一、前人研究
（一）試驗宿主青剛櫟與兩種接種塊菌之介紹
本試驗中所選用之接種源，一為外來種塊菌－夏塊菌，原產地為歐洲如法國、
義大利等國家，宿主植物多屬櫟屬（Quercus spp.）的植物如橡樹（oak）、水青岡 屬（Fagus spp.）的山毛櫸（beech）等；此外，台灣固有種台灣塊菌，宿主則主要 為青剛櫟，與櫟屬同為殼斗科植物，為本土防火造林樹種。青剛櫟屬於殼斗科
（Fagaceae）椆屬（Cyclobalanopsis）（黃増泉，1993），為常綠闊葉喬木，高可達 20 公尺；樹皮淡褐灰色，多不開裂，小枝條有皮孔，但光滑無毛。葉互生，有時 叢生於小枝條的先端，呈長橢圓形，先端漸尖或呈短尾狀，葉緣上半部有鋸齒。
其木材堅韌呈淡黃褐色，心邊材區分明顯，彈力大，耐摩擦，常做為建築及車輛 用材；亦常栽培於庭園供觀賞用，樹皮及其殼斗富含單寧。廣泛分布於日本、韓 國、中國大陸與台灣，在本省普遍生長於低至中海拔約300～2000 公尺的山地（劉 棠瑞，1960）。青剛櫟之堅果呈長橢圓形，其種苞之鱗片合生成同心環帶，頗易辨 識；其常綠濃密之樹冠具有防風、遮蔭、防止噪音等功能，為良好之園林樹種；
以前更被養菇業者認為是香菇之上好段木（胡弘道等，1999）。基於青剛櫟上述之 優點，本試驗之宿主植物，選擇青剛櫟為塊菌菌根合成之對象。
台灣塊菌，子囊果直徑 2～10 公分，不規則球形或不規則橢圓形，暗褐至棕 黑色，表面具4～7 脊的金字塔形凸起，中間略呈凹陷，產孢組織暗褐～棕黑色，
具白色～黃褐至紫色的菌脈（veins）。子囊球形或長橢圓形，大小約 22～50 × 33
～55 μm，子囊柄基短，內具 2～4 個孢子。孢子暗褐色，橢圓形，大小約 12.5～
25 × 10～18 μm，表面具網狀的刺（spiny-reticulate），刺高 3 微米左右。子實體於 8 月底至 2 月生長於石灰質的青剛櫟林內（Hu, 1992）。夏塊菌，子囊果直徑 1.5
～5 公分，不規則球形或不規則橢圓形，淺棕色至黑色，表面有明顯 3～6 角小疣，
產孢組織初期為白色，成熟會變淡黃色或褐色。子囊不規則球形或橢圓形，大小 約40～72 × 55～88 μm，無子囊柄或短柄，內有 1～6 個孢子。孢子暗褐色或黃褐 色，不規則球狀或多角形，大小約7～15 × 6～12 μm，有厚壁，表面網狀不具刺，
子實體於5 月底至 10 月生長在橡樹林內（陳娟等，2005）。
（二）溫度對外生菌根菌之影響
菌根的形成是菌根菌與宿主植物（host plant），在一定的環境條件下所形成，
因此，宿主植物、共生菌根菌與環境條件，就成為菌根形成之三個最主要因子，
在菌根的形成過程中，三者之間相互依賴與制約，缺一不可。實際上，在每個因 子中，還包括有許多的附帶因子，就宿主植物而言，包括植物的品種或品系、不 同無性系或地理種源、植物年齡以及營養根系發育狀況等；就菌根菌言，則包括 菌種、菌株、繁殖體數量等；至於適宜的環境條件範圍則更廣，例如：土壤的養 分狀態、溫度、pH 值、溼度以及水分等（弓明欽等，1997）。此外，還有一些外 在因子如光照強度、人為土壤施肥與耕犁、人為皆伐、酸雨、噴藥與消毒，以及 重金屬污染等，均也影響著菌根菌的生長與形成（Az’con-Aguilar, 1981）。
每一種菌根菌皆有其最適宜生長之環境，與其各自較佳之忍受性與功能，
Bowen（1973）指出，彩色豆馬勃是一種能夠適應較廣範圍溫度之菌種，此外，有 菌索的菌根菌可增加根系之耐旱力。胡弘道（1990）指出，大部分的外生菌根菌，
