Chapter 5. The Application of Plants in Horticultural Therapy Activities 摘要(Abstract)
香草為極受歡迎之園藝治療素材，品嚐香草茶亦為園藝治療之常見活動，兼 具嗅覺與味覺感官體驗。香草茶的保健功效逐漸受到關注，但其複方功效尚未以 科學方法驗證。腎上腺皮質醇為量測心理壓力之指標，於放鬆狀態下濃度降低。
透過取樣唾液分析腎上腺皮質醇濃度變化，可瞭解香草茶之放鬆效益。本試驗以 薰衣草及洋甘菊為主原料調配複方香草茶，並於飲用香草茶前後取樣受試者之唾 液，腎上腺皮質醇濃度於飲用後20-30 分鐘變化較明顯，為較佳之取樣點。年齡範 圍45-60 歲之中高齡受試者，飲用香草茶後腎上腺皮質醇濃度顯著降低(p < 0.05)，
但21-35 歲以及 20 歲左右之受試者飲用香草茶對腎上腺皮質醇濃度之影響並不顯 著。而受試者性別以及試驗時間皆未影響飲用香草茶前後腎上腺皮質醇之濃度。
綜合三次試驗結果，飲用香草茶後腎上腺皮質醇濃度之降低未達顯著差異水準，
但位於90%信賴區間內，且達 81.4%之受試者認同飲用香草茶可達放鬆、安眠、增 加平靜及正向情緒之功效。因此薰衣草及洋甘菊複方香草茶應具放鬆效果，適合 運用於園藝治療活動中，但仍需增加各族群之受試者進行檢定，以更準確驗證其 功效。
64
一、前言(Introduction)
香草(Herbs)為具有特殊氣味，可食用、作為香料或利用於保健醫療、美容等 用途之植物，又稱為香藥草或香藥植物。臺灣的園藝治療活動中常運用香草植物 作為材料(黃，2011)，而香草具嗅覺感官體驗，為極具園藝治療效果之素材(Hewson, 1998)。
香草植物應用極廣，其香味於觀賞植物中極具特色(王和朱，2004)，亦發展許 多相關產品，包含沐浴及美容用品、香包香枕、餐點、精油、花草茶等，因此極 受大眾喜愛。香草精油香氣具放鬆效果，而薰衣草及洋甘菊香氣有安眠、鎮靜之 功效，可幫助增加平靜及正向情緒(Diego et al., 1998; Lehrner et al., 2005; Moss et al., 2006)；迷迭香、胡椒薄荷、鼠尾草等精油香氣則可提升受試者記憶力，具提神功 效(Diego et al., 1998; Moss et al., 2008; Moss et al., 2010)。而香草茶品嚐為園藝治療 中常見之活動，近年由於其保健功效而漸漸受到關注，市面上亦販售多樣複合配 方之香草茶，但大多未以科學方法驗證其功效。而腎上腺皮質醇為量測焦慮、壓 力之指標(Fukuda and Morimoto, 2001a)，於放鬆狀態下濃度降低。透過取樣唾液分 析其濃度變化，可瞭解受試者當下之身心狀況，為一簡便且非侵入性之方法。
本試驗以薰衣草及洋甘菊為原料調配複方香草茶，並添加甜菊提味，希望兼 顧口感與功效。同時利用腎上腺皮質醇為指標，取樣受試者之唾液評估飲用香草 茶後之放鬆效果，並進一步分析受試者背景與香草茶功效之關係。本試驗目的為 瞭解複方香草茶及其運用於園藝治療活動中之效果，並可作為未來生產香草茶及 製作配方之參考。
65
二、材料與方法(Materials and Methods)
試驗一、飲用舒眠香草茶後唾液中腎上腺皮質醇濃度之變化 (一) 植物材料
香草乾品薰衣草、洋甘菊、甜菊50 g 包裝(進口商：洲界貿易有限公司，臺北；
原產地：法國)，於 2013 年 10 月 11 日購自艾佳食品原料行(Aiga food)中和店。香 草茶配方為薰衣草0.6 g、洋甘菊 0.45 g 及甜菊 0.1 g，以 100 oC 熱水 200 mL 沖泡。
(二) 試驗方法與調查項目
於說明試驗流程後，請 12 位受試者採坐姿，以白開水漱口後停止吞嚥動作，
嘴唇自然閉合，於放鬆狀態下使唾液自然累積於口腔底部。將市售中型口腔棉棒(15 cm × 10mm, 佑合企業股份有限公司，彰化)放入口中舌下腺，吸取唾液於 1 分鐘後，
將棉棒置於1.5 ml 之微量離心管(microcentrifuge tube/ ependoff)中即完成前測。之 後每位受試者飲用200 mL 香草茶，分別於飲用後 10, 20, 30, 60 分鐘收集唾液，方 法如同前述。微量離心管中之棉棒僅保留棉團上方竹籤 0.2 cm，其餘部分剪除。
蓋上離心管上蓋後，以低溫離心機(Sigma 2K15, Sigma Laborzentrifugen GmbH, Germany)轉速 6500 rpm 離心 4 分鐘後，移除離心後之棉團，置於 4oC 保存，並於 當日進行分析。96 孔盤(12×8 GARGG plate, coated with goat anti-rabbit gamma globulin)及分析藥品(購自 Eagle Biosciences Inc., Boston, MA, USA)於購入後儲存 於4oC。取 Salivary Cortisol ELISA Calibrators (0, 0.1, 0.3, 1, 3, 10 and 30 ng·mL-1)、
