT-IR 光譜圖

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4-1-5G 3.0 PUAD-NH2 FT-IR 光譜鑑定

G3.0 PUAD-NH2 樹枝狀高分子的外圍的官能基為 NH2 ,IR 光譜為圖 15,

主要吸收峰為 3327cm-1(N-H,amide)、1701cm-1 (C=O,urethane),1655cm-1(C=O,

amide) 。 而 1747cm-1(C=O , Ethyl isocyanatoacetate) 與 1202 cm-1(C-O , Ethyl isocyanatoacetate)隨反應消失。

圖 15、G 3.0 PUAD-NH2 FT-IR 光譜圖 4-1-6 G3.0 PUAD-PLGA FT-IR 光譜鑑定

G3.0 PUAD-NH2 樹枝狀高分子的外圍的官能基為 NH2 ,主要吸收峰為3323 cm-1(N-H,amide)、1697 cm-1 (C=O,urethane),則 PLGA大約為1758 cm-1(C=O)、

1093 cm-1(C-O),其 IR 光譜為圖16。

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圖 16、G 3.0 PUAD-PLGA FT-IR 光譜圖

4-1-7 G3.0 PUAD-PLGA 1H-NMR 光譜鑑定

藉由 1H-NMR 圖譜分析所合成之物質,比對在預測圖譜中合成物質所呈現 的不同化學位移,可以確認所合成之物質結構上的 H 原子,從所測得的圖譜中 確認是否成功合成出 G3.0 PUAD-PLGA 兩性共聚物。圖 17 至 20 為從 G3.0 PUAD 合成至 G3.0 PUAD-PLGA之 1H-NMR結構光譜圖。

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圖 17、G 3.0 PUAD 1H NMR 光譜圖

圖 18、G 3.0 PUAD-EA 1H NMR 光譜圖

Types of proton a b c d e f g j k Chemical shift (ppm) 1.18 1.35 2.55 2.70 2.94 3.94 3.35 1.14 3.72

Types of proton a b c d e f g Chemical shift (ppm) 1.18 1.29 2.55 2.64 2.85 3.91 3.36

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Types of proton a b c d e f g j k Chemical shift (ppm) 1.21 1.35 255 2.70 2.91 3.96 3.63 2.61 1.54

圖 19、G 3.0 PUAD-NH21H NMR 光譜圖

Types of proton a b c d e f g Chemical shift (ppm) 1.17 1.31 2.60 2.68 2.88 3.94 3.34

圖 20、G 3.0 PUAD-PLGA 1H NMR 光譜圖

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4-2 藥物包覆效率

利用兩性高分子的特性,在水中會自組裝成微胞,經由疏水性的相互作用將 難 溶 於 水 的 薑 黃 素 包 覆 在 內 部 疏 水 性 區 域 , 裝 載 藥 物 的 兩 性 高 分 子 使 用 UV/Visible 雙光束分光光譜儀進行分析,回推算出包覆藥物的含量以及包覆 率。

由溶劑蒸發法來探討微胞對 curcumin 包覆效率之研究,實驗結果為圖23、

24結果發現,當材料固定時,其包覆量 (Loading capacity) 會隨當初所稱取之薑 黃素比例量而升高,由0.05853 mg 至 0.08071mg ,包覆率則反之,從 11.26 % 至 4.056 % 。

由此試驗當中,認為10比5的包覆率效果顯而易見,故採用此比例進行後面 的細胞試驗。

圖 21、微胞對 curcumin 包覆率研究結果圖 0

2 4 6 8 10 12

10比5 10比10 10比20

Eneapsulation rate (%)

包覆率 %

包覆率 %

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圖 22、微胞對 curcumin 包覆量研究結果圖 4-3 細胞毒性分析測試結果

採用 COS-7 細胞株來測定本實驗中所合成出的兩性共聚物包覆藥物與 Free 藥物之細胞毒性比較。

Free 藥物與細胞培養 24 小時 及 48 小時為圖X,百分比顯示隨著濃度高 低的變化,其細胞的毒殺效果和濃度成正比關係,濃度越高的薑黃素藥物毒殺效 果較好。

圖 23、Free 藥物對體外細胞培養 24 小時及 48 小時之毒殺效果研究結果 圖

0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09

10比5 10比10 10比20

Loading capacity (mg/mg)

包覆量 mg/mg

包覆量 mg/mg

0 20 40 60 80 100 120

Control 1 5 10 25 50

細 胞 存 活 率

%

濃度 mg/ml Free 藥物

24HR 48HR

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本實驗所合成的微胞包覆藥物的結果與細胞共培養 24 小時 及 48 小時為 圖X,百分比顯示隨著濃度高低的變化,其細胞的毒殺效果和微胞濃度成正比相 關係,微胞的濃度越高顯而易見其毒殺效果也就越好。

圖 24、微胞對體外細胞培養 24 小時及 48 小時之毒殺效果研究結果圖 0

20 40 60 80 100 120

Control 1 5 10 25 50

細 胞 存 活 率

%

濃度 mg/ml 微胞

24HR 48HR

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