鑑定具有清除肺癌幹細胞的藥物
玖、 表
item DMEM/
F12
EGF (ng/mL) FGF(ng/mL) 1% B27 day
A549 20 20 10
H460 20 10 10
H1299 20 10 7
H1299/p53 20 10 7
H1299/p53R267P 20 10 7
Table 1.藥物結構圖
表為 A549, H460, H1299, H1299/p53 及H1299/p53R267P五種非小細胞肺 癌細胞株培養肺癌類幹細胞所需的培養液、生長因子、培養皿及培養天 數。
cells
壹拾、 圖
(A)
(B)
(C)
Fig 1.肺癌類幹細胞經 teroxirone 處理後的變化
(A) A549 肺癌類幹細胞 (B) H460 肺癌類幹細胞 (C) H1299 肺癌類幹細 胞，以 DMSO 及 teroxirone 10 及 30 μM 處理不同時間點 (0、24、48 及 72 小時) 後，使用螢光顯微鏡觀察。細胞數量統計圖，統計為三次獨立實驗 的平均 (平均值 ± 標準誤差)，以 Paired t-test 計算 P 值。肺癌類幹細胞大 於 60 μm 為基準。Scale = 100 μm
Fig 2.轉殖的肺癌類幹細胞經 teroxirone 處理後的變化
(A) H1299/p53 肺癌類幹細胞 (B) H1299/p53R267P肺癌類幹細胞，以 DMSO 及 teroxirone 10 及 30 μM 處理不同時間點 (0、24、48 及 72 小時) 後，使 用螢光顯微鏡觀察。細胞數量統計圖，統計為三次獨立實驗的平均 (平均 值 ± 標準誤差)，以 Paired t-test 計算 P 值。肺癌類幹細胞大於 60 μm 為 基準。Scale = 100 μm
(A)
(B)
Fig 3.肺癌類幹細胞經 teroxirone 處理後的 Nanog 染色變化
(A) A549 肺癌類幹細胞 (B) H460 肺癌類幹細胞 (C) H1299 肺癌類幹細 胞，以 DMSO 及 teroxirone 10 及 20 μM 處理 24 小時後，使用活細胞螢光 顯微鏡觀察，藍色螢光為 Hoechst，綠色螢光為幹細胞表面標誌 Nanog。
Scale = 100 μm (A) (B)
(C)
Fig 4. 利用 teroxirone 處理 H460 肺癌類幹細胞後的 western blot
western blot 為 H460 肺 癌 類 幹 細 胞 及 adherent 細 胞 經 DMSO 及 teroxirone、10、20 及 30 μM 處理 24 小時後的結果，並以 Multi Gauge V 2.1 軟體進行蛋白質定量，每組以 DMSO 蛋白量/其 GAPDH 的蛋白量當 1 作 基準，最後以相對值表示其數值。
1 1.1 1.2 1 0.7 0.9
1 1.3 1.5 1 1.2 1.4 1 1.2 1.2 1 1.2 1.3
(A)
(B)
(C)
Fig 5.肺癌類幹細胞經夏枯草處理後的變化
(A) A549 肺癌類幹細胞 (B) H460 肺癌類幹細胞 (C) H1299 肺癌類幹細 胞，以 ddH2O、夏枯草 2 及 5 mg/mL 處理不同時間點 (0、24、48 及 72 小時) 後，使用螢光顯微鏡觀察。細胞數量統計圖，統計為三次獨立實驗 的平均 (平均值 ± 標準誤差)，以 Paired t-test 計算 P 值。肺癌類幹細胞大 於 60 μm 為基準。Scale = 100 μm
Fig 6. 轉殖的肺癌類幹細胞經夏枯草處理後的變化
H1299/p53 肺癌類幹細胞 (B) H1299/p53R267P肺癌類幹細胞，以 ddH2O、夏枯 草 2 及 5 mg/mL 處理不同時間點 (0、24、48 及 72 小時) 後，使用螢光顯微 鏡觀察。細胞數量統計圖，統計為三次獨立實驗的平均 (平均值 ± 標準誤 差)，以 Paired t-test 計算 P 值。肺癌類幹細胞大於 60 μm 為基準。
(A)
(B)
Fig 7.肺癌類幹細胞經夏枯草處理後的 Nanog 染色變化
(A) H460 肺癌類幹細胞 (B) H1299 肺癌類幹細胞 (C) H1299/p53 肺癌類幹 細胞 (D) H1299/p53R267P肺癌類幹細胞，以 ddH2O、夏枯草 2、5 及 10 mg/mL 處理 24 小時後，使用活細胞螢光顯微鏡觀察，藍色螢光為 Hoechst，綠色 螢光為幹細胞表面標誌 Nanog。Scale = 100 μm
(A) (B)
(C) (D)
(A)
(B)
(C)
Fig 8.肺癌類幹細胞經苦參處理後的變化
(A) H460 肺癌類幹細胞 (B) H1299 肺癌類幹細胞 (C) H1299/p53R267P肺癌 類幹細胞，以 ddH2O、苦參 1、2 及 5 mg/mL 處理 24 小時後，使用活細胞 螢光顯微鏡觀察，藍色螢光為 Hoechst，綠色螢光為幹細胞表面標誌 Nanog。細胞數量統計圖，H460 肺癌類幹細胞統計為二次獨立實驗的平均，
H1299/p53R267P肺癌類幹細胞 (平均值 ± 標準誤差) 。 肺癌類幹細胞大於 60 μm 為基準。Scale = 100 μm
(A)
(B)
(C)
Fig 9.肺癌類幹細胞經鴨膽子處理後的變化
(A) H460 肺癌類幹細胞 (B) H1299 肺癌類幹細胞 (C) H1299/p53R267P肺癌 類幹細胞，以 ddH2O、鴨膽子 1、2 及 5 mg/mL 處理 24 小時後，使用活細 胞螢光顯微鏡觀察，藍色螢光為 Hoechst，綠色螢光為幹細胞表面標誌 Nanog。細胞數量統計圖，H460 肺癌類幹細胞統計為二次獨立實驗的平均 (平均值 ± 標準誤差) ，H1299 及 H1299/p53R267P肺癌類幹細胞統計圖為一 次獨立實驗結果。 肺癌類幹細胞大於 60 μm 為基準。Scale = 100 μm