實驗步驟

3.4.1 高頻超音波導入實驗步驟

本研究之實驗步驟，首先由整個導入實驗架設建立起。包括豬皮組織 的取得、擴散槽與溶液之配置等，透過以下描述逐一介紹。

從市場取得新鮮豬耳朵，清洗之後觀察豬耳背部分，避開有明顯的受 傷部位，接著將豬耳朵背部，以 10 號與 20 號之解剖刀與解剖剪，謹慎的 將肌肉與結締組織去除後，取得豬耳背之表皮部分以作為實驗用。

選取改良式玻璃製擴散池，如圖 3.23 所示。上槽部分，高 38.5 mm，

通透孔徑之直徑為 22 mm；下槽部分，高 53.5 mm，通透孔徑之直徑為 22 mm，分內、外膽，內膽裝有經通透後之維他命 C 溶液，外膽則為冷卻水系 統，是為了維持整個導入系統能保持恒溫。其中內膽部分有一內插管，利 於不同時間點抽取下槽之維他命 C 之溶液。

將下槽（Receptor Cell）以 pH 7.4 緩衝液注入 20 ml，放入磁石攪拌子，

用以接受經過超音波導入後之維他命 C 溶液，同時可以均勻攪拌。接著將 豬皮角質層面向上，覆在下槽上方，再將上槽安裝上去之後，以燕尾夾固 定整組裝置。隨後將上槽注入 16 ml 的 8.5 mM 維他命 C，做為導入之藥品。

而維他命 C 溶液在 8.5 mM 的濃度下，是最穩定不易變質的濃度，因此本 實驗採用此濃度來進行導入溶液的濃度。但在實驗進行中，需注意光線照

射問題，由於光線及熱容易讓維他命 C 變質，導致整組實驗不穩定，故必 須在暗室進行此實驗。

將冷卻系統之冷卻水、循環系統連接至改良式玻璃製擴散池，並啟動 冷卻水循環與單點磁石攪拌機。將超音波探頭置於上槽溶液處，使探頭表 面距豬皮耳背組織 15 mm，激發超音波，溫度控制在 18°C。接著將功率週 期設定為 1：9，分別以不同聲強分別激發超音波，至此超音波導入系統架 設完成。在不同時間點取樣，所得之樣本迅速送入-20°C 之溫度儲存，以 便之後送至 HPLC 進行濃度檢測。

評估超音波熱療機導入之流程，乃是將超音波熱療機探頭連接至超音 波熱療機，並將探頭置於上槽溶液處，使探頭表面距豬皮耳背組織 15 mm，

啟動超音波熱療機，溫度控制在 18°C。接著將超音波熱療機設定在 1 MHz，功率週期 1：9，分別以聲強為 2.22 W/cm²、1.48 W/cm²、0.76 W/cm² 激發超音波；再設定至 3 MHz，聲強設定為 1.53 W/cm²、1.02 W/cm²、0.51 W/cm²，至此超音波導入系統架設完成，如圖 3.24 所示。第 1 部分為激發 超音波之熱療機主體；第 2 部分為擴散池之上槽；第 3 部分為擴散池之下 槽；第 4 部分為磁性攪拌器；第 5 部分為水循環系統；第 6 部分為冷卻池，

是為了維持溶液恆定的溫度，以避免超音波熱效應干擾實驗結果。本實驗 之溫度維持在 20±1℃。一次完整實驗歷時 1 個小時，每 15 分鐘取擴散池 下槽之緩衝液 1 ml，並再補充 1 ml 之 pH 7.4 緩衝液，以之量測經超音波導

入豬皮後之維他命 C 濃度。將所取之緩衝液置於褐色之離心管，並置於-20

°C 下保存。之後將所得之下槽溶液，送入高效能液相層析儀進行維他命 C 濃度定性檢測。

3.4.2 低頻超音波導入實驗步驟

實驗流程與高頻超音波導入相同，只有在激發超音波聲源上，略有不 同。在低頻超音波導入實驗中，乃是將聲源改為 10、20 與 60 kHz 的探頭，

並經由函數產生器 HP 33120A 分別調制 10，20 與 60 kHz 產生的正弦波來 激發相對應頻率之探頭。其中 10 kHz 是低於本研究所計算之空孔共振頻率 區間之頻率；20 kHz 是符合空孔共振頻率區的頻率；60 kHz 則是高於空孔 共振頻率區的頻率。接下來使用 1.9 mW/cm²與 13.6 mW/cm²做為激發的聲 強，照射 15 分鐘之後，取改良式擴散池之上槽與下槽溶液，送至高效能液 相層析儀進行維他命 C 濃度之定性分析。此一實驗乃是探討頻率與聲強這 兩個參數對於超音波導入之影響。