Control #1、Control #2 及離心完成之受試者前後測唾液樣品各 25 μL 滴入 96 孔盤，
再於各孔加入 Cortisol-Horse radish peroxidase (HRP) working reagent (將 HRP concentrate 以 HRP conjugate buffer 稀釋至 10 倍配置)各 50 μL，再加入 Cortisol ELISA Antibody 各 50 μL，之後於室溫下震盪 60 分鐘(500 rpm; MS Waver Shaker, Major Science, Saratoga, CA, USA)。震盪完成後倒出溶液，取 25 mL 之 10X Wash Solution ELISA #1 以蒸餾水稀釋至 250 mL，以此稀釋液清洗 96 孔盤 3 次，以吸水 紙巾輕輕吸乾、拍乾。加入Color Development Reagent ELISA #1 各 100 μL，簡單 地手動輕輕搖晃96 孔盤，於室溫下放置 30 分鐘。之後加入 Stopping Solution ELISA
#1 各 100 μL，手動輕輕搖晃 96 孔盤，此時溶液由藍色轉為黃色。之後於 30 分鐘 內以光譜分析儀(VersaMax ELISA Microplate Reader, Molecular Devices, LLC,
66
Sunnyvale, CA, USA)於波長 450 nm 下讀取吸光值(optical density, OD)資料。
(三) 統計分析
光譜分析儀讀取之吸光值資料先除以Salivary Cortisol ELISA Calibrators 標準 品中0 ng·mL-1之OD 值進行校正，利用 SigmaPlot 10.0 (Systat Software Inc., USA) 進行繪圖，將標準品0.1, 0.3, 1, 3, 10 and 30 ng·mL-1之校正值與濃度作圖，以4 Parameter Logistic nonlinear model 建立標準曲線(圖 5.1)，依此回推樣品濃度。
試驗二、飲用舒眠香草茶之放鬆效益 (一) 植物材料
同試驗一。
(二) 試驗方法與調查項目
試驗分別於2013 年 12 月 20 日下午、2013 年 12 月 25 日上午、2013 年 12 月 26 日下午進行，共進行三次。三次試驗之受試者分別為園藝系研究生、臺大農場 樂活養生園藝課程學員、園藝系觀賞樹木課程大學生。所有受試者於試驗結束後 填寫背景及身心狀況自評問卷。
唾液採樣及分析方法同試驗一，同時配合試驗一之成果，於飲用舒眠香草茶 前及飲用後30 分鐘進行唾液取樣。
(三) 統計分析
光譜分析儀讀取之吸光值(optical density, OD)資料先除以 Salivary Cortisol ELISA Calibrators 標準品中 0 ng·mL-1之OD 值進行校正，利用 SigmaPlot 10.0 (Systat Software Inc., USA)進行繪圖，將標準品 0.1, 0.3, 1, 3, 10 and 30 ng·mL-1之校正值與 濃度作圖，以4 Parameter Logistic nonlinear model 建立標準曲線(圖 5.3 - 5.5)。試驗 結果以Excel 2007 (Microsoft, Redmond, WA, USA)進行成對母體平均數差異檢定 (paired t-test)，以 SPSS 16.0 分析受試者背景資訊，進行二因子變異數分析(Two-way Analysis of Variance, Two-way ANOVA)。
67
三、 結果(Results)
試驗一、飲用舒眠香草茶後唾液中腎上腺皮質醇濃度之變化
檢測 12 位受試者於飲用舒眠香草茶後，唾液中腎上腺皮質醇之濃度變化(圖 5.2)。其中 7 位受試者於飲用後唾液中腎上腺皮質醇之濃度下降(圖 5.2A - 5.2G)，
受試者A、B、C、E 於飲用後 20-30 分鐘內濃度下降，並於 30 分鐘後濃度變化趨 於平緩，受試者D 則於波動後持續下降，受試者 F 及受試者 G 於飲用後濃度下降，
但於20 分鐘後濃度上升，分別於 30 及 60 分鐘後高於飲用前之濃度。而 2 位受試 者於飲用後並無效果(圖 5.2H - 5.2I)，另有 3 位受試者呈不規律波動變化(圖 5.2J - 5.2L)。
試驗二、飲用舒眠香草茶之放鬆效益