其適宜之生長溫度約在8～27℃左右，但生長速率對於溫度之曲線形式，可能顯示 出明顯或不明顯的適宜溫度。Theodorou 與 Bowen（1970）則指出，pH 值影響培 養介質中菌根菌生長，不管是生長在一般或具有較強緩衝能力之介質，皆有一定 之影響力。Lahio（1970）則發現卷邊椿菇（Paxillus involutus）各品系之適宜 pH 值在3.1 與 6.4 之間，在適合的 pH 值中各品系之生長速率有很大的差異，且適宜 生長曲線之形式亦不相同。此外，胡弘道（1990）指出，對於大多數的外生菌根 真菌而言，偏酸性條件是合適的，一般最適宜的pH 值為 4～6。弓明欽等（1997）
亦指出，宿主之生長與養分吸收，受到菌根之質與量影響甚鉅，而菌根之質與量，
又以溫度及pH 值影響最大。大多數針對宿主與菌根菌間生長之研究，亦多以此二 因子為試驗之首要考慮。塊菌與此二因子間的關係，先前已有陳怡君（2004）針 對義大利白塊菌與不同pH 介質，對其菌根形成與苗木葉部大量養分元素效益作分 析與研究，惟溫度對塊菌菌根、宿主生長與養分吸收之關係等研究，至今仍付之 闕如。
早期 Theodorou 與 Bowen（1971）以黃色鬚腹菌（Rhizopogon luteolus）、點柄 乳牛肝菌（Suillus granulatus）與環乳牛肝菌（S. luteus）等，進行最適宜溫度試驗，
結果發現黃色鬚腹菌於20～25℃時生長最好，點柄乳牛肝菌 20℃生長最佳，環乳 牛肝菌為 25℃。Cline 等（1986）以彩色豆馬勃、土生空團菌（Cenoccoccum geophilum）、疣格菌（Teheophora terrestris）與點柄乳牛肝菌等四種外生菌根菌，
在各種外生菌根菌種間又有採集自不同緯度的分離株，並將四種外生菌根菌培養 於MMN 培養基中，分別置於 16、21、27、32 與 38℃等五種不同溫度，藉以瞭解 不同菌種、不同菌株間受溫度影響之生長效益。試驗結果顯示，彩色豆馬勃在21、
27、與 32℃時生長良好；土生空團菌在 21℃時生長良好，32、38℃下則幾乎呈現 無法生長的現象；疣格菌於27℃時生長最好，但 38℃無法生長；點柄乳牛肝菌生 長範圍從16～27℃，於 32℃時被限制，在 38℃時則完全無法生長。Moore 與 Peterson
（1992）以不同溫度（6、8、10、12、14、25℃），對於卷邊椿菇（Paxillus involutus）
產生菌核之影響作研究，他們指出有許多種類的真菌會形成菌核，而菌核是由菌 絲聚集所形成，並會形成黑色外皮，可以幫助真菌在養分逆境、乾旱與極限溫度 等不利環境中存活，其結果顯示 10℃時形成最大的菌核，這可能與養分從菌絲轉 移至菌核的速度有關，因為Cooke（1970）指出，在 10℃時對樁菇科（Paxillaceae）
真菌來講，養分從菌絲轉移至菌核的速度應該是最快之溫度，當菌核較小或未形 成時，則是養分的轉移速度變慢所致。此外，Wilcoxson 與 Subbarayudu（1968）
也表示菌絲的年齡，會影響養分從菌絲轉移至菌核的速度，因為新生長的菌絲養
分轉移速度快，進而產生最多的菌核，此觀點可解釋在Moore 與 Peterson（1992）
的試驗中，菌絲生長速度最大者為 10℃，此溫度亦是菌核生長量最大的試驗組。
在野外狀態，當土壤溫度呈低溫狀態時，應會對真菌菌絲產生誘導的機制，使其 產生菌核，惟這部分的研究仍無，因此無法取得相關資訊。Sanchez 等（2001）以 八種分離自地中海旁森林的外生菌根菌（Hebeloma edurum、Lactarius deliciosus、
Suillus luteus、Suillus granulatus、Rhizopogon roseolus、Suillus collinitus、Tricholoma focale、Tricholoma striatum），進行 5 種不同溫度（5、10、18、23、30℃）的生長 試驗，他們先以MMN 培養基固定 pH 値為 5.5 培養六星期後，再測量菌絲直徑生 長與菌絲乾重，結果顯示多數菌種在23℃時生長較佳，在所有菌種中，低於 18℃
