台灣有色雞群之血清學調查

自2002 年 11 月起至 2003 年 4 月止，一共調查了 16 群有色雞群，其中公母各半。血 液樣本大致分為兩個來源，其一是種雞場來源的雞隻抗凝血樣本，另外則為屠宰場來源之 抗凝血樣本。各群雞隻之基本資料詳見於Table 1.，其中病例 3068 於病雞剖檢時，在其肝 臟見有腫塊；病例3070 之母雞有產蛋率下降的情形；病例 3093 的雞隻則有蒼白、跛腳的

情形發生；病例3094 的公雞正常，剖檢也未見有異常，但是母雞則外觀蒼白，剖檢時發現

肝臟、脾臟腫大；病例3095 有跛腳情形，剖檢後見有肝脾腫大且有壞死點。本實驗所檢測

的有色雞品種包括安樂、珍珠雞、紅羽土雞等；採樣年齡主要針對12 週齡以上 ALV-J 抗體 陽轉的雞群 (Hunt et al., 2000)。利用 ALV-J 商業用酵素連結免疫吸附套組 (Enzyme-linked immunosorbent assay kit, ELISA kit, IDEXX, Westbook, Maine) 調查台灣北部 4 群雞群、中部 10 群雞群、南部 2 群雞群 ALV-J 抗體分佈情形，以了解 ALV-J 在台灣土雞發生情形。調查 結果發現北部雞群100% (4/4) 為抗體陽性，中部雞群則 80% (8/10) 為抗體陽性，南部雞群 則 0% (0/2) 為抗體陽性；其中公雞群與母雞群抗體陽性比率分別為 75% (6/8) 和 75%

(6/8)，兩者並沒有差異；種用雞群與肉用雞群的抗體陽性比率分別為 100% (10/10) 和 33.3%

(2/6)，種雞群抗體陽性比率較肉雞群為高。各雞群之抗 gp85 抗體之陽性率詳列於 Table 1.。

2004 年 2 月至 2004 年 4 月再次針對屠宰場來源雞隻進行 ALV-J 抗體檢測，一共調查 40 群有色雞，其中公雞 20 群，母雞 20 群。其中公雞群 15% (3/ 20)為抗體陽性，母雞群則 10 % (2/ 20) 為抗體陽性。抗體陽性率由 0%到 14.29%，結果詳見 Table 2.。

5.2 2002 年至 2004 年肉雞、蛋種雞與有色雞種雞之家禽白血病 J 亞群病毒分離情形 由2002 年至 2004 年一共自 11 個肉雞病例、8 個有色雞病例及 2 個蛋種雞病例分離出 家禽白血病J 亞群病毒，各病例之統整比較見 Table 4.，另詳述如下:

病例 3062 為 2002 年 11 月為台中縣一肉種雞場送檢病例，其雞隻品系為愛拔益加 (Arbor Acres, AA)，飼養雞隻總數為 2600 隻，送檢時為 16 週齡，平均每天死亡或淘汰 5 至 6 隻雞隻。其雞隻採開放式飼養，據雞場獸醫師表示此批雞隻自 2002 年 8 月入雛，雞隻 10

週齡時解剖發現胸骨中央有白色腫瘤，自14 週齡起雞隻死亡數量開始增加，雞隻除了瘦弱

外，也有明顯蒼白，骨髓顏色變淡，其他無明顯病灶。此批雞隻也曾抽血送大成公司檢測 雞傳染性貧血 (CIA)，此外同一雞場其他品種雞隻 (Avian) 也有相同問題，唯發病週齡愈 來愈早，損失的雞隻一批比一批多。此批雞隻於剖檢時見有腺胃及十二指腸有卡他樣滲出 液、腎臟萎縮褪色且有尿酸鹽沉積、肝臟亦有萎縮褪色、脾臟萎縮、胰臟萎縮、皮下有滲

