IL-10 細胞激素對呼吸道發炎反應的調控

IL-10 一開始定義為細胞激素合成抑制因子(cytokine

synthesis inhibitory factor)(52)，其可由 T 細胞、肥大細胞、巨噬細胞 和樹突細胞所分泌。雖然IL-10 是屬於 Th2 的細胞激素，但是 IL-10 卻可以抑制Th2 增生和 Th2 所產生的細胞激素(53)。IL-10 具有免疫調 控的能力，可透過作用在單核球、嗜中性白血球和嗜酸性白血球上來

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抑制發炎時所產生的細胞激素和化學趨化因子。在動物實驗中發現，

由過敏原引起呼吸道發炎反應，在給予重組IL-10 蛋白質治療後，可 抑制嗜酸性白血球和嗜中性白血球的聚集以及降低發炎細胞激素 TNF-α 的產量(54)。IL-10 也可以抑制由 TNF-α 和 IFN-γ 刺激人類呼吸 道平滑肌細胞所產生的IL-8 和 RANTES。另有研究發現 IL-10 可抑制 人類單核球細胞分泌IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α 和 ICAM-1 的 表現(55)。IL-10 也可降低 LPS 所誘發嗜中性白血球產生的 IL-8((56)。

IL-10 主要可活化 JAK (Janus kinase)及 STAT3 來執行其抗發炎作用 (57)，並利用 SOCS3 負向調控 IL-6 的訊號傳遞(58)。此外 IL-10 亦可 藉由調控SMAD 7(SMAD family 7)的表現來抑制 IL-5 所對 BEAS-2B 細胞株的發炎反應(59)。雖然在許多氣喘動物模式上，IL-10 已被證實 有治療呼吸道發炎的效果，但是在對於IL-10 調節細胞激素(例如：IL-4、

IL-13、TNF-α 和 IL-17)所引起在肺上皮細胞發炎反應中扮演的角色還 未被深入探討。

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第貳章

研究動機與目的

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雖然IL-10 是屬於 Th2 的細胞激素，同時卻也具有抗發炎反應之 作用，且在上述文獻顯示IL-10 的確可抑制由前發炎組織介素 TNF-α 和第二型細胞激素IL-4、IL-13 所誘發的發炎反應。此外我們之前的 實驗也證實IL-10 在治療氣喘發作小鼠時可得不錯的療效(60)，因此我 們想更進一步要去了解是否IL-10 在對前發炎組織介素 TNF-α、IL-17 和第二型細胞激素IL-4、IL-13 所誘發造成的肺表皮細胞發炎反應有 其抑制的效果以及其調控的機制為何，就此將實驗分為兩個部分分別 探討。

第一部分: 首先先初步評估在體外細胞培養下加入 IL-4、IL-13 和 TNF-α 對小鼠肺表皮細胞是否具誘發發炎效果。觀察在給予不同劑量 和不同時間下刺激肺表皮細胞，測其表現發炎介質eotaxin 和 IL-6 之 能力。之後在IL-10 抑制發炎實驗中，再進一步觀察給予不同劑量 IL-10 或不同時間點給予IL-10 時，其對肺細胞分泌 eotaxin 或 IL-6 是否有影 響。

第二部分: 以人的肺表皮細胞株(human lung epithelial cells)A549 和 BEAS-2B 為平台建立起在給予細胞激素(IL-4、IL-13、TNF-α 和 IL-17) 刺激下，誘發發炎反應物質IL-6、IL-8、eotaxin 和 RANTES 的表現時，

觀察在不同時間點及不同劑量IL-10 作用下其是否有抑制肺上皮細胞 分泌發炎指標之細胞激素、發炎介質之效果，並且探討此抑制作用是

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藉由增加細胞表面IL-10 接受器的表現量或是減少發炎細胞激素及介 質mRNA 之表現量來達到調控的目的。此外，我們也會進一步了解 IL-10 式調控何種訊號傳遞途徑來減低肺上皮細胞的發炎反應。

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第参章

探討 IL-10 調控 IL-4、IL-13 與 TNF- α

所誘發小鼠肺表皮細胞之發炎反應

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