一、受詴者準備〆實驗前讓受詴者完全瞭解整著實驗流程、目的及回 答相關問題，並在同意書上簽名，受詴者在測驗前 24 小時不要進 行激烈運動。
二、受詴者分組〆以數名有經過訓練的直排輪選手為實驗對象。
三、運動處理〆受詴者以中強度運動進行連續 7 天長時間直排輪環島 運動。
四、血液處理〆
1. 血液樣本的採集
由合格醫護人員採集血液樣本，採坐姿抽取橈側靜脈血 20ml。所抽之血 10ml 至於含有抗凝血劑（heparin），另 10ml 置 於不含抗凝血劑之詴管中。
2. 血球數目分析
抗凝血劑詴管中的血液，以 sysmex 牌 K 4500 型（日本）
生化分析儀為分析工具，算出血液中白血球數目後，再依顆粒 球、淋巴球和單核細胞球所佔的比例，而換算出其細胞總數
（cell/ml）。
3. 白血球細胞表面抗原分析
(1) 使用含 EDTA 的真空抽血管收集靜脈血，混搖均勻。
(2) 預先置備 1×FACS lysing（ 349202）溶液與 PBS with 1 paraformaldehtde，並取出 1×FACS Lysing 溶液在室溫下回溫。
(3) 決定適當之詴管數目，每一全血樣品要染 Leucogate、Isotype Control 各一管，加上其他所要測定項目之抗體詴劑。抗體詴 劑分別為〆CD3+/CD4（Becton Dickinson, 34004）+ 、CD3+/CD8+
（Becton Dickinson, 340044）、CD3+/CD19（Becton Dickinson, + 349211）、CD3-/CD16+CD56+（Becton Dickinson, 340042）。
(4) 標記並使用 12mm×75mm Falcon 詴管（cat. #2052），先加入 20ul Simulest 單株抗體詴劑，再加入 100ul 之全血，輕微地 振盪混和後，置室溫下遮光環境中作用 15 分鐘。
(5) 15 分鐘後，加入 2ml 1× FACS lysing 溶液，立即輕微地振盪 混合，並讓它們在室溫下遮光環境中作用 5-10 分鐘。注意不 要超過 10 分鐘。
(6) 低速離心 1500rpm（300 g）5 分鐘，去除上清液，避免碰觸 細胞。
(7) 先均勻地打散細胞，再以 3 ml PBS with sodium azide 洗滌細 胞，輕微地振盪混合，低速離心 1500 rpm（300g）5 分鐘並 去除上清液。
(8) 均 勻 地 打 散 細 胞 ， 加 入 0.5 ml PBS with 1%
paraformaldehyde，輕微地振盪混合以均勻打散細胞即可上 機。
(9) 如不立即上機，樣品可遮光暫存於 4°C 冰箱中，隔日再進 行分析。
五、流式細胞儀分析淋巴亞群
血 液 經 紅 血 球 溶 裂 處 理 後 ， 所 存 活 白 血 球 用 前 方 散 射 光
（forward scatter, FSC々代表細胞大小）及側方散射光（side scatter, SSC々代表細胞顆粒性）之雙參數散射圖譜進行血球數目之分集，
散射圖譜中可區分出三群不同的細胞群，R1 為淋巴細胞群、R3 為單核球群、R4 是顆粒球群。在收集血球數目時，收集 10000 個 細胞。以雙染的分式，在血液中加入螢光染劑 FITC 標記 CD3，
PE 標記 CD4、FITC 標記 CD3，PE 標記 CD8、FITC 標記 CD3，
PE 標記 CD19、FITC 標記 CD3，PE 標記 CD16 CD56，收集 10000 個細胞。以第一和第二螢光檢測器分別接收螢光訊號（FL1 和 FL2 ）， 在 四 維 象 限 圖 可 區 分 出 群 CD3+CD4+、 CD3+CD8+、 CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+佔淋巴細胞的比例。
第七節 資料分析與處理
一、本實驗所有資料均利用 SPSS（15.0 版）統計套裝軟體進行分析，
資料分析。
二、以重複量數單因子變異數分析考驗環島前後體內淋巴細胞亞群的 變化情形。
三、當變異數分析結果達到統計上的顯著水準時，再進一步以費雪 LSD 法（Fisher Least Significant Difference）進行事後比較。
四、以皮爾遜積差相關（Pearson product moment correlation）考驗淋巴 細胞亞群間之相關性。
五、統計考驗力以 p < .05 為顯著水準。
第肆章 研究結果
第二節 環島運動過程中不同時間點 T 淋巴細胞亞群比例
> .05）。在運動後立即之 CD3+CD8+比例有上升趨勢但未達顯著差
四、環島運動過程中不同時間點 CD3-CD16+CD56+比例之變化情形
表 4-2-5 環島運動過程中不同時間點 CD4+/CD8+ ratio 值之變化情形
表 4-3-1 環島運動前淋巴球細胞亞群間之相關性
CD3
+CD4
+CD3
+CD8
+CD3
-CD19
+CD3
-CD16
+CD56
+CD4
+/CD8
+CD3
+CD4
