秤取 methyl salicylate (3.8克, 0.025 莫耳)及 4-chlorobenzyl chloride (4 克, 0.025 莫耳)，及無水碳酸鉀 7 克，無水碘化鉀 8.3 克，以乙醇為溶媒，參照 化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正 己烷(1:1)/矽膠]分離純化，可得化合物 41 (4.73 克)；透明液體；產率 65 %。
化合物 41 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：291
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：243.2 (3.6) IR：ν(KBr) cm-1：1722 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
1.24 (3H, t, J= 7.1 Hz, -OCH2CH3), 4.25 (2H, q, J= 7.1 Hz, -OCH2CH3), 5.17 (2H, s, -OCH2-), 7.02 (1H, dd, J= 7.6, 7.6, Hz, H-5),
7.19 (1H, d, J= 8.4 Hz, H-3), 7.41-7.55 (5H, m, H-4, 2?, 3?, 5?, 6?), 7.68 (1H, dd, J= 7.6, 1.6 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
14.03 (-OCH2CH3), 60.42 (-OCH2CH3), 68.81 (-OCH2-), 113.90 (C-3), 120.48 (C-5), 120.75 (C-1), 128.26 (C-2?, 6?), 128.83 (C-3?, 5?),
130.77 (C-6), 132.22 (C-4?), 133.32 (C-4), 135.91 (C-1?), 156.96 (C-2), 165.72 (-COOC2H5)
2-[(2-Chlorobenzyl)oxy]benzamide (51)之 合 成
秤取 salicylamide (3.43 克,0.025 莫耳)及 2-chlorobenzyl chloride (4
克,0.025 莫耳)，及無水碳酸鉀 7 克，無水碘化鉀 8 克，參照化合物 17 之合 成方法進行反應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 51 (5.17 克)；
白色棉絮狀結晶；產率 79.1 %；熔點 159.1-161.9 ℃。
化合物 51 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：261
UV：λmax (CHCl3) nm(logε)：242.0 (3.8)
IR：ν(KBr) cm-1：3402, 3186 (-NH2), 1634 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.29 (2H, s, -OCH2-), 7.05 (1H, dd, J=7.4, 7.4 Hz, H-5),
7.20 (1H, d, J=8.3 Hz, H-3), 7.36-7.66 (7H, m, -NH2-, H-4, 3?-6?), 7.77 (1H, dd, J=7.4, 1.5 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
67.83 (-OCH2-), 113.42 (C-3), 121.24 (C-5), 123.74 (C-1), 127.71 (C-5?), 129.73 (C-3?), 130.39 (C-6?), 130.56 (C-4?), 130.90 (C-6), 132.57 (C-4), 132.77 (C-2?), 134.02 (C-1?), 156.04 (C-2), 166.77 (-CONH2)
2-[(3-Chlorobenzyl)oxy]benzamide (52)之 合 成
秤取 salicylamide (0.7 克,0.005 莫耳)及 3-chlorobenzyl chloride (0.8 克,0.005 莫耳)，及無水碳酸鉀 1.4 克，無水碘化鉀 1.7 克，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 52 (0.99 克)；白色棉絮狀結晶；產率 75.7 %；熔點 115.6-116.7 ℃。
化合物 52 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：261
UV：λmax (CHCl3) nm(logε)：242.0 (3.9)
IR：ν(KBr) cm-1：3379, 3171 (-NH2), 1641 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.25 (2H, s, -OCH2-), 7.02 (1H, dd, J=7.6, 7.6 Hz, H-5), 7.16 (1H, d, J=8.3 Hz, H-3), 7.39-7.42 (4H, m, H-4, 4?-6?), 7.59-7.63 (3H, m, -NH2-, H-2?), 7.74 (1H, d, J=7.6 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
69.17 (-OCH2-), 113.53 (C-3), 121.05 (C-5), 124.18 (C-1), 126.44 (C-6?), 127.66 (C-2?), 128.15 (C-4?), 130.90 (C-6, 5?),
132.30 (C-4), 133.43 (C-3?), 139.48 (C-1?), 155.97 (C-2), 166.89 (-CONH2)
2-[(4-Chlorobenzyl)oxy]benzamide (53)之 合 成
秤取 salicylamide (0.7 克,0.005 莫耳)及 4-chlorobenzyl chloride (0.8 克,0.005 莫耳)，及無水碳酸鉀 1.4 克，無水碘化鉀 1.7 克，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 53 (0.95 克)；白色針狀結晶；產率 72.7 %；熔點 154.9-156.3 ℃。
化合物 53 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：261
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：241.8 (3.7)
IR：ν(KBr) cm-1：3447, 3209 (-NH2), 1661 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.23 (2H, s, -OCH2-), 7.02 (1H, dd, J=7.6, 7.6 Hz, H-5),
