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二、 光學嵌住理論

2.3 電磁波模型

雷射光為電磁波,若微粒直徑小於光波波長時(d≦λ),可視為微粒在一 非均勻電場中,而非均勻電場來自於雷射光束的強度分佈,一般來說雷射 光束的強度呈高斯函數分布,光束中心最強然後向外減弱,又因為光強與

電場的物理關係為 I (光強度)正比於 E2 (電場的平方),因此光束中心的電 場最強然後向外衰減。回到微粒的觀點,微粒在一均勻電場中會受到電場 的分佈而產生極化現象,如圖 2-15,原本不帶電的介電質粒子會受到電場 的關係,被極化產生電偶極矩。

圖2 -15 介電質粒子在電場中的極化情形

但若微粒是在一非均勻電場中,不只會產生極化,並且會因為本身的 極化與電場分佈作用,而受到電場的電力作用,朝電場較強的方向移動,

因此若微粒在雷射光束中,亦會朝電場較強處移動,即微粒會朝光束中心 移動,如圖 2-16 所示[17],對一道聚焦的雷射光而言,其聚焦點強度在整 個光束中是最強的,微粒就會朝焦點處移動,這種牽引力就是電磁波模型 解釋的嵌住力。

圖2-16 極化的粒子在光束中受力示意圖

當d<<λ時,我們以Rayleigh散射狀況(Rayliegh scattering regime)為主要

粒而言,折射率為1.6,大於水的折射率 1.33,對於光鉗的幾何光學模型或 是電磁波模型,都是必須的條件。

如果要達到穩定的嵌住效果,必須讓Fgrad≧Fscatt。因此我們必須要讓雷 射的聚焦點越小越好,達到越大的能量密度梯度,這和物鏡的NA值有關,

在之後的章節,會繼續詳加介紹。另外,電磁波的電場與磁場是伴隨發生 的,除了電場,磁場的變化同時也會對微粒施予作用力,但由於光波的頻 率極高,磁場的作用在一段時間內平均值可視為零。此外,半徑較大之微 粒,對光子的有效吸收截面遽增(~ r6),光子動量轉移所產生的光壓不可忽 略,必須也列入計算之中。

但若d λ時,Mie散射狀況和Rayleigh散射狀況皆不能完全表示微粒的 受 力 狀 況 , 因 此 有 人 提 出 另 外 一 種 理 論 Generalized Lorenz-Mie regime(GLMT)[3]。這是Mie散射狀況的延伸,可以計算任意大小的微粒,

在高斯光束或是一般光束中所受到的輻射力。在GLMT的理論中,可以將微 粒所受到的輻射壓力分為三個橫截面:C

pr,x、Cpr,y、Cpr,z來計算,且受力如公 式(2-9):

( ) I

0

[ x ˆ C

,

( r ) y ˆ C

,

( r ) z ˆ C

,

( r ) c

r n

F =

m prx

+

pry

+

prz

]

(2-9)

其中I0=2P/πw02為光束中心的光強度,P為雷射功率,w0為光腰的寬度,Cpr,i 和微粒的直徑有關,可經由數值計算得到。若要更了解,可以參考更深入 的文獻[5][10]。

幾何光學模型與電磁波模型所適用的情況,因嵌住的微粒大小而異。

當微粒直徑大於聚焦點大小,雷射光可以全部折射進入微粒,因此較適用 幾何光學模型分析。當微粒直徑小於聚焦點大小,因為雷射光無法全部射 進微粒,且微粒本身被極化,受到電場作用力越明顯,因此適用於電磁波 模型。目前本實驗室操控的微粒大小都大於雷射光聚焦點,並且大於雷射 光波長,所以仍以幾何光學模型為主。近年來亦有學者提出改良之理論,

運用更複雜的模型模擬光學嵌住現象。

三、儀器架設與調整

3.1 光鉗系統

現今已經被使用的光鉗系統,因為儀器品牌及種類繁多,在架設上多 多少少有些差異,但是在整體的架構上,都擁有幾個重要的部份,包過雷 射及功率控制系統,擴束系統,載物平台控制系統,以及觀察辨識系統等。

