Chapter 3 方法與材料
3.2 假體實驗
假體實驗包含MRS 以及 CSI 兩部分，主要目的為對照兩者之間的結果以驗證 一致性，並且觀察樣品代謝物之分離效果與分布是否與實際假體情形相符。
假體製做是先泡製重量濃度百分之五洋菜膠(Agarose)，接著將各裝有 NAA、
Cr、Lac 樣品管埋入洋菜膠中，樣品濃度均為 50mM(圖 3-1)，各標準樣品皆以磷 酸鹽緩衝液(Phosphate buffer saline buffer，PBS buffer)泡製，緩衝液之酸鹼值為 7.2。
圖 3-1 假體結構及代謝物樣品分佈
NAA
50 mM
Cr 50 mM
Lac 50 mM Agarose
5 %
3.2.1 磁共振頻譜實驗
在磁共振頻譜實驗所採用之脈衝序列為 PRESS，分別對各樣品管內之溶液收 取頻譜訊號，接著做一維傅立葉轉換，並取其訊號之強度大小(Magnitude)以去除 相位位移，如此將不必做相位校正的步驟，只需經過基線校正，最後針對個別代 謝物樣品在頻譜上的訊號做訊噪比分析。
圖 3-2 MRS 實驗流程
實驗流程如(圖 3-2)，將欲掃描之區域移動到 MRI 磁場中心點，調整激發體線 圈共振頻率以及阻抗匹配(Tune and match)，進行整體性勻場(Global shimming)並調 整各勻場頻道直至 FID 訊號達到最大值，在頻譜上可以觀察到水訊號之半高全寬 越來越窄，FID 的衰減速度越來越慢，而勻場的頻道順序為高次項至低次項，每調 整完一個高次項，必須重新調整其相關的低次項，因為低次項的勻場頻道會與高
次項互相感應耦合，而實際調整例如調整完XYZ 頻道必須依次調整 XY、YZ、XZ、
X、Y、Z。接著調整激發脈衝強度以求得最大訊號強度，收取 T2 自旋回音影像作 為PRESS 定位用，確認 VOI 位置後再次調整激發脈衝，此時將針對 VOI 區域做 激發並且調整激發脈衝強度以求得最大訊號強度，爾後進行局部勻場(Local shimming)，局部勻場將針對 VOI 區域做激發並且調整一次項頻道直至 FID 訊號有 最大值，並且使水之半高全寬(Water line width)最窄，亦即提高訊號及頻譜解析度，
勻場後將調整抑制水訊號之脈衝強度以達到抑制最佳化，最後以PRESS 收取頻譜 為60 ms，average 為 4，RARE factor 為 8，矩陣大小(Matrix size)設定為 256 × 256，
截面厚度(Slice thickness) 設定為 2 mm，視野(Field Of View，FOV) 大小為 3 × 3 cm2。
PRESS 所使用之參數如下，TR 為 2500 ms，TE 為配合 Lac 的 J coupling 而設 定為136 ms，average 為 256，因此時間將達十分鐘左右，VOI 大小 2 × 2 × 2 mm3， 頻譜之頻寬(Band width，BW)為 4960.32 Hz，水抑制的方法由於操作版本(PV3.0.1) 支援的限制，故使用CHESS，其頻寬為 150 Hz。
3.2.2 化學位移影像實驗
在CSI 實驗中使用之脈衝序列為 spin echo-CSI，一次收取整體之頻譜訊號，
將收取後之訊號做三維傅立葉轉換，針對個別樣品代謝物在活體上主要訊號的化 學位移範圍做積分以影像表示，並個別分析其訊噪比。
實驗流程與 MRS 相同(圖 3-2)，唯局部勻場時乃針對欲觀察之截面做激發，
其餘流程相同，最後以spin echo-CSI 收取頻譜訊號。
T2 定位影像使用 RARE 收取，參數如下，TR 為 2500 ms，TE 為 60 ms，average 為4，RARE factor 為 8，矩陣大小(Matrix size)設定為 256 × 256，截面厚度(Slice thickness) 設定為 2 mm，視野(Field Of View，FOV) 大小為 3 × 3 cm2。
spin echo-CSI 所使用之參數如下，TR 為 2500 ms，TE 為 136 ms，average 為 8，
matrix size 為 16 × 16，掃描時間長達八十分鐘，截面厚度(Slice thickness)為 2 mm，
FOV 大小為 3.2 × 3.2 cm2，頻譜頻寬(Band width，BW)為 6510.42 Hz，水抑制使 用 VAPOR，其頻寬為 150 Hz。其中為針對欲觀察之 VOI，將使用六張抑制截面 (Saturation slice)把 VOI 外之訊號抑制以降低外界訊號干擾，截面與 VOI 間隔為各 VOI 方向尺寸十分之一。