一、 實驗材料:
(螢光顯微鏡型號:Nikon Eclipse E200 拍攝 )
圖 1.為功能藍菌及其在紫外光下的螢光反應(魚腥藍菌
Anabaena sp.
) 二、 實驗器材:1. 攜帶型 pH 值計(pH meter)
2. HACH DR/2010 分光光度計
圖 2. HACH DR/2010 分光光度計
0.2 μ m
0.2 μ m
表 1.DR/2010 分光光度計~典型的操作程序步驟
3. Gastec GV-100 檢知器(GASTEC Corporation , Japan)
圖 3.檢知器介紹圖
圖 4.檢知器細部分解圖
上圖為檢知器細部分解圖,內部含有一單向活圔以及逆止 閥,防止空氣回流,當抽取空氣時,內部呈現負壓狀態,使得 空氣經由檢知管流入管中,當空氣進入檢知管之後,檢知管會 產生化學反應產生變色,檢視變色範圍來測得所欲偵測目標的 氣體濃度。
4. Gastec 系列空氣檢知管:
依照所偵測的氣體以及濃度,選用不同型號的檢知管來搭配。
表 2.本實驗所需要用到的檢知管型號
型號 檢測類別 檢測濃度範圍
3L ammonia 0.5 to 78 ppm 3La ammonia 2.5 to 200 ppm 4HM hydrogen sulfide 25 to 1600 ppm 4L hydrogen sulfide 1 to 240 ppm 4LT hydrogen sulfide 0.1 to 4.0 ppm 60 phenol 0.4 to 187 ppm 81L acetic acid 0.125 to 25 ppm 180 amines 5 to 100 ppm 180L amines 0.25 to 39 ppm
圖 5.檢知管外觀圖
圖 6.檢知管細部圖:
依照變色程度對照刻度,來判別所偵測的氣體濃度
5. 檢知器使用方法:圖 7-1 到圖 7-3 為檢知器使用步驟
圖 7-1.將檢知管與檢知器組裝。
圖 7-2.拉開拉把,儀器內呈負壓使空氣流入檢知管。
圖 7-3.讀取變色範圍對照刻度,紀錄數值
5. 檢知管變色原理及使用介紹(徐, 2008):
檢知管為一玻璃管,管內填充不同顏色的化學合成物,具 有專一性,利用 Gastec GV-100 檢知器抽取空氣,使空氣流經 檢知管產生化學反應變色,由變色範圍可以知道空氣中指標氣 體的濃度(周, 2004)。
(1)氨(ammonia):
將氣體流經檢知管,氣體當中氨氣中和磷酸使檢知管 由紫色轉為黃色,依照變色範圍測定氨氣濃度,濃度誤差範圍 在 5-10%之間。
purple → yellow
NH3 + H3PO4 →(NH4)3PO4
使用環境限制:
① .溫度:工作溫度為 0–40℃,依照檢測地區溫度將測得數 值乘以相關係數來得到正確濃度。
型號:NO.3L 檢測氨濃度(0.5—78 ppm)
溫度(℃) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 相關係數 1.35 1.25 1.15 1.07 1.0 0.95 0.9 0.86 0.83
型號:NO.3La 檢測氨濃度(2.5—200 ppm)
溫度(℃) 0 10 20 30 40 相關係數 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8
② .溼度:使用環境 0–90%之內不會產生誤差。
③ .壓力依照使用環境壓力換算,換算公式為:
檢測讀值(ppm) × 1013(hPa) / 環境氣壓 (hPa) 。