為了能在操作上縮小誤差以及使用上更加便利,也另外延伸出許多的儀器 架設方法。本實驗室剛建立的光鉗系統,已經包含以上幾個重要部分,在 操作上也已經趨於熟鍊,未來也會增設許多儀器,做更多樣的實驗。

3.1.1 基本架設

圖 3-5 光鉗基本架設概念

光鉗系統大致的概念如圖 3-1 所示[17]。雷射光先經過空間濾波器

(Spatial Filter;SF),是為了能得到均勻分佈的高斯光束,雖然這對光鉗操 作是非絕對必要的,但對於光學嵌住之定量測量卻有其必要性。接下來利

用擴束器(Beam Expander;BE)將雷射擴束,為的是使雷射能以最大角度 聚焦,射入微粒,達到最大的嵌住力。雷射功率控制的部份,若使用線偏 極雷射,則加上Half Wave Plate(λ/2WP) 與 Polarizer(PL)來調整入射雷射的 功率。在物鏡前放置一匹配透鏡(Matching Lens),可以使物鏡達到最高的 NA 值,使物鏡高度聚焦。並在物鏡前方加裝 Cube Beam Splitter(CBS),以 非同調光由樣本槽後方照射,使被嵌微粒的影像經由 CBS 成像至 CCD 攝 影機,同步觀察微粒的嵌住情形。一般手動式的載物平台,因為移動過快,

已經無法適用於觀察微米級的物體,所以通常改為電動馬達驅動,以準確 的移動觀察目標。

3.1.2 內嵌式光鉗

然而光鉗最具應用潛力之處,就是可以和顯微鏡結合成「內嵌式光 鉗」,使得顯微鏡在使用上增加對於觀察目標的操控能力,取代以往被動式 的觀察法,而能夠主動的操控觀察目標[15]。內嵌式光鉗需要一台多光路顯 微鏡,可將嵌住用雷射導入其中一條,嵌入光鉗,如圖3-2。

圖3-6 內嵌式光鉗

可調整匹配透鏡(ML)的前後位置,使光鉗的焦點恰好在顯微鏡的成像 面上,當微粒被嵌住時,恰好也可以被清楚觀測到。而雷射在送入顯微鏡 之前,用了一片讓雷射光幾乎 100%反射而可見光幾乎全穿透的分光鏡 ( Dichroic Mirror )。而由於顯微鏡內部散射以及嵌住微粒時反射的雷射光對 眼睛具傷害性,在此分光鏡之上再放一片濾光鏡( Filter ),其目的是為了保 護眼睛以及減低觀察時因雷射過強而造成的散射光干擾。

3.2 光鉗各部元件及工作原理

首先必須了解,嵌住力的大小,和物鏡的數值孔徑,聚焦點(spot size),

以及擴束的好壞有關。為了能夠達到最大的嵌住力,必須了解光鉗各部分 的功用以及會影響嵌住力的因素,並調整改進使光鉗系統以達到最大的效 率。

3.2.1 嵌住用物鏡

雷射光聚焦的能力是由物鏡本身的 NA 值所決定。NA 值越大,就夠聚

集越多的雷射光線,且聚焦點也會越小,給予最大的嵌住力。因此選取適 合的物鏡是非常重要的,以下將介紹其工作原理。

3.2.1.1 數值孔徑

數值孔徑(Numerical Aperture)NA 是決定物鏡的分辨率(resolution)、焦 深(depth of focus)、圖像亮度的基本數據。如圖 3-3 所示,當平行雷射光由 物鏡聚焦後,假如雷射光束完全充滿整個物鏡,透鏡最邊緣處的傾斜光線 與顯微鏡光軸所交角成最大角度為

θ

max,此即該物鏡的半孔徑角。

圖3-7 物鏡聚焦及半孔徑角 假設介質的折射率為n,則定義數值孔徑

sin θ

max

×

= n

NA

。 (3-1)