出液、肌肉呈煮肉樣、骨骼脆弱、骨髓呈桃色。其送檢樣本為10 個公雞抗凝血液樣本，將

血漿同時以商用酵素連結免疫吸附分析套組檢測家禽白血病GSA (p27)抗原，以及進行病毒 分離工作。在ELISA 檢測 GSA (p27)抗原部份，10 個血漿樣本中有 5 個為抗原陽性 (5/ 10) ； 病毒分離部分每2 各血漿樣本 pool 成 1 個樣本進行病毒分離，經兩次繼代後成功分離出 1 株家禽白血病J 亞群病毒。

病例 3067、3068、3069 及 3070 為 2003 年 1 月，由苗栗同一飼主所送檢之病例。其 中3067 為安樂品系 10 週齡之種公雞，一共飼養 60 隻，以籠飼方式飼養，此次發病共淘汰 掉10% (6/ 60) 雞隻，據雞場主人表示雞隻主要發生跛腳為主，先腳弱而衰弱，最後死亡。

3068 則同為安樂品系 10 週齡之種母雞，總飼養隻數為 1800 隻，部份母雞採平飼，部份採

籠飼，平飼部分母雞有跛腳的情形，此次發病一共淘汰掉22% (400/ 1800) 雞隻，週死亡率 約2.2%，此批雞隻同樣發生軟腳、衰弱死亡的情形，另外雞場主人亦表示此批雞隻於 5 週 齡剖檢時，於肝臟見有腫瘤。3069 為 69 週齡之公珍珠雞種雞，一共飼養 100 隻，採籠飼，

此次發病淘汰掉10% (10/ 100) 雞隻，且其後代品質差，有千分之 3 至 5 的後代有跛腳，7 至8 週齡的大雞咳嗽不易治癒。3070 為 69 週齡之母珍珠雞種雞，一共飼養 4800 隻，採籠 飼，此次發病淘汰掉6.25% (300/ 4800) 雞隻，其週死亡率約 0.09%，此批雞隻發生產蛋率 下降 (自 70%產蛋率降至 50%)，其後代品質不佳，尤其初產仔雞淘汰率達 15%，此後跛腳 雞隻很多，到7 至 8 週齡時，一有咳嗽就治不好。3067 共送檢 15 個抗凝血液樣本，其中 10 個為外觀正常之公雞，5 個為跛腳雞隻來源；3068 共送檢 60 個抗凝血樣本，其中 40 個 為採籠飼正常母雞隻樣本，20 個為採平飼且發生跛腳之母雞樣本；3069 則有 17 個抗凝血 樣本；3070 則為來自同一雞場 A、B、C 三區各 20 各抗凝血樣本。以商用酵素連結免疫吸 附分析套組檢測家禽白血病GSA (p27)抗原及家禽白血病 J 亞群特異性抗體結果見 Table 5.

及Table 6.，由抗原檢測結果看來有無跛腳或是不同棟別並無太大的差異。接著取 GSA (p27) 抗原 ELISA 檢測結果 OD 值最高者之血漿進行 RT-PCR 檢測，結果 3067 與 3068 為 H5/ H7 陽性，3069 與 3070 為 H5/ H7 陰性。雖然同時進行病毒分離，但未分離出病毒。

3102 與 3104 為 2003 年 10 月自宜蘭同一肉種雞場送檢之病例，3102 為艾維茵 (Avian) 品系，31 週齡雞隻，剖檢 3 隻雞隻於其中 2 隻見有腹膜炎，並於腸繫膜上見有脂肪結節；

3104 為愛拔益加品系(Arbor Acres)，22 週齡雞隻，據雞場主人表示此批雞隻共有 18520 隻，

每日淘汰率約為0.16%。3102 一共送檢 2 個公雞血液樣本及 2 個母雞血液樣本，以及公雞 與母雞組織樣本各1 個，共 6 各樣本；3104 則送檢 2 個母雞組織樣本。結果自 3102 中 3 個公雞樣本分離出 3 株家禽白血病 J 亞群病毒，自 3 個母雞樣本分離出 2 株家禽白血病 J 亞群病毒；3104 則自 2 個樣本中分離出 1 株家禽白血病 J 亞群病毒。