7.16 (1H, d, J=8.3 Hz, H-3), 7.38-7.60 (7H, m, -NH2-, H-4, 2?, 3?, 5?, 6?), 7.76 (1H, dd, J=7.6, 1.3 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
69.29 (-OCH2-), 113.57 (C-3), 121.01 (C-5), 123.94 (C-1), 128.77 (C-2?, 6?), 129.86 (C-3?, 5?), 130.80 (C-6), 132.36 (C-4), 132.88 (C-4?), 135.89 (C-1?), 156.09 (C-2), 166.78 (-CONH2)
2-(Benzyloxy)benzoic acid (56)之 合 成
秤取化合物 34 (0.7 克, 0.003 莫耳)，置於三頸瓶中，並加入 10 %的氫 氧化鈉 50 毫升，加熱迴流攪拌 3 小時後，加入冰醋酸使其產生乳白色沉澱，
以氯仿進行萃取，取氯仿層，以無水硫酸鎂脫水過濾後，減壓濃縮蒸除溶 媒，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 56 (0.57 克)；白色粉末狀 結晶；產率 83.3 %；熔點 71.7-73.5 ℃。
化合物 56 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：228
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：242.4 (4.0) IR：ν(KBr) cm-1：1682 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.18 (2H, s, -OCH2-), 6.99 (1H, ddd, J=7.6, 7.6, 0.6 Hz, H-5), 7.16 (1H, d, J= 8.2 Hz, H-3), 7.29-7.51 (6H, m, H-4, 2?-6?), 7.63 (1H, dd, J= 7.6, 1.8 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
69.80 (-OCH2-), 114.11 (C-3), 120.60 (C-5), 122.51 (C-1),
127.32 (C-2?, 6?), 127.85 (C-4?), 128.56 (C-3?, 5?), 130.77 (C-6), 132.94 (C-4), 137.26 (C-1?), 157.10 (C-2), 167.75 (-COOH)
2-[(2-Chlorobenzyl)oxy]benzoic acid (57)之 合 成
秤取化合物 39 (0.87 克,0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 57 (0.58 克)；白色柱狀結 晶；產率 73.6 %；熔點 117.8-119.4 ℃。
化合物 57 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：263
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：242.4 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：1690 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.23 (2H, s, -OCH2-), 7.03 (1H, ddd, J=7.5, 7.5, 0.6 Hz, H-5), 7.20 (1H, d, J= 8.0 Hz, H-3), 7.34-7.55 (4H, m, H-3?- 6?), 7.66-7.78 (2H, m, H-6, 4), 12.69 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
67.38 (-OCH2-), 114.05 (C-3), 120.92 (C-5), 122.07 (C-1),
127.50 (C-5?, 6?), 129.38 (C-3?, 6?), 129.68 (C-4?), 131.06 (C-6), 131.91 (C-2?), 133.29 (C-4), 134.66 (C-1?), 157.01 (C-2),
167.47 (-COOH)
2-[(3-Chlorobenzyl)oxy]benzoic acid (58)之 合 成
秤取化合物 36 (0.8 克,0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 58 (0.62 克)；白色片狀結 晶；產率 78.0 %；熔點 97.5-99.6 ℃。
化合物 58 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：263
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：242.4 (3.8) IR：ν(KBr) cm-1：1670 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.21 (2H, s, -OCH2-), 7.01 (1H, ddd, J=7.5, 7.5, 0.8 Hz, H-5),
7.16 (1H, d, J= 7.8 Hz, H-3), 7.34-7.53 (4H, m, H-4, 4?, 5?, 6?), 7.61-7.69 (2H, m, H-6, 2?)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
68.86 (-OCH2-), 114.11 (C-3), 120.80 (C-5), 122.23 (C-1), 125.68 (C-6?), 126.96 (C-2?), 127.71 (C-4?), 130.44 (C-5?), 130.95 (C-6), 133.13 (C-4), 133.34 (C-3?), 139.94 (C-1?), 156.99 (C-2), 167.57 (-COOH)
2-[(4-Chlorobenzyl)oxy]benzoic acid (59)之 合 成
秤取化合物 37 (0.8 克,0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 59 (0.51 克)；白色片狀結 晶；產率 65 %；熔點 114.2-115.9 ℃。
化合物 59 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：263
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：242.4 (3.9) IR：ν(KBr) cm-1：1672 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.18 (2H, s, -OCH2-), 7.00 (1H, dd, J= 7.6, 7.6 Hz, H-5),
7.16 (1H, d, J= 8.4 Hz, H-3), 7.41-7.54 (5H, m, H-4, 2?, 3?, 5?, 6?), 7.66 (1H, dd, J= 7.6, 1.6 Hz, H-6), 12.66 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
