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4.1 大白鼠外觀

對實驗大鼠於手術前後,到被犧牲前,做了多項的觀察記錄,包括毛色、

重量、手術傷口情況、足趾缺損情形、足踝傷口、進食及動物行動等。

4.1.1 手術傷口

除了六味地黃丸組中的 A1 傷口處有個 1×1 cm 大小,按之柔軟的腫塊之 外,其餘的動物傷口癒合良好,大鼠在一星期左右,都會將皮膚的縫合線咬斷,

但不影響傷口癒合,皮膚約在 10 天左右癒合完成。

4.1.2 行動

坐骨神經截斷後,大白鼠右後肢有明顯的癱瘓現象,行動上以前肢及左後 肢為主,拖曳著右後肢而行,步態不穩,手術後一星期內喜歡靜靜地蜷縮在一 角落。除了六味地黃丸組的 A6 行走時頭會偏向一側外,其餘動物於實驗期間,

行動上的改變並不多。

4.1.3 毛色

神經截斷後,四君子湯組和對照組原本白色有光澤的毛髮,隨著時間的增 長,逐漸變成淡黃色,且較無光澤,並有脫落的情況(圖 4.1)。其中四君子湯 組中的 B8 毛髮稀疏(圖 4.2),且頭上皮膚因抓傷而缺損,B4 毛髮除了右後 股骨周圍下刀處外皆脫落(圖 4.3)六味地黃丸組則毛色與手術前無太大變化,

其中的 A9 身上有數道抓傷的痕跡。

4.1.4 重量

截斷紳經前及實驗八週後,分別記錄大白鼠的體重變化(表 4.1)。各組 中白鼠的體重皆是增加的。對照組體重增加比例明顯高於六味地黃丸組和四君 子湯組,而兩組方葯組之間無太大差異。

4.1.5 足趾自殘

圖 4.1 對照組中的 C7 頸背部毛脫落而稀疏

圖 4.2 四君子湯組的 B8 毛髮稀疏且呈淡黃色

圖 4.3 四君子湯組 B4 右股骨處毛髮脫落

圖 4.5 對照組中的 C9 自殘造成足趾缺損

圖 4.6 四君子湯組中的 B8 自殘嚴重

圖 4.7 六味地黃丸組的 A2 自殘嚴重

表 4.2 動物自殘情況

組別 自殘情況 組別 自殘情況 組別 自殘情況

A1 (+) △ B1 (+) △ C1 (+) △

A2 (+) B2 (+) △ C2 (-)

A3 N/A B3 N/A C3 (-)

A4 (-) B4 (-) C4 (-)

A5 (+) B5 (-) C5 (+)

A6 (-) B6 (+) △ C6 (-)

A7 (-) B7 (-) C7 (+)

A8 N/A B8 (+) C8 (-)

A9 (+) B9 (+) △ C9 (+)

A10 (+) B10 N/A C10 (+)△

A:六味地黃丸組 B:四君子湯組 C:對照組

(+):有自殘情況 (-):無自殘情況 N/A :Not available

△:僅趾甲或皮膚缺損,其餘為足趾喪失或缺損。

4.2 矽膠管觀察與神經再生情形

4.2.1 矽膠管觀察

神經管接合手術八週後,再次手術觀察矽膠管內神經再生的情形。大鼠之 麻醉及手術方法如前,使之前植入大白鼠的神經管暴露。大部分的神經管兩側 發現有增生的纖維組織形成,而管子的外圍也被纖維組織所包覆(圖 4.9;圖 4.10;圖 4.11;圖 4.12),利用手術刀將前述之纖維組織切離後,管內的再生 神經組織可透過半透明的管壁做一觀察(表 4.3)。

4.2.2 神經再生比率

六味地黃丸組,八隻中有五隻在神經管中可見一白色再生管狀物通過(圖 4.13;圖 4.14;圖 4.15;圖 4.16),另三隻管內為淡黃色不透明物質。

四君子湯組,八隻中有三隻在神經管中可見一白色再生管狀物通過(圖 4.17),四隻在管中可見淡黃色不透明物質(圖 4.18),一隻在管中可見淡黃 色淡體。

對照組,十隻中有四隻在神經管中可見一白色再生管狀物通過(圖 4.19;