光線射到標本時,因為繞射的關係,光線會散開,若要能夠得到清晰的影 像,物鏡必須盡可能把所有散出的繞射光線匯集,這就必須靠物鏡本身的 聚光能力。若物鏡具有高的 NA 值,代表它可接受光線的角度越大,可以 聚集的繞射光線越多,不但辨別率越高,影像也會越明亮。

可以算出本實驗室光鉗的

w

trap為:

3.2.3 擴束系統

由章節2.2.1 的理論得知,若是入射角

Θ

越大,則可產生越大的回復力,

嵌住越穩定。雷射光源原來為一細束光,此光源不可能直接射入物鏡,因 為會造成物鏡的聚焦角度太小。擴束系統的目的,是為了讓光束直徑變大,

使光束可以完全填滿整個物鏡的背孔徑(back aperture),產生物鏡本生的最 大半孔徑角

θ

max,對於嵌住微粒來說,才有最大的入射角。幾何光學中,透 鏡成像的公式為(3-3)式:

f o i

1 1

1 + =

, (3-3)

f

為透鏡的焦距,

o

為物體和透鏡的距離,即物距。

i

為成像位置和透鏡的 距離,即像距。若是一道平行光束射入透鏡,代表物距 = ,則成像位置

= ,在焦點成像。由光的可逆性得知,若有一點光源在焦點處,光線經 過透鏡後,

i

= ,則會產生一道平行光束。如圖 3-6:

oi f

圖3-6 擴束透鏡的擺置

如果有一道直徑d1的平行光束射入透鏡L1,在焦距f1處聚焦,若是此聚 焦處剛好和透鏡L2相隔焦距f2,則通過透鏡L2後的光線也將會是平行光束,

直徑為d2,由此可得到擴束倍率和焦距的關係(3-4)式:

1

Y 偏振,且電場保持平行於一固定直線的光稱為線性偏振光或平面偏振光,

簡稱線偏光。因此,我們利用光的偏振性質,讓雷射光通過一些光學儀器,

操控雷射的功率。最簡單的方法是利用相位板和分光鏡,原理如下:

相位板

相位板是用水晶等具有光學異向性的光學結晶所製,利用此特性,不 同的入射直線偏光方向在晶體中會有不同的折射率,如圖3-8,當光垂直入 射時,水平軸方向振動的偏極光,折射率為n2。在垂直方向振動的偏極光為 n1

圖3-8 相位板的光學異向性

當特定振動方向的直線偏光通過它時,若偏振方向與兩異軸平行時,

則線偏極光之折射率可分別為n1(0 度)或n2(90 度)。此時光在晶體內的傳播 速度分別為v1=c/n1或 v2=c/n2 (c為真空中的光速)。若入射光之電場振動方向 與兩異軸有一夾角,則此光波對於兩異軸有一折射率為n1的分量,且有另一 分量,其折射率為n2。因而,入射光在入射面為同相位,在出射面發生相位 差。此時的相位差為

λ π

δ = 2 ( n

1

n

2

) d /

。 (3-5)

此相位差

δ

若為π/2 時,此時兩電場分量之相對光程差為光波長的 1/4。此相 位板稱為四分之一波長板(λ/4WP),如圖 3-9。

圖 3-9 不同偏光方向產生的光程差

同理,若光程差為光波長的 1/2 時(

δ

= π),稱為二分之一波長板 (λ/2WP)。因此當雷射等單色光光波通過晶體後,會造成異向軸間有相位差 異,改變原光波之偏振方向。

PBS 分光鏡(Polarization Cube Beam Splitter)

由具雙(複)折射率特性的材料(如方解石)所製成的稜鏡。此種分光鏡一 般做成方塊狀,由兩個直角三角形的稜鏡組成。中間夾層為等方向性物質 或空氣層,可即根據光波極化方向的不同而分光。在此界面,可使 p 極化 光(TM mode)完全穿透,使 s 極化光(TE mode)完全反射,使垂直線偏 光與水平線偏光分離,如圖3-10。

圖3-10 PBS 分光示意圖

本實驗室是使用λ/2WP 和 PBS 分光鏡,調整雷射的功率。當雷射光通

本實驗室是使用λ/2WP 和 PBS 分光鏡,調整雷射的功率。當雷射光通

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