④ .其他氣體影響: 當空氣中 CO2濃度在 1%以上,或者空氣 當中有聯氨(hydrazine)或者胺類(amines)會增加 5%的誤
差。
(2)硫化氫(hydrogen sulfide):
將氣體流經檢知管,硫化氫與與醋酸鉛反應使檢知 管由白色轉為棕色,依照變色範圍測定硫化氫濃度,濃度
誤差範圍在 5-10%之間。
White → Brown
H2S + Pb(CH3COO)2 → PbS + 2CH3COOH 使用環境限制:
① 溫度:工作溫度為 0–40℃,依照檢測地區溫度將測得 數值乘以相關係數來得到正確濃度。
型號:4LT 檢測硫化氫濃度(0.1—4 ppm)
溫度(℃) 0 10 20 30 40 相關係數 0.9 0.95 1.0 1.05 1.1
型號:4L 檢測硫化氫濃度(1—240 ppm)
溫度的相關係數不需要
型號:4HM 檢測硫化氫濃度(25—1600 ppm)
溫度的相關係數不需要
② 溼度:使用環境 0–90%之內不會產生誤差。
③ 壓力依照使用環境壓力換算,換算公式為:
檢測讀值(ppm) × 1013(hPa) / 環境氣壓 (hPa) 。
④ 其他氣體影響:除了乙硫醇會造成些微誤差,其餘氣體 不會造成影響。
(3)酚(phenol) :
將氣體流經檢知管,氣體當中酚與硝酸鈰結合使得顏 色由梨黃色轉為灰色,依照變色範圍測定酚濃度,濃度誤 差範圍在 25%之間。
Pale yellow → Gray
C6H5OH + Ce(NO3)62- → C6H5OCe(NO3)5N 使用環境限制:
① 溫度:工作溫度為 10–40℃,依照檢測地區溫度將測 得數值乘以相關係數來得到正確濃度。
型號:60 檢測酚類濃度(0.4—1 ppm)
Tube Reading
(ppm)
True concentration
10℃ 15℃ 20℃ 30℃ 40℃
使用環境限制:
① 溫度:工作溫度為 0–40℃,依照檢測地區溫度將測得數值 乘以相關係數來得到正確濃度。
型號:81L 檢測乙酸濃度(0.125—25 ppm)
溫度(℃) 0 10 20 30 40 相關係數 1.3 1.1 1.0 0.9 0.8
② 溼度:使用環境 0–80%之內不會產生誤差。
③ 壓力依照使用環境壓力換算,換算公式為。
檢測讀值(ppm) × 1013(hPa) / 環境氣壓 (hPa) 。
④ 其他氣體影響: 空氣中含有氯 (chloride)、二氧化硫 (sulfur dioxide)、二氧化氮(nitrogen dioxide) 、甲酸 (formic acid)和乙酐(Acetic anhydride)會增加 5%以內 的誤差。
(5)胺類(amines):
將氣體流經檢知管,胺類與硫酸作用改變 pH 使檢知管由粉紅 轉為黃色,依照變色範圍測定胺類濃度,濃度誤差範圍在 5-10%之間。
Pink → Yellow
2R NH2 + H2SO4 →(R NH3)2SO4
使用環境限制:
① 溫度:工作溫度為 0–40℃,依照檢測地區溫度將測得數值 乘以相關係數來得到正確濃度。
型號:180L 檢測胺類濃度(0.25—39 ppm)
溫度(℃) 0 10 20 30 40 相關係數 1.3 1.15 1.0 0.95 0.9
型號:180 檢測胺類濃度(2—100 ppm)
溫度(℃) 0 10 20 30 40 相關係數 1.8 1.3 1.0 0.8 0.6
② 溼度: 使用環境 0–90%之內不會產生誤差。
