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第四章 結果

第五節 骨誘導蛋白-7、骨誘導蛋白第二型受器 mRNA 表現

BMP-7、BMPR II 的 mRNA 經 RT-PCR 放大的產物在洋菜膠 中以電泳方式 (Agarose Gel Electrophoresis) 作表現,再以影像分析軟 體 (AlphaImager 2200) 分別讀取各組的 BMP-7、BMPR II 及

GAPDH 表現量,並以 GAPDH 校正其相對吸光值的結果。做分析,

分析結果如下:

一、BMP-7 (Bone morphogenetic protein-7) (圖六、七)

依據 BMP-7 洋菜膠電泳圖上的表現來比較,在正常實驗對照組 和總膽管結紮實驗組中 BMP-7 mRNA 均有表現,以影像分析軟體來 分析 BMP-7/GAPDH 的比值,發現總膽管結紮實驗組中 BMP-7 mRNA 的表現量有明顯的上升。總膽管結紮 3 天為(120.72±9.50)高於 實驗對照組為(61.90±6.73),在統計學上達到非常顯著性差異

(p<0.01)。總膽管結紮 2 週為(108.58±11)高於實驗對照組,在統計學 上達到顯著性差異(p<0.05)。總膽管結紮 4 週為(125.41±2.65)高於實 驗對照組,在統計學上達到非常顯著性差異(p<0.01)。

二、BMPR II (Bone morphogenetic protein receptor type II) (圖八、九)

體來分析 BMPR II /GAPDH 的比值,發現總膽管結紮實驗組中 BMPR II mRNA 的表現量有明顯的上升。總膽管結紮 3 天為

(90.57±10.16)高於實驗對照組為(26.09±4.35),在統計學上達到非常顯 著性差異(p<0.01)。總膽管結紮 2 週為(79±12.73)高於實驗對照組,在 統計學上達到顯著性差異(p<0.05)。總膽管結紮 4 週為(110.09±10)高 於實驗對照組,在統計學上達到非常顯著性差異(p<0.01)。

綜合上述結果,我們可以發現 BMP-7 mRNA 總膽管結紮實驗組 中表現量與正常實驗對照組相較之下有明顯的上升,在總膽管結紮3 天時就會急速上升,總膽管結紮 2 週時會略為下降,總膽管結紮 4 週 時會上升到最高。同時發現 BMPR II mRNA 總膽管結紮實驗組中表 現量與正常實驗對照組相較之下有明顯的上升,在總膽管結紮3 天時 就會急速上升,總膽管結紮 2 週時會略為下降,總膽管結紮 4 週時會 上升到最高。

第六節 骨誘導蛋白-7 表現之 western blot 分析

BMP-7 在膠中以電泳方式依分子大小做分離,再轉印至 NC 膜 上,最後再以富士影像分析軟體分別讀取各組的 BMP-7 及 β-actin 表現量,並以 β-actin 校正其相對值的結果。做分析,分析結果如下:

BMP-7 (Bone morphogenetic protein-7) (圖十、十一)

依據 BMP-7 的表現量來比較,在正常實驗對照組和總膽管結紮 實驗組中 BMP-7 均有表現,以影像分析軟體來分析 BMP-7/β-actin 的比值,發現總膽管結紮實驗組中 BMP-7 的表現量有明顯的上升。

總膽管結紮3 天為(170.52±36.11)高於實驗對照組,在統計學上達到 非常顯著性差異(p<0.05)。總膽管結紮 2 週為(205.84±30.33)高於實驗 對照組,在統計學上達到顯著性差異(p<0.05)。總膽管結紮 4 週為 (287.391±40.38)高於實驗對照組,在統計學上達到非常顯著性差異 (p<0.01)。

綜合上述結果,我們可以發現 BMP-7 protein 在總膽管結紮實驗 組中表現量與正常實驗對照組相較之下有明顯的上升,在總膽管結紮 3 天時就會急速上升,在總膽管結紮 4 週時會上升到最高。

第七節 免疫組織化學染色分析骨誘導蛋白-7、骨誘導蛋白第二型受

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