樣品濃縮試驗

為了解本方法對樣品濃縮的效果，我們分別選擇在 LOD 以 下濃度進行實驗：分別取 2 μM, 50 mL 與 1 μM, 100 mL 之 (-)-EC 溶液，以 0.64 pmole 氧化鐵奈米粒子進行萃取，再以 1 mL pH 5.3, 100 mM 之酒石酸溶液進行脫附兩次，兩溶液濃縮結果

電泳圖如圖 29 與圖 30。從圖 29 與 30 中觀察到，濃縮後吸收 峰面積明顯的增加，顯示濃縮效率顯著，2 μM (-)-EC 溶液濃縮 約8 倍，濃縮後總濃度為 16.2 μM 左右。而 1 μM (-)-EC 溶液 濃縮效果約16 倍，濃縮後濃度約為 16.0 μM。

六、 實物樣品檢測

(一) 市售茶樣品之電泳檢測

前述利用最佳化電泳條件偵測市售樣品，除了可以了 解其兒茶素含量，更可做為尋找吸附兒茶素時，氧化鐵奈

米粒子使用量之依據。本試驗購得之市售無糖茶樣品 8

種，分別以樣品 A~G 代表。真實樣品先稀釋 10 倍之後再 進行電泳，電泳結果如圖 31 至圖 37，由圖中可知茶樣品 中的兒茶素皆有不錯的分離效果，而各樣品之咖啡因與四 種兒茶素含量總整理見表 16，其中樣品 D 所含的四種兒茶 素最多，咖啡因、(-)-EGC、(-)-EC、(-)-EGCG 與(-)-ECG

的含量分別為 2660、1250、351、992、204 μM，樣品 B 所 含的四種兒茶素較少，但五種待測物含量亦分別有1840、

1520、47、1340、34 μM。

(二) 市售茶樣品之吸附實驗

進行脫附之前，我們必須先估算所需氧化鐵奈米粒子 所需量。以樣品 A 進行吸附試驗，首先用毛細管電泳檢測 出樣品 A 中四種兒茶素的濃度，以估算出所需氧化鐵奈米 粒子之莫耳數，因四種兒茶素所占的含量約在 97% ~ 98%

左右^[10]。所以再將估算出的氧化鐵奈米粒子除以 97% ，即 是我們實際使用之氧化鐵奈米粒子的莫耳數，經估算，在 稀釋 10 倍的真實樣品所需之氧化鐵奈米粒子約 0.96 pmole。

接著將稀釋 10 倍之真實樣品，加入適當莫耳數之氧化 鐵奈米粒子中，萃取後將上層液進行電泳偵測，並與吸附 前做比較。其吸附前後電泳比較圖如圖 38，從圖 38 中發 現使用氧化鐵奈米粒子吸附前之樣品 A 與吸附後之樣品 A，其 (-)-EGC、(-)-EC、(-)-EGCG、(-)-ECG 的 peak 消失 了，顯示兒茶素已經被氧化鐵奈米粒子所吸附。而咖啡因

的 peak 可看出改變量很小，並未被吸附，亦表示使用氧化 鐵奈米粒子可選擇性的將兒茶素從茶中分離。

另外，為了確認是否估算的量是否可完全吸附氧化鐵 奈米粒子，故分別以 0.096、0.192、0.48、0.768、0.96、

1.152、1.44 pmole 等不同氧化鐵奈米粒子莫耳數進行脫附 實驗，其脫附結果電泳圖如圖39，數據結果整理如表 17。

從圖 39 中發現隨著氧化鐵奈米粒子的莫耳數增加，可被偵 測到兒茶素分子的量越來越少，從表 17 確認在我們估算的 氧化鐵奈米粒子莫耳數之下，兒茶素已完全吸附。

(三) 氧化鐵奈米粒子對市售茶樣品前處理之脫附實驗

以脫附之最佳化條件對吸附樣品A 中兒茶素之氧化鐵 奈米粒子進行脫附，其電泳圖如圖 40，結果整理如表 18，

從圖 40 中可明顯看出(-)-EC 與(-)-EGC 的 peak，從表 18 中可發現 (-)-EC 的總脫附量最大，可達 86 %，其次是 (-)-EGC，達 9.4%，(-)-EGCG、(-)-ECG 則無法被偵測到，

推測(-)-EGCG、(-)-ECG 結構中含有更多的羥基，因此對氧 化鐵奈米粒子的吸附能力更強，導致無法脫附下來。