康復力與夜交藤之抗氧化活性研究 = Study on the antioxidative properties of symphytum officinale and polygoni multiflori
劉易修、吳淑姿 ; 顏裕鴻
E-mail: [email protected]
摘 要
近幾年，尋找具高抗氧化性且無毒之天然物質，以降低生物體內之氧化性傷害，所以中草藥植物的開發與運用，已成為未 來趨勢。本研究選定康復力和夜交藤兩種植物為研究對象，這兩種植物自古即常應用於藥用或食用，為具有多用途之中藥 材。康復力(Symphytum officinale)為紫草科康復力屬植物，別名為康富力、康固力、康復利等，常被種植為園藝觀賞及藥 用植物，主治高血壓、出血、止痢等，並有防癌、抗癌作用。夜交藤(Polygoni multiflori)為蓼科(Polygonaceae)植物，別名為 首烏藤、何首烏藤等，自古即為入藥植物，主治補肝，益腎，養血。 本研究乃探討康復力與夜交藤經四種不同溶劑(
正己烷、二氯甲烷、甲醇-氯仿、甲醇-水)萃取，並作萃取物之活性測試，能了解何種溶劑能萃取出較高的抗氧化活性物質
，抗氧化活性的測試包括DPPH自由基清除能力、還原力、螯合亞鐵能力、清除超氧陰離子能力、抑制微脂粒氧化作用、
清除ABTS陽離子及總酚和類黃酮含量測定，並與BHA、EDTA、α-生育醇及沒食子酸之抗氧化性做比較。 實驗結果 指出，四種溶劑所萃取之萃取物，康復力以甲醇-氯仿片段萃取物抗氧化能力最佳，可能由於甲醇-氯仿片段萃取物含有較 多的總酚含量，其含量為39.15±0.30 mg/g，在清除DPPH自由基試驗中，於濃度1.0 mg/mL，其清除率為98.09%；亞鐵離 子螯合力試驗中，其最佳螯合力為95.65%；還原力試驗中，最佳還原力為59.79%；超氧陰離子清除能力試驗中，於濃度小 於0.01 mg/mL時，比沒食子酸的超氧陰離子清除能力為佳；抑制微脂粒氧化試驗中，於10 mg/mL時，有最高抑制微脂粒 氧化作用能力，其抑制率為57.25%；總抗氧化能力試驗中，濃度於0.1 mg/mL時，與抗氧化劑BHA之總抗氧化能力相近。
夜交藤以甲醇-水片段萃取物抗氧化能力最佳，可能由於甲醇-水片段萃取物含有較多的總酚含量，其含量為96.42±2.10 mg/g，在清除DPPH自由基試驗中，於濃度0.04 mg/mL，清除DPPH自由基能力比BHA為較佳；亞鐵離子螯合力試驗中，
其最佳螯合力為92.91%；還原力試驗中，最佳還原力為53.93%；超氧陰離子清除能力試驗中，於濃度0.05 mg/mL時，比 沒食子酸的超氧陰離子清除能力為佳；抑制微脂粒氧化試驗中，於10 mg/mL時，有最高抑制微脂粒氧化作用能力，其抑 制率為75.34%；總抗氧化能力試驗中，濃度於0.04 mg/mL時，與抗氧化劑BHA之總抗氧化能力相近。 綜合以上結果顯示
，康復力、夜交藤之萃取物皆具有抗氧化性，因此，由研究得知康復力、夜交藤，經不同溶劑萃取後之萃取物，其抗氧化 活性之變化，了解何種溶劑能萃取出較高的抗氧化活性物質，作為機能性食品開發之參考。
關鍵詞 : 康復力 ; 夜交藤 ; 抗氧化活性
目錄