67.03 (-OCH2-), 114.16 (C-3), 120.74 (C-5), 122.17 (C-1),
128.57 (C-2?, 6?), 129.12 (C-3?, 5?), 130.94 (C-6), 132.44 (C-4?), 133.13 (C-4), 136.35 (C-1?), 157.05 (C-2), 167.55 (-COOH)
2-[(2-Fluorobenzyl)oxy]benzoic acid (60)之合成
秤取化合物 21 (0.72 克, 0.003 莫耳)，至於三頸瓶中，並加入 3 M 的氫 氧化鈉 60 毫升，加熱迴流攪拌 20 小時後，加入冰醋酸使其產生乳白色沉 澱，以氯仿進行萃取，取氯仿層，以無水硫酸鎂脫水過濾後，減壓濃縮蒸 除溶媒，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 60 (0.34 克)；白色粉 末狀結晶；產率 46.1 %；熔點 68.4-69.8 ℃
化合物 60 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：246
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：243.0 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：1678 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.22 (2H, s, -OCH2-), 7.02 (1H, dd, J= 7.6, 7.6 Hz, H-5),
7.18-7.54 (5H, m, H-3, 4, 3?, 4?, 5?), 7.63-7.70 (2H, m, H-6, 6?), 12.67 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
64.25 (-OCH2-), 114.11 (C-3), 115.43 (C-3?), 120.87 (C-5), 122.21 (C-1), 124.12 (C-1?), 124.70 (C-5?), 130.12 (C-6?), 130.27 (C-4?), 130.95 (C-6), 133.18 (C-4), 157.05 (C-2), 160.15 (C-2?), 167.53 (-COOH)
2-[(3-Fluorobenzyl)oxy]benzoic acid (61)之合成
秤取化合物 22(0.72 克, 0.0032 莫耳)，參照化合物 60 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 61 (0.73 克)；白色粉末狀 結晶；產率 92.7 %；熔點 59.5-62.4 ℃
化合物 61 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：246
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：243.4 (4.2) IR：ν(KBr) cm-1：1699 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.21 (2H, s, -OCH2-), 7.01 (1H, dd, J= 7.6, 7.6 Hz, H-5),
7.08-7.52 (6H, m, H-3, 4, 2?, 4?, 5?, 6?), 7.68 (1H, dd, J=7.6, 1.4 Hz, H-6), 12.72 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
68.90 (-OCH2-), 113.62 (C-2?), 114.07 (C-3), 114.51 (C-4?), 150.77 (C-5), 122.08 (C-1), 123.00 (C-6?), 130.54 (C-5?), 131.00 (C-6), 133.19 (C-4), 140.33 (C-1?), 157.02 (C-2), 162.48 (C-3?), 167.58 (-COOH)
2-[(4-Fluorobenzyl)oxy]benzoic acid (62)之合成
秤取化合物 23 (0.68 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 60 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 62 (0.55 克)；白色粉末狀 結晶；產率 74.5 %；熔點 80.9-82.4 ℃
化合物 62 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：246
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：243.0 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：1686 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
5.16 (2H, s, -OCH2-), 7.00 (1H, dd, J= 7.6, 7.6 Hz, H-5),
7.15-7.25 (3H, m, H-3, 3?, 5?), 7.43-7.57 (3H, m, H-4, 2?, 6?), 7.68 (1H, dd, J=7.6, 1.5 Hz, H-6), 12.65 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
69.18 (-OCH2-), 114.17 (C-3), 115.37 (C-3?, 5?), 120.69 (C-5), 122.22 (C-1), 129.48 (C-2?, 6?), 130.89 (C-6), 133.09 (C-4), 133.43 (C-1?), 157.10 (C-2), 161.88 (C-4?), 167.60 (-COOH)
2-[(3-Methoxybenzyl)oxy]benzoic acid (63)之合成
秤取化合物 24 (0.72 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 60 之合成方法進行反 應，反應 35 小時，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 63 (0.57 克)；
白色棉絮狀結晶；產率 73.6 %；熔點 100-101.9 ℃
化合物 63 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：258
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：243.3 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：1701 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
