首先，為了證明L121-adj.是有效的疫苗佐劑，在皮下移植 B16F10 黑色素細胞 瘤後2 周且腫瘤大小約達 300 mm3時，L121-adj.可以作為 therapeutic vaccine，於 2 天之內抑制腫瘤的增生與維持存活率，而只有注射抗原而未注射L121-adj.的腫瘤 體積則持續以倍數增長(圖一)。另一方面，如圖二所示，L121-adj.可在 6 天之內使 動物產生抗原專一性的CTL 反應，證明 L121-adj.可引發毒殺 T 細胞反應與抑制腫 瘤的增長。不過在此實驗模式中使用之抗原為雞卵白蛋白(ovalbumin)，是常用於 研究使用的抗原，但是此抗原並非小鼠內生性的蛋白質，相對較容易被小鼠免疫 系統所辨認。此外，B16F10 melanoma 細胞成長相當快速，與臨床所見成長緩慢不 易發現的腫瘤不同，可能較容易引發免疫反應排斥腫瘤(111)。有趣的是，在一般
系統性的發炎反應會導致血液幹細胞發生emergency granulopoiesis，為血液幹 細胞快速大量的分化產生顆粒性白血球的現象(112)。骨髓中的顆粒性白血球與單
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CD11b+Gr-1+F4/80+/‒細胞[圖(六與五)]，與後續產生更多的 plasma B 細胞以及 germinal center B 細胞相符[圖(十三)]，我們推測注射 L121-adj.也會造成類似 alum 之效果，透過影響CD11b+Gr-1+細胞的分化，來調控adaptive immunity。 發現L121-adj.主要對於血液幹細胞分化的影響是會導致其分化偏向產生 myeloid lineage，降低 lymphoid lineage，而此現象與細菌感染導致之發炎反應類似(27)。
除了L121-adj.會引起 emergency granulopoiesis 之外，注射無機鹽類 alum 疫苗 佐劑也會引發類似的效果(30)，顯示此反應可能為疫苗佐劑之共通性反應。注射 L121-adj.會增加淋巴結中的顆粒性白血球與樹突細胞吞噬抗原的能力，促進抗原輸 送至淋巴結中[圖(六)]，此效果亦在其他種類疫苗佐劑發現，注射 complete Freund’s adjuvant (CFA)，alum，與 MF59 疫苗佐劑也會增加顆粒性白血球攜帶抗原至淋巴 結中(114, 115)，注射 AS03 疫苗佐劑則會促進樹突細胞攜帶抗原至淋巴結中(116)，
顯示促進免疫細胞由局部注射位置吞噬攜帶抗原至淋巴系統中是疫苗佐劑之共通 性反應。我們推測此種反應為疫苗佐劑促進抗原呈現引發後天性免疫的重要機制。
顆粒性白血球在疫苗佐劑中的機制仍然未知，顆粒性白血球能夠交叉呈現抗
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原以活化CD8+ T 細胞(62)，疫苗佐劑會刺激顆粒性白血球的生成，作為 effector cell 前往局部注射位置(圖七)，吞噬抗原攜帶至淋巴結中[圖六(A)]，顯示顆粒性白血球 可能可以作為抗原呈現細胞調控adaptive immunity。然而以單株 anti-Ly6G 抗體去 除小鼠體內之顆粒性白血球後再注射L121-adj.，會導致毒殺 T 細胞反應增加[圖十
過去的研究指出，注射incomplete Freund’s adjuvant (IFA)所引發的發炎反應，
會透過增加TNFα，降低 CXCL12，驅使骨髓中的前驅 B 細胞離開骨髓，轉移至脾
52 比例，顯示L121-adj.會使更多的 T 細胞前驅細胞通過 positve selection 成熟[圖(十 四)]，與降低胸腺中 DP 細胞的比例，增加 CD4+ T 細胞的比例[圖十五(B)]，顯示
53 性(126)，壞死細胞亦能夠釋放出多種內生性的 TLR ligand 使樹突細胞成熟(127)，
透過活化innate immunity，如樹突細胞，來進一步活化 B 細胞或是 T 細胞(128)。
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胞分化的改變，無法直接證明細胞分化的改變，未來可以利用更多adoptive transfer 實驗模型來證明細胞分化的改變，以獲得更多的證據。此外，由於本論文所觀察 的現象是一併注射疫苗佐劑以及抗原做為完整疫苗以分析血液細胞分化的改變，
並無法區分是疫苗佐劑自身導致的發炎反應導致細胞分化的改變，或是由於受到 抗原刺激而產生的抗原專一性免疫反應，未來若是欲更清楚的界定疫苗佐劑產生 之內生性免疫反應或是後天性免疫反應，需要更多的side by side 比較。由於疫苗 佐劑主要透過cytokines 以及 chemokines 來調控血液細胞的分化，未來需要更多的 實驗來分析血液中細胞激素的改變，以及利用基因剔除實驗動物來觀察個別細胞 激素的影響。最後，本論文並未探討疫苗佐劑引發發炎反應的機制，未來需要設 計更多實驗以瞭解更多疫苗佐劑之機制。
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8. 注射 L121-adj.會使血液中 G-CSF的濃度短暫而快速的提升，以注射過 L121-adj.