3106、3107 與 3108 為 2003 年 10 月台中同一雞場送檢之病例。3106 為 5 個珍珠雞血 液樣本，3107 為 10 個公仿鬥雞血液樣本，3108 為 25 個母仿鬥雞血液樣本。據雞場主人表 示此批14 週齡雞隻共 5000 隻，分為 6 棟於荔枝園內開放飼養，於 8 月初開始發病，期間 死亡約1500 隻，淘汰率為 30% (1500/ 5000)，主要見到的臨床症狀為削瘦、營養狀況不佳、

精神萎靡。剖檢4 隻削瘦雞隻中，2 隻見有肝臟腫大 (2/ 4) 且表面有乾酪樣滲出物與胸壁 腹膜粘連 (2/ 4)，腹膜與小腸的漿膜呈現混濁有黃色肥厚的纖維素被覆(2/ 4)，其他器官則 無可視之病變。將3106 的 5 個樣本、3107 的 10 個樣本、3108 的 25 個樣本進行病毒分離。

接著以商用酵素連結免疫吸附分析套組檢測第一代病毒分離之細胞上清液中之家禽白血病 GSA (p27)抗原時，發現 3106 的 5 個樣本皆為陰性 (0/ 5)；3107 的 10 個樣本中有 1 個為抗 原陽性 (1/ 10)；3108 中的 5 個樣本中有一個為抗原陽性 (1/ 5)，剩下的 20 個病毒分離樣 本則以RT-PCR 檢測，結果有 5 個樣本為 RT-PCR H5/ H7 陽性 (5/ 20)，經第 2 次病毒分離 後，3106 未分離出家禽白血病 J 亞群病毒 (0/ 5)；3107 則分離出 1 株家禽白血病 J 亞群病 毒 (1/ 10)；3108 也分離出 1 株家禽白血病 J 亞群病毒 (1/ 25)。

3114 為 2003 年 10 月新竹 KI 公司所送檢的病例，此批雞隻為育種用雞群，包括愛拔 益加 (Arbor Acres) 品系白肉雞與購自肉雞場之台灣北部大型土雞，少部分為進口土雞，共 送檢80 個血液樣本，其中 16 個為白肉雞血清，64 個為土雞血清，有部分血清形成不良，

雞隻年齡為7 週齡至 14 週齡。由於雞隻並未發病只是一般送檢，且血清樣本已經過一段時 間冷藏不適合進行病毒分離，因此只進行ALV GSA (p27) 抗原檢測，檢測結果詳見 Table 7.。

不同週齡之血液樣本各取GSA (p27) 抗原 ELISA 吸光值最高之 2 個樣本進一步萃取 DNA，

以primer H5/ H7 進行 PCR 檢測，結果 12 週齡的 2 個樣本皆為 H5/ H7 陽性，其餘皆為陰 性。因此進一步將H5/ H7 陽性之樣本以 ev1/ ev2 (阮, 2000)，增幅出 3114 provirus 之 gp85 基因片段，並以yT & A TA cloning kit 將此片段選殖出來並定序。

3118、3120 為 2003 年 11 月宜蘭同一肉種雞場送檢之病例。3118 為艾維茵 (Avian) 品 系，39 週齡肉種雞，一共送檢 2 個公雞臟器乳劑與 1 個母雞 (自公雞群抓出) 臟器乳劑；

3120 同樣為艾維茵 (Avian) 品系，39 週齡肉種雞，僅送 1 個母雞臟器檢測。經 2 代病毒分 離後自3118 的 2 個公雞臟器乳劑中各分離出 1 株家禽白血病 J 亞群病毒 (2/ 3)；3120 則未 分離出病毒。