3.74 (3H, s, -OCH3), 5.16 (2H, s, -OCH2-),
6.85 (1H, dd, J= 8.1, 2.4 Hz, H-4?), 6.96-7.05 (2H, m, H-5, 6?), 7.14-7.18 (2H, m, H-3, 2?), 7.28 (1H, t, J=7.9 Hz, H-5?),
7.47 (1H, ddd, J=7.9, 7.8, 1.7 Hz, H-4), 7.68 (1H, dd, J=7.6, 1.7 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
55.16 (-OCH3), 69.47 (-OCH2-), 112.59 (C-2?), 113.33 (C-4?), 113.99 (C-3), 119.16 (C-6?), 120.59 (C-5), 122.04 (C-1), 129.62 (C-5?), 130.98 (C-6), 133.16 (C-4), 138.90 (C-1?), 157.18 (C-2), 159.58 (C-3?), 167.73 (-COOH)
2-[(4-Methoxybenzyl)oxy]benzoic acid (64)之合成
秤取化合物 25 (0.72 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 60 之合成方法進行反 應，反應 36 小時，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 64 (0.62 克)；
白色塊狀結晶；產率 80.0 %；熔點 70.8-72 ℃
化合物 64 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：258
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：243.0 (4.0) IR：ν(KBr) cm-1：1705 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
3.74 (3H, s, -OCH3), 5.10 (2H, s, -OCH2-),
6.91-7.02 (3H, m, H-5, 3?, 5?), 7.17 (1H, d, J=8.4 Hz, H-3), 7.39-7.46 (3H, m, H-4, 2?, 6?), 7.64 (1H, dd, J=7.6, 1.5 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
55.28 (-OCH3), 69.69 (-OCH2-), 113.98 (C-3?, 5?), 114.19 (C-3), 120.50 (C-5), 122.55 (C-1), 129.04 (C-1?), 129.15 (C-2?, 6?), 130.80 (C-6), 133.02 (C-4), 157.22 (C-2), 159.10 (C-4?), 167.68 (-COOH)
2-(Benzylamino)benzoic acid (65)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (8.25 克, 0.05 莫耳)，Benzyl chloride (7.6 克, 0.06 莫耳)，及無水碳酸鉀 13 克，無水碘化鉀 16 克，參照化合物 17 之合成方法 進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/矽膠]分離純 化，可得 ethyl 2-(benzylamino)benzoate (42) 8 克；棕色液體；產率 62.7 %。
(b) 秤取化合物 42 (0.77 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 65 (0.54 克)；白色針狀結 晶；產率 78.6 %；熔點 175.5-176.7 ℃。
化合物 65 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：227
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：258.4 (4.0) IR：ν(KBr) cm-1：3373 (-NH-), 1665 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.44 (2H, s, -CH2-), 6.55 (1H, dd, J= 7.9, 7.9 Hz, H-5), 6.65 (1H, d, J=8.3 Hz, H-3), 7.23-7.34 (6H, m, H-4, 2?-6?), 7.80 (1H, dd, J= 7.9, 1.6 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
46.09 (-CH2-), 110.54 (C-1), 111.89 (C-3), 114.72 (C-5),
127.14 (C-4?), 127.26 (C-2?, 6?), 128.74 (C-3?, 5?), 131.91 (C-6), 134.58 (C-4), 139.59 (C-1?), 150.89 (C-2), 170.23 (-COOH)
2-[(2-Chlorobenzyl)amino]benzoic acid (66)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，2-chlorobenzyl chloride (3.2 克, 0.02 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之 合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/矽膠]
分離純化，以乙醇做再結晶，可得 ethyl 2-[(2-chlorobenzyl)amino] benzoate (43) 1.73 克；白色針狀結晶；產率 59.8 %。
(b) 秤取化合物 43 (0.87 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 66 (0.32 克)；白色棉絮狀 結晶；產率 40.8 %；熔點 187-188.2 ℃。
化合物 66 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：261
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：257.0 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：3368 (-NH-), 1666 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.52 (2H, s, -CH2-), 6.53-6.59 (2H, m, H-3, 5),
7.24-7.48 (5H, m, H-4, 3?-6?), 7.82 (1H, d, J=8.0 Hz, H-6), 8.32 (1H, br, -NH-), 12.70 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
