(1) 野外棲地資料收集
本實驗的野外調查樣區選在斗六丘陵地一帶,湖山水庫保護區周 邊。當地在先前的紀錄中顯示麗紋石龍子與印度蜓蜥在此地區有穩定 的族群分布(林等未發表)。我預期麗紋石龍子的棲地利用傾向較開 闊的林外道路甚至住家環境周邊,而印度則偏好林下的蔽鬱環境。因 此,野外的樣區選擇包含竹林內(woody, W)與竹林外的道路(road, R),兩種不同類型的大環境。樣區在2009年的8~9月選定3個,2010 年的4月選定5個,總共8組樣區進行資料收集。
為釐清在大尺度棲地分布上兩物種的差異,因此在 8 組樣區中皆 設置可紀錄環境溫度,溼度與光照度之環境資料連續記錄器(data logger) (UA-002-64, U23-001, HOBO®)。該 data logger 可以持續 紀錄該環境中上述之物理因子,本實驗設定每五分鐘紀錄一次環境資 料,持續紀錄九月中至十月中的野外資料。
此外,在上述 8 組野外樣區,設定等長穿越線進行調查,以穿越 線的方式記錄兩種石龍子在不同類型環境中的分布狀況。調查時以穩 定步伐走一百公尺之穿越線。
(2)微棲地資料收集
本實驗同樣也紀錄野外環境中兩種石龍子微棲地的物理資料。在 8 組野外樣區進行穿越線進行調查時,同時紀錄觀察到之麗紋石龍子 與印度蜓蜥個體出現的時間點,並以數字式溫濕度計(TES-1360)紀 錄該地點之環境溫度、溼度,以代表微棲地之物理資料。
調查於 2009 年夏末(八月初至九月中旬)以及 2010 年春季(3 月中至四月中旬)進行,每日調查時間由 9:30 ~ 2:00PM,調查樣區 的順序則為逢機,以避免因調查時間差造成統計結果的誤差。
(3)水分散失(EWL)速率測量
前人研究測量有鱗目爬蟲類的方法中,很多以單位時間內密閉容 器中體重損失量作為水分散失量(Dml'el et al., 1997; Lillywhite, 1993;
Winne, 2001),本研究欲採取同樣的測量方法。然若實驗中受測個體 的活動狀態不同時,很有可能因呼吸量的差異,造成無法標準化不同
物種之間 EWL 的差異。因此在多數的研究中都強調,測量水分散失 實驗時,需藉由麻醉劑來使個體的活動狀態一致,以降低因個體活動 量不同而造成水分由呼吸道散失時的差異(Heatwole & Veron, 1977;
Zucker, 1980)。本實驗測量之方法亦參考前人之研究,在測量前使 用吸入式麻醉劑 isoflurane,使個體進入鎮靜之狀態。此處的鎮靜狀 態,係指給予按壓後腳趾的刺激仍有反射動作,但個體已無力活動身 體。
麻醉藥isoflurane是普遍使用於人類與馴養動物的吸入式麻醉藥 物,也常使用於其他動物手術;該麻劑主要可由肺部直接代謝,少量 由肝臟代謝。且並不會造成動物任何後遺症,該藥劑對於心肺速率的 影響也甚小(Hernandez-Divers, 2005)。藥品isoflurane由氣化器混合 純氧後,由實驗動物的肺部吸入。由於本實驗物種較小,因此isoflurane 的濃度在4%以下即可使個體達到鎮靜之狀態。
實驗開始前,將實驗個體由飼養箱中取出;以手對腹部施加壓力 促使個體排泄,並用面紙將個體表皮拭乾後放入一密閉容器中進行麻 醉。麗紋石龍子與印度蜓蜥成體使用4% isoflurane,所有幼體則使用 濃度2% isoflurane進行15分鐘的麻醉。雖然進入鎮靜的時間有些許差 異,但所有的個體在15分鐘後皆可以進入鎮靜狀態。確認樣本進入鎮
靜後,即可將麻醉後的個體取出,放置在測量箱中的微量天秤上測 量。因風速也是影響生物體表水分散失速率之關鍵因子之一(Foley &
Spotila,1978; Waldschmidt & Porter, 1987),故本實驗從開始測量到結 束都在25㎝*30㎝*40㎝的閉容器中進行,已排除任何風速流動造成實 驗誤差的可能。
測量 EWL 時,先於箱內的微量天秤上放置承裝蜥蜴的鐵網後歸 零,使用網狀的容器是確保實驗個體可由身體的所有表皮散失水分,
而不會因姿勢或其他因素影響實驗結果(Neilson, 2002; Perry et al., 1999)。靜置天秤 5 分鐘確認穩定後,再放上待測個體開始紀錄。記 錄實驗個體在一小時三十分鐘內體重減少的狀況。期間每五分鐘記錄 一次重量變化,同時記錄箱內溫溼度以及實驗個體於網內的狀態,以 避免過度的麻醉或脫水造成個體死亡。實驗中不給予其他之刺激與任 何外在干擾,並維持箱內 25 ℃的穩定溫度,以排除溫度對於 EWL 率的影響;並在容器中放置乾燥劑(SiO2)使箱內環境維持較低的相 對溼度(45±1%)。
實驗期間重量的變化即視為水分散失的量。若個體於實驗中排 泄,或在紀錄結束前醒來則實驗終止,且該實驗數據不作為後續分析 之用。每隻個體不重複測量。實驗結束後放回原飼養箱,於隔日放回
原採集地。