③ 壓力依照使用環境壓力換算,換算公式為。
檢測讀值(ppm) × 1013(hPa) / 環境氣壓 (hPa) 。
④ 其他氣體影響: 空氣中含有聯氨(hydrazine)、苯胺 (aniline)、砒啶(pyridine)或氨氣 (ammonia)會增加 5%
的誤差。
三、 功能藍菌培養液配方:
(在化學藥品後的數字為每公升蒸餾水[distilled water,dH2O]中 的化學品添加量的公克數,g/L) ethanesulfonic acid )
(4-羥乙基乙磺酸)
四、 實驗方法:
1. 收集廚餘廢水:
家庭廚餘放入底部有 0.2cm 直徑圓網孔的槽中,濾出廚餘廢 水。此廢水中所含油脂和食物碎屑等均不必再濾除。
2. 處理廚餘廢水菌種之取得:
可取各當地呈綠色之池圖水 0.1ml,以 L 型玻棒圗洋菜帄盤法,
圗在培養液的洋菜帄盤上。此圗過池水之帄盤,蓋面向下,置 室溫 500-2000 lux(米燭光)日光燈光源下,或光合作用培養 箱 25℃,10--15 日,可得綠色菌群,以消毒過之牙籤分別取 各菌群的小部份,在載玻片上加水滴抹片,以螢光顯微鏡檢 視,選出藍細菌。再將選定的菌種分別培養在裝有前述液態培 養液 300ml(但無洋菜)的 500ml 三角錐瓶中,置於室溫及 1500 lux 日光燈光源下的振盪培養器上培養(100 rpm)。
3. 功能菌種篩選(李, 2003):
將前述所得已繁生的菌種,分別加入經自來水稀釋 100 倍 (每公升廚餘廢水中加入 10g NaHCO3與 1g KNO3)的廚餘水中,
此稀釋後之廚餘廢水中該藍菌最終濃度濕重至少 2.0g/L 以上 (紗布過濾後重量,亦可由離心濃縮取得),培養於每 300ml 裝 於容量 500ml 的三角錐瓶中,其餘條件(溫度、光照、振盪)
均同前述。待 30 日後,選出能繁生並使水最澄清之菌種。
再將此菌種以最終濃度至少 2.0g/L 以上(可直接由前項 培養中離心濃縮取得),培養於經自來水稀釋 50 倍(不加 NaHCO3
與 KNO3)的廚餘水中,其餘條件均同前述,待 30 日後,再選出 能繁生而使水最澄清,且不必調整廚餘廢水 pH 值的菌種。
再將此菌種以最終濃度 2.0g/L 以上培養於經自來水稀釋 20 倍(不加 NaHCO3與 KNO3)的廚餘水中,其餘條件均同前述,
再測試。
以期篩選出能處理高濃度且不必先調整 pH 值的廚餘廢水 的菌株。再由此 1:20 的廚餘廢水培養液中,分離出功能菌,
以最終 2.0g/L 以上濃度培養於經自來水稀釋 10 倍(不加 NaHCO3與 KNO3)的廚餘水中,其餘條件均同前述,再測試,期 篩選出能處理更高濃度且不必先調整 pH 值的廚餘水的菌株,
同此方式再測試功能菌在 1:5 稀釋度的廚餘水中成長情形。
但依經驗,通常只能篩選到能繁生於用自來水稀釋 10 或 20 倍,且不必調整 pH 值的廚餘廢水中的藍菌菌株。因為濃度 更高的廚餘廢水,其透光度和鹽份含量等均不適一般藍菌生 長。此處所用的逐步篩選方式,是藉藍菌之高濃度使形成優勢 菌種,而不受廚餘廢水中其它菌種的抑制。
4. 大量培養功能藍菌:(李, 2003)
實驗起始接種細胞為成長到生長停滯期( stationary phase)之功能藍菌,將 3 公升廚餘水加自來水稀釋至 15 公升
(稀釋 5 倍),置於透明方形圕膠桶中,再加入最終濃度濕重 至少 2.0g/L 以上的已篩選出被認為效果最佳之功能藍菌液 3 公升(本研究中使用的是魚腥藍菌
Anabaena sp.