第一次試驗受試者為園藝系研究生、助理共24 人，其中 9 人因唾液未達最低 取樣量無法檢測，另有 3 人由於在試驗期間飲食、情緒激動、走動而歸類為無效 樣本，有效樣本共12 人。有效樣本中，受測者年齡為 21-35 歲，其中男性 5 人，
占有效樣本之41.7%；女性 7 人，占有效樣本之 58.3%。飲用香草茶後腎上腺皮質 醇降低者為10 人，共占有效樣本之 83.3%，其中男性 4 人，女性 6 人(圖 5.6)。以 標準品校正值及濃度建立4 Parameter Logistic 標準曲線(圖 5.3)，計算前後測樣本 之濃度。前測之腎上腺皮質醇平均濃度為10.580 ng·mL-1，後測之平均濃度為8.505 ng·mL-1(表 5.1)，前後測樣品進行 paired t test 單尾檢定，p value > 0.05 (p = 0.118)。
第二次試驗受試者為臺大農場樂活養生園藝課程學員共 37 人，其中 24 人因 唾液未達最低取樣量無法檢測，另有1 人由於在試驗期間飲食而歸類為無效樣本，
有效樣本共12 人。有效樣本中，受測者年齡為 45-60 歲，其中男性 2 人，占有效 樣本之16.7%；女性 10 人，占有效樣本之 83.3%。飲用香草茶後腎上腺皮質醇降 低者為10 人，共占有效樣本之 83.3%，其中男性 2 人，女性 8 人(圖 5.6)。以標準 品校正值及濃度建立4 Parameter Logistic 標準曲線(圖 5.4)，計算前後測樣本之濃 度。前測之腎上腺皮質醇平均濃度為 1.628 ng·mL-1；後測之平均濃度為 1.198 ng·mL-1(表 5.2)。前後測樣品進行 paired t test 單尾檢定，p value < 0.05 (p = 0.013)。
第三次試驗受試者為臺灣大學園藝暨景觀學系開設之觀賞樹木課程學生共 37 人，其中 4 人因唾液未達最低取樣量無法檢測，另有 5 人由於在試驗期間跑動、
68
飲食、服用藥物而歸類為無效樣本，有效樣本共28 人。有效樣本中，受測者平均 年齡約為20 歲，其中男性及女性各 14 人(各占有效樣本之 50.0%)。飲用香草茶後 腎上腺皮質醇降低者為14 人，共占有效樣本之 50.0%，其中男性 7 人，女性 7 人(圖 5.6)。以標準品校正值及濃度建立 4 Parameter Logistic 標準曲線(圖 5.5)，計算前後 測樣本之濃度。前測之腎上腺皮質醇平均濃度為4.938 ng·mL-1(表 5.3)，後測之平 均濃度為4.792 ng·mL-1。前後測樣品進行paired t test 單尾檢定，p value > 0.1 (p = 0.392)。
綜合三次試驗結果，總有效樣本數為 52 人，其中男性 21 人，占總有效樣本 之40.4%；女性 31 人，占總有效樣本之 59.6%。飲用香草茶後腎上腺皮質醇降低 者為34 人，共占總有效樣本之 65.4%，其中男性 13 人，女性 21 人(圖 5.6)。前測 之腎上腺皮質醇平均濃度為5.466 ng·mL-1，後測之平均濃度為4.819 ng·mL-1。前 後測樣品進行paired t test 單尾檢定，p value > 0.05 (p = 0.090)。經由 Two-way ANOVA 混和設計(2 × 2)分析受試者性別及飲用香草茶前後測腎上腺皮質醇濃度，
2(受試者間：男，女) × 2(受試者內：前測，後測)，顯示交互作用項中男性及女性 受試者間無顯著差異，p value > 0.05 (p = 0.912)；以同樣方法檢定年齡之影響，顯 示交互作用項中不同年齡之受試者間無顯著差異，p value > 0.05 (p = 0.387)。另由 於第一次及第三次試驗時間為下午，第二次為上午，因此以同法檢測試驗時間之 影響，其結果顯示交互作用項中兩試驗時間無顯著差異，p value > 0.05 (p = 0.764)。
69
四、 討論(Discussion)
試驗一、飲用舒眠香草茶後唾液中腎上腺皮質醇濃度之變化
觀察於飲用香草茶後唾液中腎上腺皮質醇濃度下降之 7 位受試者(圖 5.2A - 5.2G)，受試者 A、B、C、E 於飲用後 20-30 分鐘內濃度下降，之後濃度變化趨於 平緩，顯示30 分鐘內可達最佳效果。受試者 F 及受試者 G 於飲用後濃度下降，但 分別於30 及 60 分鐘後高於飲用前之濃度，顯示香草茶對受試者 F 及 G 之作用時
觀察於飲用香草茶後唾液中腎上腺皮質醇濃度下降之 7 位受試者(圖 5.2A - 5.2G)，受試者 A、B、C、E 於飲用後 20-30 分鐘內濃度下降，之後濃度變化趨於 平緩，顯示30 分鐘內可達最佳效果。受試者 F 及受試者 G 於飲用後濃度下降，但 分別於30 及 60 分鐘後高於飲用前之濃度，顯示香草茶對受試者 F 及 G 之作用時