咖啡是國際市場上最重要的經濟作物,其貿易額僅次於石油。市場 上主要有兩大原種:阿拉比卡咖啡,品質良好卻對蟲害相當敏感;羅布 斯塔咖啡,品質及風味較差但可更耐蟲害。傳統育種方式相當緩慢,而 培育出的新品種,昂貴且不足以供給需求(De Los Santos-Briones and Hernández-Sotomayor, 2006;Vinod et al., 2006)。因此利用植物組織培養 技術建立咖啡微體繁殖系統,便成為一個重要的研究方向。前人研究顯 示,癒傷組織之體胚發生需耗費大量時間(Vinod et al., 2006),故本試 驗擬建立阿拉比卡咖啡癒傷組織誘導系統,並利用不同濃度之植物生長 調節劑,對於所誘導出癒傷組織進行形態發生之試驗,以獲得完整之阿 拉比卡咖啡試管內誘導系統。
先前研究顯示,各種常用消毒劑相互比較,其中以次氯酸鈉消毒能 力較佳,且對培植體本身並無不良影響(Badoni and Chauhan, 2010),
而次氯酸鈉相較於氯化汞,更能有效刺激種子萌發及植株生長(Morla et
使用4.5 μM 2,4-D於葉培植體成功誘導出癒傷組織,其誘導出之癒傷組織 的增殖能力及形態發生能力也有更加提升(Van Boxtel and Berthouhly, 1996)。本試驗於2,4-D搭配TDZ試驗組中,葉培植體單獨使用0.5、1及2 mg/L 2,4-D的試驗組,獲得穩定且快速生長的癒傷組織,根培植體試驗結 果亦然。對照先前研究結果,顯示出在單獨使用0.5 - 2 mg/L 2,4-D,可成 功 誘 導 出 穩 增 殖 能 力 快 速 的 癒 傷 組 織 。 在 同 屬 於 茜 草 科 的 蛇 根 草
(Ophiorrhiza japonica),Kai等使用0.2 - 1 mg/L NAA + 0.2 - 2 mg/L BA,
在蛇根草葉片上成功誘導出癒傷組織,其中以1 mg/L NAA搭配1 mg/L BA 誘導癒傷組織效果最佳(Kai et al., 2008)。在NAA搭配BA的試驗組 中,根或葉培植體單獨使用0.1、0.5及1 mg/L NAA或搭配1及2 mg/L BA,
皆可獲得持續快速生長的癒傷組織。對照先前研究顯示出,0.1 - 1 mg/L
閻等使用中國櫻桃(Prunus pseudocerasus)的不定根作為培植體,
以0.5 - 2 mg/L NAA + 0.05 mg/L BA + 0.05 mg/L IBA培養基,成功誘導癒 傷組織,該癒傷組織在0.5 - 2 mg/L NAA + 0.5 mg/L BA培養基成功分化出 不定芽 (閻等, 2003)。癒傷組織誘導試驗中,以葉培植體誘導癒傷組 織,單獨使用1及2 mg/L NAA,或者搭配1及2 mg/L BA,共六個試驗組,
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發現不定根的形成,根尖有癒傷組織生成及不定芽分化。對照先前研究 洋菜佳(Henderson, 1987;Huang and Chi, 1988;Veramendi et al., 1997)。
癒傷組織誘導試驗,因使用的根及葉培植體為植物之多細胞的成熟 態軟爛之紅褐色癒傷組織,生長速度緩慢。Armstrong 和 Green 將玉米中 所誘導之具有再生能力的癒傷組織分為兩類,第一類癒傷組織,結構緊 密 且 所 形 成 的 體 胚 形 態 複 雜 ; 第 二 類 癒 傷 組 織 , 結 構 鬆 散 且 易 碎
(Armstrong and Green, 1985)。Visarada 等將稻米所誘導出癒傷組織進 行分類,第一型為白色且結構緊密之癒傷組織,其再生能力最佳;第二 型 為黃 色且 具有組 織性 之癒 傷組織 ,其 再生 能力良 好( Visarada et
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al.,2002)。對照先前研究與增殖試率驗結果,建議未來選擇生長快速、
結構緊密及外觀顏色呈淡黃色或白色之癒傷組織進行形態發生及植株再 生試驗。
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