43.97 (-CH2-), 110.80 (C-1), 111.63 (C-3), 115.01 (C-5), 127.51 (C-5?), 128.98 (C-4?), 129.08 (C-6?), 129.64 (C-3?), 132.01 (C-6), 132.61 (C-2?), 134.67 (C-4), 136.48 (C-1?), 150.57 (C-2), 170.16 (-COOH)
2-[(3-Chlorobenzyl)amino]benzoic acid (67)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，3-chlorobenzyl chloride (3.2 克, 0.02 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之 合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/矽膠]
分離純化，可得 ethyl 2-[(3-chlorobenzyl)amino] benzoate (44) 1.75 克；黃色 液體；產率 60.4 %。
(b) 秤取化合物 44 (0.87 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 67 (0.48 克)；白色針狀結 晶；產率 61.2 %；熔點 125.6-126.1 ℃。
化合物 67 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：261
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：257.7 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：3360 (-NH-), 1677 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.47 (2H, s, -CH2-), 6.52-6.63 (2H, m, H-3, 5),
7.23-7.36 (5H, m, H-4, 2?, 4?-6?), 7.81 (1H, d, J=7.8 Hz, H-6), 8.35 (1H, br, -NH-), 12.67 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
45.39 (-CH2-), 110.75 (C-1), 111.86 (C-3), 114.95 (C-5), 125.78 (C-6?), 126.94 (C-4?), 127.03 (C-2?), 130.57 (C-5?), 131.97 (C-6), 133.44 (C-3?), 134.60 (C-4), 142.56 (C-1?) 150.65 (C-2), 170.20 (-COOH)
2-[(4-Chlorobenzyl)amino]benzoic acid (68)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，4-chlorobenzyl chloride (3.2 克, 0.02 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之 合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/矽膠]
分離純化，可得 ethyl 2-[(4-chlorobenzyl)amino] benzoate (45) 1.70 克；黃色 液體；產率 58.7 %。
(b) 秤取化合物 45 (0.87 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 68 (0.39 克)；白色針狀結 晶；產率 49.7 %；熔點 140-141.7 ℃。
化合物 68 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：261
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：257.3 (4.0)
IR：ν(KBr) cm-1：3373 (-NH-), 1663 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.45 (2H, s, -CH2-), 6.51-6.62 (2H, m, H-3, 5),
7.22-7.40 (5H, m, H-4, 2?, 3?, 5?, 6?), 7.81 (1H, d, J=7.9 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
45.30 (-CH2-), 110.69 (C-1), 111.87 (C-3), 114.87 (C-5),
128.66 (C-2?, 6?), 129.03 (C-3?, 5?), 131.61 (C-4?), 131.95 (C-6), 134.57 (C-4), 138.77 (C-1?), 150.69 (C-2), 170.16 (-COOH)
2-[(2-Fluorobenzyl)amino]benzoic acid (69)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (4.13 克, 0.025 莫耳)，2-fluorobenzyl chloride (7.23 克, 0.05 莫耳)，及無水碳酸鉀 7 克，無水碘化鉀 8.3 克，參照化合物 17 之 合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/矽膠]
分離純化，可得 ethyl 2-[(2-fluorobenzyl)amino] benzoate (46) 4.17 克；黃色 液體；產率 61.1 %。
(b) 秤取化合物 46 (0.82 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 69 (0.52 克)；透明針狀結 晶；產率 70.8 %；熔點 164.9-166.8 ℃。
化合物 69 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：245
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：256.8 (4.0) IR：ν(KBr) cm-1：3369 (-NH-), 1666 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.50 (2H, s, -CH2-), 6.56 (1H, dd, J=7.9, 7.9 Hz, H-5), 6.68 (1H, d, J=8.5 Hz, H-3), 7.10-7.39 (5H, m, H-4, 3?- 6?),
7.81 (1H, d, J=7.9 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
