實驗大鼠中樞投予vehicle 或 ERK 磷酸化抑制劑 PD98059,
再經過高台曝露處理後,立即給予五分鐘強迫游泳測試,同時 錄影觀察記錄大鼠在水中不掙扎的情形,累計後進行分析。分 析結果發現各組不掙扎、不游動則佔總時間的百分比分別為:
control-vehicle 組佔總時間之 6%。 DEX-vehicle 組佔總時間之 31%,而 control-PD98059 組佔總時間之 6%, DEX-PD98059 組 佔 總 時 間 之 5% ( 圖 十 二 ) 。 比 較 control-vehicle 組 與 control-PD98059 組,兩組在統計上並無顯著差異,顯示中樞投 予 PD98059 不會影響動物之正常行為表現。比較 DEX -vehicle 組與 control-vehicle 組以及 control- PD98059 組,在統計上均 有顯著的差異 ( p<0.05,p<0.05 ),其結果與實驗 3-1 結果相符,
顯示 DEX 組老鼠面對急性壓力時會產生類憂鬱的傾向。比較 DEX-vehicle 組與 DEX-PD98059 組,結果顯示 DEX-vehicle 組 顯著高於 DEX-PD98059 組 ( p<0.05 ),亦即投予 PD98059 能 使 DEX 的老鼠類憂鬱傾向下降。且 DEX-PD98059 組相較投予 vehicle 或 PD98059 之 control 大鼠,均無顯著差異。
實驗結果 6-2、中樞投予 PD98059,於行為測試後杏仁核內 ERK1/2 蛋白質表現量分析結果:(圖十三)
實驗大鼠中樞投予vehicle 或 ERK 磷酸化抑制劑 PD98059,
經過高台曝露處理後立即給予五分鐘強迫游泳測試,測定藥物 對類憂鬱傾向之強迫游泳行為表現是否造成影響。並利用西方 墨點法分析杏仁核中ERK 之磷酸化表現,以探討 ERK 磷酸化 抑制劑 PD98059 對大鼠杏仁核中 ERK 磷酸化表現量的影響。
其結果顯示 DEX -vehicle 組之 ERK1 磷酸化表現量(p-p44)佔 總量之比例顯著的高於control-vehicle 組 (與實驗結果 3-2 相符)、
control-PD98059 組及 DEX-PD98059 組 ( p<0.05, p<0.01,
p<0.05 )。DEX -vehicle 組之 ERK2 磷酸化表現量 (p-p42)佔總
量之比例顯著的高於control-vehicle 組 (與實驗結果 3-2 相符)、
control -PD98059 組及 DEX-PD98059 組 ( p<0.05, p<0.05,
p<0.05 )。control-vehicle 組與 control-PD98059 組、DEX-PD98059
組之 ERK1 磷酸化表現量 (p-p44)佔總量之比例無顯著差異,
而 p-ERK2 (p-p42)也無顯著差異,顯示投予 PD98059 能抑制 DEX 組之大鼠面對急性壓力時杏仁核中 ERK 之磷酸化異常升 高的情況。
實驗 7、周邊投予 ERK 磷酸化抑制劑 bumetanide 對新生 期投予 DEX 之大鼠之影響
實驗目的:
由實驗5-2 之結果顯示,在胞外電生理實驗中使用 ERK 磷 酸化抑制劑 bumetanide 會影響 LTP 形成後神經電訊號的強度。
本實驗欲更進一步了解周邊投予 bumetanide 是否能顯著的改 善新生期投予 DEX 之大鼠類憂鬱行為表現。
實驗流程:
大鼠出生後被分為兩組:
Control 組:皮下注射生理食鹽水。
DEX 組:皮下注射方式,遞減投予 DEX。
利用皮下注射,在大鼠出後前三天 ( P1~P3 ) 對照臨床用 藥連續給予 DEX 組遞減劑量的藥物 ( P1:0.5 mg/mL;P2:0.3 mg/mL;P3:0.1 mg/mL ),而 control 組給予等體積生理食鹽水。
待其成長八週即可進行行為實驗。
行為測試第一天給予15 分鐘強迫游泳訓練。行為測試第二 天,於行為實驗開始時,將動物分成四組分別進行投藥:
Control-vehicle 組:新生期投予 saline 之大鼠,周邊投 予saline 15 mg/kg
DEX-vehicle 組:新生期投予 DEX 之大鼠,周邊投 予saline 15 mg/kg
Control-bumetanide 組:新生期投予 saline 之大鼠,周邊投 予bumetanide 15 mg/kg
DEX- bumetanide 組:新生期投予 DEX 之大鼠,周邊投
實驗結果 7、周邊投予 bumetanide,並以高台壓力處理後,
分比分別為:control-vehicle 組佔總時間之 11%。 DEX-vehicle 組佔總時間之36%,而 control-bumetanide 組佔總時間之 21%,DEX-bumetanide 組 佔 總 時 間 之 31% ( 圖 十 四 ) 。 比 較 control-vehicle 組與 DEX-vehicle 組及 DEX-bumetanide 組,在統 計 上 均 有 顯 著 差 異 ( p<0.05 , p<0.05 ) , 顯 示 周 邊 投 予 bumetanide 無法使 DEX 組之大鼠動物回復正常行為表現。再 比 較 DEX-vehicle 組 與 control-bumetanide 組 及 DEX-bumetanide 組,在統計上均無顯著差異,顯示周邊投予 bumetanide 可能會使 control 組行為表現出現異常。雖然比較 control-vehicle 組與 control-bumetanide 組,在統計上並無差異,
但從圖十四中可以觀察到 control-bumetanide 組不游動的時間 佔總時間之百分比有升高的趨勢。因此在無法排除 bumetanide 是否會對老鼠的運動功能產生不良影響的情況下,也無法推測