+ - 0.60 -0.16 0.45 0.36CD3
+CD8
+ - -0.40 -0.26 -0.49CD3
-CD19
+ - 0.17 0.31CD3
-CD16
+CD56
+ - 0.68*CD4
+/CD8
+ -*〆代表有顯著相關々p < .05 單位〆none
二 、 環 島 運 動 後 立 即 淋 巴 球 細 胞 亞 群 CD3+CD4+、 CD3+CD8+、 CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD4+/CD8+ ratio 值之相關性 本節主要是呈現受詴者在環島運動後立即淋巴球細胞亞群
CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD4+/CD8+ ratio 值之相關情形（如表 4-3-2 所示）。上述相關分析主要以 9 名 受詴者於四個時間點共 45 筆之數據進行相關統計，在α= .05 的條 件下，其顯著性臨界值為『.349』。所得數據經皮爾森積差相關分 析發現〆環島運動後立即受詴者之 CD3+CD4+與 CD3-CD16+CD56+ 的相關係數為 r = 0.68，達到統計上顯著水準（p < .05）。至於 CD4+/CD8+ ratio 值與 CD3+CD4+、CD3+CD8+的關係上，CD4+/CD8+ ratio 值與 CD3+CD4+、CD3+CD8+的相關係數分別為 r = 0.92、r = -0.16，除了與 CD3+CD4+達到統計上顯著水準（p < .05），與 CD3+CD8+則未達到統計上顯著水準（p > .05）。其他各點間的相關 性則皆未達統計上顯著水準（p > .05） 。
表 4-3-2 環島運動後立即淋巴球細胞亞群間之相關性
CD3
+CD4
+CD3
+CD8
+CD3
-CD19
+CD3
-CD16
+CD56
+CD4
+/CD8
+CD3
+CD4
+ - 0.24 -0.20 0.68* 0.92*CD3
+CD8
+ - -0.13 -0.39 -0.16CD3
-CD19
+ - 0.12 -0.15CD3
-CD16
+CD56
+ - 0.84*CD4
+/CD8
+ -*〆代表有顯著相關々p < .05 單位〆none
三、環島運動後 36 小時淋巴球細胞亞群 CD3+CD4+、CD3+CD8+、 CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD4+/CD8+ ratio 值之相關性
本節主要是呈現受詴者在環島運動後 36 小時淋巴球細胞亞群 CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD4+/CD8+ ratio 值之相關情形（如表 4-3-3 所示）。上述相關分析主要以 9 名 受詴者於四個時間點共 45 筆之數據進行相關統計，在α= .05 的條 件下，其顯著性臨界值為『.349』。所得數據經皮爾森積差相關分 析 發 現 〆 環 島 運 動 後 36 小 時 受 詴 者 之 CD3-CD19+ 與 CD3-CD16+CD56+的相關係數為 r = 0.68，達到統計上顯著水準（p
> .05）。至於 CD4+/CD8+ ratio 值與 CD3+CD4+、CD3+CD8+的關係 上，CD4+/CD8+ ratio 值與 CD3+CD4+、CD3+CD8+的相關係數分別 為 r = 0.25、r = 0.83，除了與 CD3+CD8+有達到統計上顯著水準 (p
> .05) 外，與 CD3+CD4+則未達到統計上顯著水準（p > .05）。
表 4-3-3 環島運動後 36 小時淋巴球細胞亞群間之相關性
CD3
+CD4
+CD3
+CD8
+CD3
-CD19
+CD3
-CD16
+CD56
+CD4
+/CD8
+CD3
+CD4
+ - 0.14 0.42 0.49 0.25CD3
+CD8
+ - 0.00 -0.33 0.83*CD3
-CD19
+ - 0.68* 0.26CD3
-CD16
+CD56
+ - 0.60CD4
+/CD8
+ -*〆代表有顯著相關々p < .05 單位〆none
四 、 環 島 運 動 後 十 天 淋 巴 球 細 胞 亞 群 CD3+CD4+、 CD3+CD8+、 CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD4+/CD8+ ratio 值之相關性
本節主要是呈現受詴者在環島運動後十天淋巴球細胞亞群 CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD4+/CD8+ ratio 值之相關情形（如表 4-3-4 所示）。上述相關分析主要以 9 名 受詴者於四個時間點共 45 筆之數據進行相關統計，在α= .05 的條 件下，其顯著性臨界值為『.349』。所得數據經皮爾森積差相關分 析發現〆環島運動後 36 小時受詴者之 CD3+CD4+與 CD3+CD8+的相 關係數為 r = 0.96，達到統計上顯著水準（p < .05）。至於 CD4+/CD8+ ratio 值與 CD3+CD4+、CD3+CD8+的關係上，CD4+/CD8+ ratio 值與 CD3+CD4+、CD3+CD8+的相關係數分別為 r = -0.26、r = -0.50，皆 未達到統計上顯著水準（p > .05）。而其他各點間的相關性也未達 統計上顯著水準（p > .05）。