的試驗組，菌落直徑生長與菌絲乾重方面均顯著較小，但在 30℃時則僅有兩種菌 種有生長現象（R. roseolus、S. collinitus）。此外，該研究亦指出，菌種對於溫度的 忍受度，與其原生地之溫度狀況有很大的關聯性。
在國內，則有洪玲玲（1977）於培養彩色豆馬勃與乳牛肝菌時，發現彩色豆 馬勃最適宜的生長溫度為28～36℃，乳牛肝菌則為 20℃生長最佳。許碧如（1987）
針對夏塊菌進行溫度、pH 値及葡萄糖濃度等，對於生長效益之研究發現，菌落生 長在30℃時最好。Hu 與 Liou（1995）以分離自八通關之松茸，進行 4 種不同溫度 之菌落直徑生長試驗，在經過 130 天的培養後，結果顯示松茸菌落之最適宜生長 溫度為20℃，但是隨著溫度升高至 25℃，或是下降至 15℃，均形成不利於菌落生 長之情形，且相互間呈顯著差異；此外，當溫度再升高至 30℃時則菌落完全無法 生長。但如果於實驗結束後，將菌絲菌落自30℃中移出，置於室溫（約 20～25℃）
中，經過七天之後菌絲即會再恢復生長活力。由Hu 與 Liou（1995）的試驗結果發 現，松茸應能在本省海拔800~1,000 公尺左右之生育地中生長良好，若在較低海拔 生長，出菇時間可以更為提早，更能提高其經濟價值；在本省低海拔之台灣二葉 松林份中雖未見松茸之子實體，惟經由其溫度生長試驗結果，可以針對其適宜的 生長條件作半人工繁殖。高嘉鴻（2005）以中果塊菌進行不同溫度的試驗後發現，
該菌種在15～30℃皆在其耐性範圍內，菌落生長效應最好的溫度為 25℃及 30℃。
許桂蓮（2007）將已分離成功的冬塊菌、印度塊菌、台灣塊菌、擬凹孔塊菌、黑 孢塊菌以及義大利白塊菌等六種塊菌，分別置於15℃、20℃、25℃、30℃及 34℃
的生長控制箱中進行培養，並以33、34、35 與 36℃作最高致死溫度試驗，藉以找 出各塊菌種間的最高致死溫度。結果顯示各菌落的生長直徑以 25℃時生長最佳，
34℃時則最差，其菌落生長優劣順序為 25℃℃20℃＞30℃℃15℃＞34℃。其中冬 塊菌在各溫度下，菌落生長均最佳且最快速，其他塊菌菌落在34℃時均停止生長，
35℃則為義大利白塊菌與印度塊菌菌落之最高致死溫度，36℃則是黑孢塊菌與台 灣塊菌之最高致死溫度。此外，胡弘道等（2008a、2008b）發現以 YpSs 培養基培 養台灣塊菌、印度塊菌、黑孢塊菌、義大利白塊菌與擬凹孔塊菌後發現，在台灣 塊菌與印度塊菌方面，菌落生長最適宜的溫度是以25℃最佳，最差的則是 33℃，
在黑孢塊菌、義大利白塊菌與擬凹孔塊菌方面，則是20 及 25℃最佳，最差同樣是 33℃。
（三）溫度對外生菌根族群與菌根菌子實體之影響
近年來，由於人類經濟活動頻繁，加上工業革命興起，致使全球氣候變遷，
全球暖化的現象與衍生出之問題層出不窮。溫室效應（greenhouse effect）造成氣 候急劇變遷，影響著全球的氣溫、降雨變化，使氣溫升高、海平面上升以及生態 系統失去平衡（Pendall et al., 2004）；此外，有學者（Carter et al., 1995）指出，未 來50 年內，全球的平均氣溫會增加 0.3 ~ 3.6℃，這樣必然也會使土壤中的溫度增 加，進而影響到土壤中微生物，其中也包含菌根菌等的生育環境。
全球暖化的現象與衍生出之問題層出不窮。溫室效應（greenhouse effect）造成氣 候急劇變遷，影響著全球的氣溫、降雨變化，使氣溫升高、海平面上升以及生態 系統失去平衡（Pendall et al., 2004）；此外，有學者（Carter et al., 1995）指出，未 來50 年內，全球的平均氣溫會增加 0.3 ~ 3.6℃，這樣必然也會使土壤中的溫度增 加，進而影響到土壤中微生物，其中也包含菌根菌等的生育環境。