40.00 (-CH2-), 110.73 (C-1), 111.59 (C-3), 114.96 (C-5), 115.52 (C-3?), 124.69 (C-5?), 126.20 (C-1?), 129.24 (C-4?), 129.48 (C-6?), 131.98 (C-6), 134.66 (C-4), 150.65 (C-2), 160.61 (C-2?), 170.16 (-COOH)
2-[(3-Fluorobenzyl)amino]benzoic acid (70)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，3-fluorobenzyl chloride (2.6 克, 0.018 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/
矽膠]分離純化，可得 ethyl 2-[(3-fluorobenzyl)amino] benzoate (47) 1.8 克；
黃色液體；產率 65.9 %。
(b) 秤取化合物 47 (0.82 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 70 (0.59 克)；白色針狀結 晶；產率 80.3 %；熔點 146.7-148.5 ℃。
化合物 70 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：245
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：257.2 (3.9) IR：ν(KBr) cm-1：3371 (-NH-), 1663 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.48 (2H, s, -CH2-), 6.51-6.62 (2H, m, H-3, 5),
6.99-7.18 (3H, m, H-2?, 4?, 6?), 7.23-7.41 (2H, m, H-4, 5?), 7.81 (1H, dd, J=7.9, 1.6 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
45.45 (-CH2-), 110.68 (C-1), 111.87 (C-3), 113.62 (C-4?), 114.04 (C-2?), 114.93 (C-5), 123.13 (C-6?), 130.68 (C-5?), 131.95 (C-6), 134.60 (C-4), 142.98 (C-1?), 150.68 (C-2), 162.60 (C-3?), 170.22 (-COOH)
2-[(4-Fluorobenzyl)amino]benzoic acid (71)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，4-fluorobenzyl chloride (2.6 克, 0.018 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(2:3)/
矽膠]分離純化，可得 ethyl 2-[(4-fluorobenzyl)amino] benzoate (48) 1.8 克；
黃色液體；產率 65.9 %。
(b) 秤取化合物 48 (0.82 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 71 (0.35 克)；黃色粉末狀 結晶；產率 47.6 %；熔點 114.9-115.6 ℃。
化合物 71 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：245
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：258.8 (4.0) IR：ν(KBr) cm-1：3391 (-NH-), 1661 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
4.43 (2H, s, -CH2-), 6.51-6.65 (2H, m, H-3, 5),
7.09-7.40 (5H, m, H-4, 2?, 3?, 5?, 6?), 7.81 (1H, d, J=7.9, Hz, H-6) 8.23 (1H, br, -NH-), 12.62 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
45.27 (-CH2-), 110.58 (C-1), 111.86 (C-3), 114.81 (C-5),
115.46 (C-3?, 5?), 129.16 (C-2?, 6?), 131.93 (C-6), 134.59 (C-4), 135.72 (C-1?), 150.74 (C-2), 161.42 (C-4?), 170.22 (-COOH)
2-[(3-Methoxybenzyl)amino]benzoic acid (72)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，3-methoxybenzyl chloride (3.13 克, 0.02 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(1:1)/
矽膠]分離純化後，以乙醇做再結晶，可得 ethyl 2-[(3-methoxybenzyl)amino]
benzoate (49) 1.71 克；白色針狀結晶；產率 60.0 %。
(b) 秤取化合物 49 (0.82 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 72 (0.35 克)；白色針狀結 晶；產率 45.4 %；熔點 159-161.5 ℃。
化合物 72 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：257
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：259.6 (4.2) IR：ν(KBr) cm-1：3391 (-NH-), 1672 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
3.70 (3H, s, -OCH3), 4.41 (2H, s, -CH2-),
6.55 (1H, dd, J=7.8, 7.8 Hz, H-5), 6.65 (1H, d, J=8.4 Hz, H-3) 6.78-6.91 (3H, m, H-2?, 4?, 6?), 7.20-7.32 (2H, m, H-4, 5?), 7.82 (1H, d, J=7.8 Hz, H-6), 8.3 (1H, br, -NH-),
12.63 (1H, br, -COOH)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
46.02 (-CH2-), 55.15 (-OCH3), 110.51 (C-1), 111.93 (C-3), 112.34 (C-4?), 113.00 (C-2?), 114.77 (C-5), 119.35 (C-6?), 129.86 (C-5?), 131.89 (C-6), 134.61 (C-4), 141.29 (C-1?), 150.89 (C-2), 159.68 (C-3?), 170.24 (-COOH)