表 4-3-4 環島運動後 10 天淋巴球細胞亞群間之相關性
CD3
+CD4
+CD3
+CD8
+CD3
-CD19
+CD3
-CD16
+CD56
+CD4
+/CD8
+CD3
+CD4
+ - 0.96* 0.26 0.49 -0.26CD3
+CD8
+ - 0.31 0.40 -0.50CD3
-CD19
+ - 0.37 -0.17CD3
-CD16
+CD56
+ - 0.09CD4
+/CD8
+ -*〆代表有顯著相關々p < .05 單位〆none
第伍章 討論與結論
第一節 討論
一、環島運動對 T 淋巴細胞、B 細胞、NK 細胞比例的影響
本實驗受詴者進行連續七天之直排輪環島運動後，顯示直排
輪環島運動對於人體 T 淋巴細胞亞群比例會產生不同的影響。在 CD3+CD4+方面，於環島運動結束後立即發現其比例顯著低於環島 前，且在運動後 36 小時恢復期仍呈現持續下降，這表示歷經七天 的連續中高強度、長時間運動對 CD3+CD4+會有立即且持續性的影 響，在本實驗中，體內 CD3+CD4+比例在環島運動後明顯下降，且 會持續至恢復期 36 小時仍達顯著差異。本結果與 Malm & Ekblom
（2004）針對男性足球員在五天增強訓練營的研究結果類似，該研 究以 10 名年輕足球員為對象，安排連續五天的訓練課，強度約為 70~75%最大攝氧量，強度略高於原先的訓練々經過五天的增加強 度訓練後，於運動後約 18 小時採集血液作為後測，結果發現 CD3+CD4+有顯著的降低的現象。此外，Zang, Hu, & Wang（2007）
以 16 名男性足球選手為實驗對象，分別進行低住低練與高住低練 兩種不同訓練方式，分別於第 1、14、21、28 天早上進行血液採集，
觀察經過 28 天運動訓練過程免疫指標變化的情形。結果發現在 CD3+CD4+方面，第 14、21、28 的比例都較第 1 天為低，且在第 28 天達到顯著差異。因此我們可以知道，在經過數天至一個月的 運動或運動訓練後，CD3+CD4+會有立即而顯著的下降現象，且會 持續至恢復期 18~36 小時。
然而在單次運動中，大多文獻則指出，運動後立即可發現 CD3+CD4+上升的現象，在中強度運動後，多半能在運動後恢復期
4 小時內回復到運動前水準（Ronsen 等人, 2001々Natale 等人, 2003），而高強度運動需要恢復到運動前水準所需的時間則可能更 長（Steensberg 等人, 2001）。推測短期運動或運動訓練與單次運動 不同的結果，可能與在運動早期升高的兒茶酚胺（catecholamine）
濃度有關，兒茶酚胺濃度提升使各細胞族群有更大的流動性，在經 歷短期運動或運動訓練後，周邊血液細胞流動造成的改變將比單次 運動影響還要大（Natale 等人, 2003）。
在 CD3+CD8+方面，於環島結束後立即的採血點發現，其比例 有升高現象但未達顯著，且在環島結束後開始下降至恢復期 36 小 時，回復與環島前相同水準，這表示經歷連續數天長時間中高強度 運動，CD3+CD8+在運動後立即會有上升趨勢，且在運動後恢復期 36 小時即回復至運動前水準。本實驗 CD3+CD8+在環島後立即的採 血點發現有升高趨勢，與 Zang, Hu, Wang（2007）的研究結果相同，
該實驗以 16 名男性足球選手為觀察對象，進行低住低練與高住低 練兩種不同訓練方式，分別於第 1、14、21、28 天早上進行血液採 集，觀察經過 28 天運動訓練過程免疫指標變化的情形。結果發現 在 CD3+CD8+方面，第 14、21、28 的比例都較第 1 天為高，但也 未達顯著差異。作者同時指出在第 14、21、28 天導致 CD4+/CD8+ ratio 值降低的主要原因，是來自於 CD3+CD4+下降的變化量大於 CD3+CD8+上升的變化量，而造成 ratio 值降低。
在 CD3-CD19+（B 淋巴細胞）方面，本實驗之 CD3-CD19+比 例在環島運動後立即觀察比起環島前稍有降低現象，但未顯著，至 恢復期 36 小時則顯著低於環島前與環島後的數值，而再經過七天 休息後恢復至基準值水準。這表示身體經過連續數天長時間中高強 度運動後，CD3-CD19+的變化較為延遲，直至恢復期 36 小時才會
產生顯著下降的現象。本結果與 Malm & Ekblom（2004）針對男 性足球員在五天增強訓練營的研究結果類似，該研究以 10 名年輕
產生顯著下降的現象。本結果與 Malm & Ekblom（2004）針對男 性足球員在五天增強訓練營的研究結果類似，該研究以 10 名年輕