一、项目训练目标：
（一）知识目标
掌握母液的配制，掌握脱毒技术以及灭菌技术的操作，熟悉各母液的配方，
掌握植物体初代以及继代培养操作。
（二）能力目标
1、熟悉各母液的配制以及配方。
2、掌握脱毒技术以及灭菌技术的操作。
3、掌握植物体初代培养，继代培养的操作。
（三）素质目标
1.培养爱护公物的品质。
2.培养严谨细致的作风。
3.培养学生动手操作能力。
二、项目主要任务与课时安排：
序号 主要任务 课时
1 1.MS 培养基的配制与分装 4
2 2.培养基的制作与灭菌 4
3 3.外植体初代培养 4
4 4.继代增殖培养 4
5 5.试管苗的生根与驯化移栽 6
6 6.药用植物脱毒技术 4
合计 26
三、学生分组：
5 人/组
四、实训地点：
农业生化实训室
五、实训主要设备、器材：
无菌培养瓶，封口膜，超净工作台，高压灭菌锅，电子天平，称量纸，
移液枪，镊子，电磁炉，锅，锥形瓶，70％酒精，95％酒精等。
任务一 MS 培养基的配制与分装 一、实验目的：
了解常见培养基（MS、White）母液中的营养成分组成及作用；
掌握培养基母液及植物生长调节剂母液配制的方法。
二、实验原理：
培养基的主要成分包括无机营养物质、碳源、有机物质、植物生长物质等，
由于每种培养基往往含有一二十种化合物，配制起来不仅繁琐，而且还很难达到 准确和精确，尤其是生长调节物质和微量元素用量较少，难于准确称量，稍有偏 差，就会影响试验结果及试验的重复性。为解决这一问题，常常将大量元素、微 量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母 液。当配制培养基时，只需要按预先计算好的量吸取母液即可。
三、实验器具与药品：
【实验药品和试剂】
NH4NO3、KNO3、MgSO4·7H2O、（NH4）2SO4、NaH2PO4·H2O、CaCl2·2H2O、
MgSO4·7H2O、KH2PO4、Na2-EDTA·2H2O、FeSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、
ZnSO4·7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、肌醇、
烟酸、盐酸吡哆醇(VB6)、盐酸硫胺素(VB1)、甘氨酸等。
【实验仪器及用具】
天平（感量为 0.01g）、电子天平（感量为 0.0001g）、烧杯（1000mL、
500mL、100mL、50mL）、量筒（500mL、100mL、50mL）、容量瓶（1000mL、500mL、
1000 50
微量元素 MnSO4·4H2O
铁盐 Na2-EDTA
1000 10
（1）MS 大量元素母液的配制（母液Ⅰ）
按照 MS 培养基配方的用量扩大 20 倍，将大量元素配制成 20 倍的母液。配 制时先用量筒量取蒸馏水 800mL，放入 1000mL 的烧杯中，依次分别称取 KNO3 38g;
NH4NO3 33g, MgSO4·7H2O 7.4g, KH2PO4 3.4g, CaCl2·2H2O 8.8g，按顺序先后倒 入烧杯中，用玻璃棒搅动，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后 一种化合物完全溶解后（注：CaCl2·2H2O 溶解时需将蒸馏水加热），将溶液倒 入 1000mL 的容量瓶，用蒸馏水定容至 1000mL。然后倒入细口磨砂试剂瓶中，贴 上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于 4℃冰箱保存备用。配制 培养基时每升 MS 培养基吸取该母液量为 50mL。
注意：配制大量元素母液时，某些无机成分如 Ca2+、SO42 一、Mg2 十和 H2PO4 一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，药品采用等级 平分别依次称取 MnSO4·4H2O 22.3g， ZnSO4·7H2O 8.6g , H3BO3 6.2g，KI 0.83g，Na2MoO4·2H2O 0.25g，CuSO4·5H2O 0.025g，CoCl2·6H2O 0.025g，并 用重蒸水逐个溶解，待全部溶解用容量瓶定容后，装入 1000mL 倒入细口磨砂试 剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于 4℃冰箱保存
备用。配制培养基时每升 MS 培养基吸取该母液量为 1mL。
（3）铁盐母液的配制（母液Ⅲ）
在电子天平上准确称量 2.78g 硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和 3.73g 乙二胺四乙 酸二钠(Na2-EDTA)，分别倒入盛有 400mL 蒸馏水的烧杯中，加热并不断搅拌使之 溶解。保持加热，把 FeSO4 溶液慢慢倒入 Na2-EDTA 溶液中并不断搅拌，接近沸 B1）10mg，烟酸 50mg，甘氨酸 200mg，盐酸吡哆醇（维生素 B6）50mg，用蒸馏 水依次溶解
或稀酸（1mol/L 盐酸）溶液使之完全溶解后，加蒸馏水定容至 100mL，即配制成 浓度为 500mg/L 的 6-BA 的母液。转入磨口试剂瓶中，并贴上标签，注明母液名
称、浓度和配制日期，放入 4℃冰箱保存备用。