2-[(4-Methoxybenzyl)amino]benzoic acid (73)之合成
(a) 秤取 ethyl anthranilate (1.65 克, 0.01 莫耳)，4-methoxybenzyl chloride (3.13 克, 0.02 莫耳)，及無水碳酸鉀 2.76 克，無水碘化鉀 3.32 克，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-正己烷(1:1)/
矽膠]分離純化後，以乙醇做再結晶，可得 ethyl 2-[(4-methoxybenzyl)amino]
benzoate (50) 1.75 克；白色針狀結晶；產率 61.4 %。
(b) 秤取化合物 50 (0.82 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以管柱色層分析法[氯仿-乙酸乙酯(6:1)/矽膠]分離純化 後，以乙醇做再結晶，可得化合物 73 (0.2 克)；黃綠色片狀結晶；產率 31.1
%；熔點 164.4-165.6 ℃。
化合物 73 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：257
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：259.2 (4.2) IR：ν(KBr) cm-1：3392 (-NH-), 1657 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
3.71 (3H, s, -OCH3), 4.34 (2H, s, -CH2-),
6.54 (1H, dd, J=7.9, 7.9 Hz, H-5), 6.67 (1H, d, J=8.5 Hz, H-3), 6.89 (2H, d, J=8.5 Hz, H-3?, 5?), 7.24-7.28 (3H, m, H-4, 2?, 6?), 7.78 (1H, dd, J=7.9, 1.4 Hz, H-6)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
45.57 (-CH2-), 55.23 (-OCH3), 110.40 (C-1), 111.89 (C-3),
114.16 (C-3?, 5?), 114.63 (C-5), 128.64 (C-2?, 6?), 131.26 (C-1?), 131.88 (C-6), 134.59 (C-4), 150.86 (C-2), 158.51 (C-4?),
170.21 (-COOH)
4,5-Dimethoxy-2-[(3-methoxybenzyl)amino]benzoic acid (74)之合成
(a) 秤取 methyl 2-amino-4,5dimethoxybenzoate (4.22 克, 0.02 莫耳)，
3-methoxybenzyl chloride (6.26 克, 0.04 莫耳)，及無水碳酸鉀 5.5 克，無水碘 化鉀 6.6 克，以甲醇為溶媒，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得之 粗產物以管柱色層分析法[乙酸乙酯-正己烷(1:5)/矽膠]分離純化後，以乙醇 做再結晶，可得 methyl 4,5-dimethoxy-2-[(3-methoxybenzyl)amino]benzoate (54) 2.27 克；白色棉絮狀結晶；產率 34.3 %。
(b) 秤取化合物 54 (1.00 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 74 (0.66 克)；白色棉絮狀 結晶；產率 69.4 %；熔點 174.2-175.4 ℃。
化合物 74 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：317
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：245.9 (4.1) IR：ν(KBr) cm-1：3364 (-NH-), 1665 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
3.63 (3H, s, 5-OCH3), 3.69 (3H, s, 3?-OCH3), 3.71 (3H, s, 4-OCH3), 4.42 (2H, s, -CH2-),
6.25 (1H, s, H-3), 6.81 (1H, dd, J=8.2, 1.3 Hz, H-4?) 6.92-6.94 (2H, m, H-2?, 6?), 7.21-7.29 (2H, m, H-6, 5?)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
46.56 (-CH2-), 55.16 (4-OCH3), 55.53 (3?-OCH3), 56.35 (5-OCH3), 95.81 (C-3), 101.31 (C-1), 112.46 (C-4?), 113.21 (C-2?),
114.75 (C-6), 119.68 (C-6?), 129.82 (C-5?), 138.96 (C-5), 141.52 (C-1?), 148.15 (C-2), 155.15 (C-4), 159.67 (C-3?),
167.72 (-COOH)
4,5-Dimethoxy-2-[(4-methoxybenzyl)amino]benzoic acid (75)之合成
(a) 秤取 methyl 2-amino-4,5dimethoxybenzoate (4.22 克, 0.02 莫耳)，
4-methoxybenzyl chloride (6.26 克, 0.04 莫耳)，及無水碳酸鉀 5.5 克，無水 碘化鉀 6.6 克，以甲醇為溶媒，參照化合物 17 之合成方法進行反應，所得 之粗產物以管柱色層分析法[乙酸乙酯-正己烷(1:5)/矽膠]分離純化後，以乙 醇做再結晶，可得 methyl 4,5-dimethoxy-2-[(4-methoxybenzyl)amino]
benzoate (55) 2.55 克；白色粉末狀結晶；產率 38.5 %。
(b) 秤取化合物 55 (1.00 克, 0.003 莫耳)，參照化合物 56 之合成方法進行反 應，所得之粗產物以乙醇做再結晶，可得化合物 75 (0.7 克)；微黃色針狀 結晶；產率 73.6 %；熔點 176.6-177.1 ℃。
化合物 75 的各項光譜數據如下：
MS(m/z)：317
UV：λmax (CHCl3) nm (logε)：245.5 (4.3) IR：ν(KBr) cm-1：3366 (-NH-), 1651 (C=O)
1H-NMR (DMSO-d6, 200 MHz)δ(ppm)：
3.63 (3H, s, 5-OCH3), 3.71 (6H, s, 4-OCH3, 4?-OCH3), 4.36 (2H, s, -CH2-), 6.27 (1H, s, H-3),
6.90 (2H, d, J=8.2 Hz, H-3?, 5?), 7.29 (3H, d, J=8.14 Hz, H-6, 2?, 6?)