3121、3122、3123、3124、3125 與 3126 為 2003 年 11 月宜蘭同一肉種雞場送檢之病 例。其中3121、3122 與 3123 分別為 10 週齡、30 週龄以及 60 週齡之愛拔益加 (Arbor Acres) 品系隻肉種雞；3124、3125 與 3126 則分別為 10 週齡、39 週龄以及 63 週齡之艾維茵 (Avian) 品系隻肉種雞。分別以商用酵素連結免疫吸附分析套組 (Enzyme-linked immunosorbent assay kit, ELISA kit, IDEXX, Westbook, U.S.A.) 檢測家禽白血病 GSA (p27)抗原及家禽白血 病J 亞群特異性抗體。其中 3125 及 3126 進ㄧ步進行病毒分離，經 2 次病毒分離後，自 3125 的5 個公雞血液中分離出 2 株家禽白血病 J 亞群病毒 (2/ 5)，並自 8 個母雞血液樣本中分離 出1 株家禽白血病 J 亞群病毒 (1/ 8)，3126 則未分離出病毒 (公：0/5，母：0/8)。

病例3150 為 2003 年 12 月由新竹送檢之病例。此病例為 16 週齡之母鬥雞，飼養總數 為3000 隻，採平飼，自 8 到 9 週齡開始發病，每日死亡 7 到 8 隻，雞隻生長發育參差不齊 且見有精神沉鬱，臨床上見有灰白色軟便、雞隻削瘦、有逆毛嗜睡狀況、肉冠呈貧血狀，

剖檢時於肺臟見有結節，消化器官見有寄生蟲，腎臟見有結節及尿酸鹽沉積，肝臟及脾臟 亦見有腫大與結節，另外在心臟也見有結節，華氏囊有腫大的情形。自心、肝、脾釣菌培 養於Blood agar 並未分離出有意義的細菌。3150 共送檢一個新鮮組織乳劑 (由多隻雞隻臟 器混合製成)，以及 11 個血清樣本，由於此批血清樣本存放於 4℃下約 1 個月，且已見有溶

血的情形，故僅以唯一的組織乳劑樣本進行病毒分離，血清樣本則以自行塗鍍兔子抗GSA

(p27) 抗原抗血清之 ELISA 平盤檢測樣本中之抗原。在進行病毒分離前先抽取臟器 DNA 進 行PCR 檢測，結果發現為家禽白血病 J 亞群病毒陽性 (H5/ H7 陽性) 且為家禽白血病 A 亞 群病毒陽性 (PA1/ PA2 陽性)；同時也以馬立克病毒的引子 MD1r/ MD1f (Zhu et al., 1992) 進行PCR 檢測，結果為陰性。另外血清樣本經 ELISA 檢測後發現有 10 個血清樣本 GSA (p27) 抗原陽性 (10/ 11)。而組織乳劑樣本經 2 次病毒分離後，僅自樣本中分離出 1 株家禽白血病 J 亞群病毒而無家禽白血病 A 亞群病毒。

病例 3156 及 3157 為 2004 年 1 月，台中同一蛋種雞場前後送檢病例，此批雞隻為羅 曼品系(Lohmann)，共 8500 隻，137 日齡，依雞場主人表示，該場蛋種雞先前均由德國進 口，現因德國為高病原性禽流感疫區而改由西班牙輸入，此批雞隻從輸入後，雛雞明顯發 育不良且大腸桿菌感染嚴重，僅有85%育成率，自 120 日齡起雞隻陸續發生死亡，雞群飼 料攝取量下降 (80 克/ 隻)，平均每隻少 20 克，且有產蛋上升率減緩的趨勢，每日約死亡 10 隻，經剖檢見有肝臟腫大、腫瘍及脾臟腫大。臟器經組織切片檢查後，於肝臟見有骨髓

球細胞的浸潤。為進一步做馬立克病與家禽白血病之鑑別診斷，於是萃取臟器 DNA 進行

球細胞的浸潤。為進一步做馬立克病與家禽白血病之鑑別診斷，於是萃取臟器 DNA 進行