第四章 材料與方法
4.1 實驗設備與材料
1.
恆溫室〆大小約為5坪，溫度控制在24 ± l ˚C，藻類培養、毒性詴驗與48小時 後的分析，皆於此進行。2.
無菌操作臺〆內設有紫外光殺菌，防止植種過程中受到污染。3.
純水設備〆包括四道濾心過濾（0.5 μm）、離子交換、蒸餾（Aquatron A4S, Bibly），蒸餾水儲水桶（60 L container, Nalgene）々去離子水製造機（Milli-Q Plus, Millipore, outflow conductivity 18.2 MΩ-cm），水質之電阻值控制在18.2 Mega-ohm (MΩ-cm)。
4.
抽氣泵浦〆SINKU KIKO公司，型號ULVACG-5及G-50。用於過濾營養基質 及 ISOTON II之用。5.
電子顆粒計數器〆量測藻類細胞數。使用CoulterElectronincs公司之Coulter Counter，型號MULTISIZER II，並以5.06 μm標準顆粒乳液來校正。本實驗使 用100μm 孔徑之玻璃管，量測之顆粒直徑範圍為2～60 μm。6.
光度測定計〆使用TOPCON廠牌，型號IM-2D，單位為Lux。7.
pH測定儀〆購自Suntex，型號為Model SP-2200。其精確度為± 0.01。8.
冰箱〆使用Whirpool之冰箱，將藻種及營養鹽於4 ˚C之下保存。9.
滅菌釜〆HIRAYAMA公司，型號HA-300M之滅菌釜，最大壓力可達1.9 kg/cm2， 容積為0.0521 m3。使用時設定溫度121 ˚C、壓力l.l kg/cm2滅菌15分鐘。10.
烘箱〆廠牌為Memmet，烘乾玻璃器皿用。使用溫度設為52 ± 1 ˚C。11.
分析天秤〆廠牌Precisa 205A，精確度至0.01 mg。12.
定量吸管〆使用SOCOREX之可調式移液器，容量為100～1000 μl及0.1～5 ml 兩種。以及NICHIRO，Nichipet EX，20～200 μL、10～100 μL 以及2～20 μL 等3種。27
13.
濾膜〆廠牌Advantec Toyo Kaisha，過濾營養基質使用型號A045G047A（孔徑 0.45 μm）、過濾Isoton II時使用型號A020G047A（孔徑0.2 μm）之濾膜。 批次式培養藻類
14.
批次式培養裝置〆培養裝置為自行裝配，長、寬、高為135× 110×135 cm，頂 面裝有120 cm 長之白色螢光燈管8支。迴轉式振盪儀(EIRSTEK, model: S103)，搖動速度可大於100 rpm。
15.
批次式培養器皿〆批次式培養藻時所使用之容器為125 mL之三角錐瓶。16.
紗布〆藻類培養時，使用消毒紗布覆蓋在三角錐瓶瓶口，防止異物進入。 連續式培養藻類
17.
連續式培養母槽〆體積5公升、直徑18 cm之玻璃容器。於體積4公升處開口做 為溢流口，並且於體積2公升處開一口做為取樣之用。母槽上方亦有兩開口，分別為營養基質流入口及空氣進流口。
18.
基質儲存瓶〆容量約為5公升，直徑為25公分大小的血清瓶。用來存放培養母 槽之連續入流基質々使用前需以蒸餾水清洗及已滅菌釜滅菌。19.
蠕動泵浦〆EYELA公司，型號MP-1000，用以控制供應母槽之流量。20.
泵浦管〆廠牌Materflex，型號H-96400-14。輸送管為矽膠材質，不具毒性，可避免影響母槽之培養及毒性詴驗之結果。
21.
曝氣泵浦〆使用之曝氣泵浦為一般水族使用之曝氣幫浦。22.
浮子流量計〆量測曝氣流量，本實驗將曝器量控制在400 mL/min。23.
空氣洗滌器〆去除曝氣氣體中的雜質，並濕潤氣體，增加氣體之溶解。24.
電磁攪拌器〆放置於連續式培養母槽之下方，使藻液與進流之營養基質、空氣混合均勻，避免藻類之沉澱。
BOD瓶毒性詴驗
25.
BOD瓶〆為毒性詴驗時使用之玻璃器皿。使用體積300 mL，直徑8 cm，上頭28
開口處有玻璃瓶塞，使其可以利用水封之形式，避免外界氣體、物質等進入，
而減少干擾，使整個系統為一個封閉式系統。
26.
溶氧測定儀〆美國YSI公司出品之微電腦溶氧測定儀，Model YSI5100，附有 溶氧測定探頭（BOD probe），其探頭部分裝有電動攪拌器，可以對樣品進 行攪拌。溶氧量測定範圍為0.0～60.0 mg/L，精確度為± 0.1%。27.
氣體鋼瓶〆購於洽隆，含0.5% CO2、99.5% N2之高壓氣體鋼瓶，氣體體積為6 m3。用於降低營養基質中之溶氧值，並確保能提供足夠之碳源。28.
曝氣桶〆使用體積10公升之純水桶。開口處嵌入一矽膠塞，一頭接氣體鋼瓶，一頭接沸石並伸入桶底部曝氣，於桶開口處附近開一小洞以帄衡壓力，曝氣 完成後關緊桶蓋以減少外界空氣之進入。
29.
詴驗毒物〆六種丙烯酸酯類及九種甲基丙烯酸酯類，其中文名稱、廠牌、純度及供應商等資訊如 Table 4.1.1 所示。
30.
總有機碳分析儀（TOC）〆購自台灣耶拿公司，型號 Multi N/C 3100，用以定 量配置好之毒物儲備液濃度。 化學物與還原態GSH之反應性詴驗
31.
藥品〆反應性詴驗所需藥品之資訊及用途如 Table 4.1.2 所示。32.
樣品瓶〆為反應性詴驗時使用之玻璃瓶，容積 20 mL。33.
分光光度計〆廠牌 HITACHI、型號 U3010 之紫外－可見光分光光譜儀。29
Table 4.1.1 Supplier, purity, and manufacturer of toxicants in this study
詴驗毒物 中文名稱 廠牌 純度 供應商
Tetrahydrofurfuryl methacrylate 甲基丙烯酸四氫呋喃酯 Alfa aesar 97% 景明
Benzyl methacrylate 甲基丙烯酸苯基酯 TCI 98% 景明
Table 4.1.2 Chemicals for reactivity test（imformation and usage）
英文名稱 中文名稱 CAS 廠牌 純度 供應商 用途
Glutathione, reduced (GSH)
hydrogen phosphate
無 水 磷 酸
氫二鈉 7558-79-4 J.T.Baker >99% 友和 緩衝溶液 Potassium phosphate,
monobasic
磷 酸 二 氫
鉀 7778-77-0 J.T.Baker >99% 友和 緩衝溶液 EDTA, disodium salt 乙 二 胺 三
醋酸鈉鹽 6381-92-6 J.T.Baker >99% 友和 抗氧化劑
30