13C-NMR (DMSO-d6, 50 MHz)δ(ppm)：
46.11 (-CH2-), 55.21 (4-OCH3), 55.54 (4?-OCH3), 56.40 (5-OCH3), 95.76 (C-3), 101.23 (C-1), 114.15 (C-3?, 5?), 114.85 (C-6),
128.89 (C-2?, 6?), 131.49 (C-1?), 138.91 (C-5), 148.17 (C-2), 155.21 (C-4), 158.55 (C-4?), 169.70 (-COOH)
第 四 節 藥 理 試 驗 方 法
(一 ) 抗 下 痢 活 性 試 驗 方 法
1. GM1-酵 素 結 合 免 疫 吸 附 法 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay;
ELISA) 1
由 於 忌 熱 型 腸 毒 素 B 次 單 元 (LTB)會 與 腸 上 皮 的 GM1-receptor 結 合 ， 因 此 設 計 了 一 套 competitive GM1 ELISA。 將 200 ng 的 GM1 (購 自 sigma)coating 在 Microtiter plates (c96 Maxisorp; Fisher
Scientific, Pittsburgh, PA)上 ， 經 37 ℃ ， 16 小 時 incubate 之 後 ， 以 1× PBS 洗 去 未 固 定 的 GM1， 隨 後 用 1 % (w/v)bovine serum albumin (BSA)-PBS 溶 液 遮 蔽 額 外 的 結 合 部 位 ， 經 37 ℃ ， 30 分 鐘 後 ， 再 以 1× PBS 洗 3 次 。 接 著 將 化 合 物 與 經 純 化 且 label-biotin 的 LTB (0.016µg/well)混 合，在室溫下反應 2 小 時，隨後加到 coating 上 GM1 的 well，並在室溫下 incubate 30 分 鐘，之後再以 PBS 洗去未與 GM1 結 合 的 LTB， 最 後 加 入 avidin 連 結 過 氧 化 酵 素 (avidin-linked peroxidase)， 再 經 過 1 小 時 ， 37 ℃ 之 後 加 入 ABTS， 會 產 生 綠 色 的 受 質 ， 可 在 OD405 nm 的 ELISA 判 讀 機 進 行 判 讀 ， 進 而 定 出 LTB 與 GM1 的 結 合 比 例 。
2. 腸液蓄積測試(Fluid Accumulation assay) 53
利用 LT 全毒素會造成生物體腸壁 cAMP 濃度的急劇升高導致離子通 透性失調之原理，在此使用 female balc/cby mice (4-8weeks,20-25g 購自國 科會)，手術前將老鼠 starve 24 小時,再以 ketamine/xyline (2/1)做腹腔麻醉, 在 mice 空腸及迴腸之間做一小段結紮(約 4-5cm)再以 28 號針頭將 0.1ug 全毒素(LT) (total volume=200ul)打入結紮部位使腸液蓄積在 loop 內，24 小 時後將老鼠犧牲並取下結紮部位以 mg/cm 的方式計算其 loop 腫脹程度。
( 二 ) 抗 發 炎 活 性 試 驗 方 法
1.嗜 中 性 白 血 球 懸 浮 液 之 製 備
大白鼠(Sprague Dawley，300-350 g)以 pentobarbital (60 mg/kg)腹腔注 射麻醉後，從腹腔中動脈抽取血液(以 100 mM EDTA 當抗凝劑)，與 dextran 混合後在試管中靜置使紅血球沈澱。取上清液離心(400 × g)10 分鐘，丟棄 大部份上清液，將沈澱細胞懸浮液輕輕加至含有 Ficoll-Hypage 的試管 中，離心(500 × g)30 分鐘 54。將沈澱細胞懸浮 HBSS 離心(700 × g)10 分 鐘，並以低張 NaCl solution (0.05 %)使沈澱細胞中剩餘的紅血球破裂，以
大白鼠(Sprague Dawley，300-350 g)以 pentobarbital (60 mg/kg)腹腔注 射麻醉後，從腹腔中動脈抽取血液(以 100 mM EDTA 當抗凝劑)，與 dextran 混合後在試管中靜置使紅血球沈澱。取上清液離心(400 × g)10 分鐘，丟棄 大部份上清液，將沈澱細胞懸浮液輕輕加至含有 Ficoll-Hypage 的試管 中，離心(500 × g)30 分鐘 54。將沈澱細胞懸浮 HBSS 離心(700 × g)10 分 鐘，並以低張 NaCl solution (0.05 %)使沈澱細胞中剩餘的紅血球破裂，以