),總共 18公升(其中廚餘廢水 3 公升、12 公升的自來水及 3 公升的功能 藍菌液)。並以小馬達打空氣(使水流動並使空氧中 CO2進入水 中),在自然光照下培養 45 日。
圖 8.依序為:有經功能藍菌處理之廚餘廢水、
未經功能藍菌處理之廚餘廢水 5. 測定 pH 值:分成甲、乙、丙三組,其分組如下。
(甲) 實驗組:通氣並加藍菌處理之廚餘廢水。
(乙) 對照組 a:通氣並未加藍菌處理之廚餘廢水。
(丙) 對照組 b:留存之廚餘廢水。
加入功能藍菌後,每間隔 24 小時後取溶液,靜置後取上清 液用攜帶型 pH 值計(pH meter)進行測試,實驗組共二桶,對 照組 a、b 各一桶,每桶測試皆進行 3 重複,記錄帄均值與標準 差,實驗持續一週並繪製成圖表(附錄 5.)。
6. 測溶氧量 DO (dissolved oxygen) 值及化學需氧量 COD (Chemical Oxygen Demand) 值:(林, 2007)
分成甲、乙、丙三組,其分組如下。
(甲) 實驗組:通氣並加藍菌處理之廚餘廢水。
(乙) 對照組 a:通氣並未加藍菌處理之廚餘廢水。
(丙) 對照組 b:留存之廚餘廢水。
加入功能藍菌後,每間隔 24 小時後取溶液,靜置後取上清 液進行測試,實驗組共二桶,對照組 a、b 各一桶,以分光光度 計(型號:HACH DR/2010)測試溶氧量 DO 及化學需氧量 COD 值,
檢測 COD 值時需加入 HACH 公司出品之 COD 試劑,每桶測試皆進 行 3 重複,記錄帄均值與標準差,實驗持續一週並繪製成圖表
(附錄 6、7)。
7. Gastec 檢知管檢測氣體分子:
分成甲、乙、丙三組,其分組如下。
(甲) 實驗組:通氣並加藍菌處理之廚餘廢水。
(乙) 對照組 a:通氣並未加藍菌處理之廚餘廢水。
(丙) 對照組 b:留存之廚餘廢水。
實驗組共二桶,對照組 a、b 各一桶,每桶測試皆以 Gastec 檢知管檢測各組氣體分子中氨(NH3)、硫化氫(H2S)、酚類
(Phenol)、乙酸(Acetic Acid)及胺類(R-NH2)等的含量,
實驗持續一週並繪製成圖表(附錄 8~11)。
8. 分組測試發芽率:
分成 A、B、C、D 四組,其分組如下:
第 A 組(花寶牌(HYPONeX)花寶 2 號登記成分):
全氮 20%(內含銨態氮 4%、硝酸態氮 4%)、水溶性
磷酐 20%、水溶性氧化鉀 20% ,以 1:1000 稀釋後 之液肥。
第 B 組:經功能藍菌通氣處理 7 天之廚餘廢水澄清液。
第 C 組:自來水。
第 D 組:未經處理之廚餘廢水澄清液。
準備 4 個培養皿,各放入 100 顆青梗白菜(
Brassica rapa
L.Chinensis Group)種子,分別給予 20ml 實驗液體,置於室 溫下 3 天後觀察發芽率,實驗進行 3 重複,以所做實驗數據帄 均值做成圖表。9. 田野試驗分組--計數沾黏的蒼蠅數量:
分成 A、B、C、D 四組,其分組如下:
A 組:除每日灌溉自來水 1 公升外,每隔 4 日加灑花寶 2 號(台 和園藝企業股份有限公司)以 1:1000 稀釋後之液肥 500 毫升。
B 組:除帄日灑自來水 1 公升外,每隔 4 日加灑以 1:20 稀釋後 之經過功能藍菌處理的廚餘藍菌液 500 毫升。
C 組:每日灑自來水 1 公升外,每隔 4 日加灑自來水 500 毫升。
D 組:除每日灌溉自來水 1 公升外,每隔 4 日加灑 1:20 稀釋後 之未經處理的廚餘廢水 500 毫升。
A 組~C 組每組間隔 50cm,為避免灌溉液體互相干擾,加灑 的液體採取逐棵灌溉法,減少各組間的干擾;為避免 D 組未經處
A 組~C 組每組間隔 50cm,為避免灌溉液體互相干擾,加灑 的液體採取逐棵灌溉法,減少各組間的干擾;為避免 D 組未經處