目錄 封面內頁 簽名頁 授權書iii 中文摘要iv 英文摘要vi 誌謝viii 目錄ix 圖目錄xii 表目錄xiii 1.緒論1 2.文獻回顧2 2.1植物簡 介2 2.1.1康復力2 2.1.2夜交藤4 2.2中草藥的研究發展現況4 2.3自由基之介紹6 2.3.1何謂自由基?6 2.3.2清除自由基的酵素系 統10 2.4抗氧化劑介紹12 2.4.1抗氧化劑12 2.4.2抗氧化劑之作用機制13 2.4.3抗氧化劑的研究現況15 2.4.4天然抗氧化物15 2.5 抗氧化活性測試原理21 2.5.1清除α,α–diphenyl–β–picrylhydrazyl (DPPH)自由基之測定21 2.5.2還原力測定21 2.5.3超氧 歧化?(SOD)試驗22 2.5.4螯合亞鐵離子之測定22 2.5.5抑制微脂粒(Liposome)氧化作用之測定23 2.5.6清除ABTS陽離子自由基 能力測定23 2.6抗氧化成分含量測定24 2.6.1總酚化合物含量測定24 2.6.2類黃酮含量之測定24 3.材料與方法26 3.1實驗材 料26 3.1.1康復力26 3.1.2夜交藤26 3.2實驗藥品26 3.3實驗設備27 3.4實驗方法27 3.4.1植物樣品製備27 3.4.2不同溶劑萃取28 3.4.3抗氧化成分含量28 3.4.4抗氧化活性測性30 4.結果與討論35 4.1康復力抗氧化成分含量測定35 4.1.1康復力之萃取率35 4.1.2總酚化合物35 4.1.3類黃酮含量37 4.2康復力抗氧化活性測試37 4.2.1清除α,α–diphenyl–β–picrylhydrazyl (DPPH)自 由基之能力37 4.2.2還原力試驗39 4.2.3超氧歧化?(SOD)試驗42 4.2.4螯合亞鐵離子42 4.2.5抑制微脂粒(Liposome)氧化作用45 4.2.6清除ABTS陽離子自由基能力45 4.3夜交藤抗氧化成分含量測定48 4.3.1夜交藤之萃取率48 4.3.2總酚化合物50 4.3.3類黃 酮含量50 4.4夜交藤抗氧化活性測試50 4.4.1清除α,α–diphenyl–β–picrylhydrazyl (DPPH)自由基之能力50 4.4.2還原力試 驗51 4.4.3超氧歧化?(SOD)試驗55 4.4.4螯合亞鐵離子55 4.4.5抑制微脂粒(Liposome)氧化作用58 4.4.6清除ABTS陽離子自由基 能力60 5.結論62 5.1結論62 5.2未來展望63 圖目錄 圖2.1康復力3 圖2.2夜交藤5 圖2.3BHA、BHT、PG、TBHQ之化學結構14 圖2.4δ-tocopherol 結構圖19 圖2.5類黃酮之基本結構26 圖3.1萃取物製備29 圖4.1康復力之萃取物DPPH自由基清除能力38 圖4.2康復力之萃取物的還原力41 圖4.3康復力萃取物的清除超氧陰離子能力43 圖4.4康復力之萃取物的螯合亞鐵離子能力44 圖4.5康復力之萃取物的抑制微脂粒氧化作用能力46 圖4.6康復力之萃取物的清除ABTS陽離子自由基能力47 圖4.7夜交藤之 萃取物DPPH自由基清除能力52 圖4.8夜交藤之萃取物的還原力54 圖4.9夜交藤萃取物的清除超氧陰離子能力56 圖4.10夜交 藤之萃取物的螯合亞鐵離子能力57 圖4.11夜交藤之萃取物的抑制微脂粒氧化作用能力59 圖4.12夜交藤之萃取物的總抗氧化
能力61 表目錄 表2.1紫草科植物清除自由基之IC50比較7 表2.2天然抗氧化劑之來源17 表2.3類黃酮的抗氧化特性21 表4.1康 復力總酚與類黃酮含量36 表4.2不同溶劑萃取對康復力之反應速率常數及半數清除濃度(IC50)40 表4.3夜交藤總酚與類黃酮 含量49 表4.4不同溶劑萃取對夜交藤之反應速率常數及半數清除濃度(IC50)53
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