圖 4.20),四隻在管中可見淡黃色不透明膠狀物質,二隻在管中可見淡黃色液 體(圖 4.21;圖 4.22)。

4.2.3 神經組織再生的成功率

死亡的動物不列入統計,神經管內有白色再生管狀物通過者,視為神經組 織再生成功。各組之成功率如圖 4.23:

六味地黃丸組為 5/8=62.5%

四君子湯組為 3/8=37.5%

對照組為 4/10=40%

圖 4.9 六味地黃丸組的 A5 管子被纖維組織包覆

圖 4.10 四君子湯組的 B8 管子被纖維組織包覆

圖 4.11 對照組的 C5 管子被纖維組織包覆

圖 4.12 對照組的 C9 管子被纖維組織包覆

表 4.3 矽膠管內有再生管狀物情形

組別 內有再生

管狀物

外有包覆

纖維組織 組別 內有再生

管狀物

外有包覆

纖維組織 組別 內有再生

管狀物

外有包覆 纖維組織

A1 (+) (-) B1 (-) (+) C1 (+) (-)

A2 (-) (+) B2 (+) (-) C2 (+) (-)

A3 N/A N/A B3 N/A N/A C3 (-) (+)

A4 (+) (-) B4 (-) (+) C4 (-) (-)

A5 (-) (+) B5 (+) (-) C5 (-) (+)

A6 (+) (-) B6 (+) (-) C6 (+) (-)

A7 (+) (-) B7 (-) (-) C7 (+) (-)

A8 N/A N/A B8 (-) (+) C8 (-) (+)

A9 (+) (-) B9 (-) (+) C9 (-) (+)

A10 (-) (+) B10 N/A N/A C10 (-) (-)

A:六味地黃丸組 B:四君子湯組 C:對照組 N/A:Not available

圖 4.13 六味地黃丸組的 A1 管內可見白再生管狀物通過

圖 4.15 六味地黃丸組的 A7 管內可見白再生管狀物通過

圖 4.16 六味地黃丸組的 A9 管內可見白再生管狀物通過

圖 4.17 四君子湯組的 B2 管內可見白色再生管狀物通過

圖 4.19 對照組的 C1 管內可見白色再生管狀物通過

圖 4.20 對照組的 C2 管內可見白色再生管狀物通過

圖 4.21 對照組的 C4 管內可見淡黃色液體

0 10 20 30 40 50 60 70

%

A:六味地黃丸 B:四君子湯 C:對照組

A B C

圖 4.23 各組神經再生成功率的比較

4.3 切片觀察

正常坐骨神經之神經外膜是在最外層,其由緻密結締組織所構成,有 2-3 個神經束為其所包圍,而每束神經纖維同樣為神經膜結締組織鞘所包圍。在每 個神經纖維之間的是鬆細的結締組織,稱為神經內膜。神經內膜內含有具髓鞘 的神經纖維、血管、淋巴管等。當以 Toluidine blue 染色時,髓鞘被染成深藍 色,而髓環內之軸突則呈現較淡白的顏色。

將各組矽膠管中之白色再生管狀物,取中段做固定、脫水、包埋、切片、

染色後,於顯微鏡下觀察。依神經管內再生組織的細胞形態,可將切片分為三 類。

4.3.1 無神經組織細胞

觀察矽膠管中再生組織為白色絲狀物連結兩神經斷端,觀察切片結果,再 生神經組織仍處於模糊不成形結構,其內有纖維細胞、白血球、紅血球等,沒 有神經組織細胞(Schwann 細胞與軸突),且神經外膜、圍神經膜與神經內膜 皆未形成。各組再生神經組織切片中,A 組的 A6 (圖 4.24)屬於此類型。

圖 4.24 無神經組織細胞的再生組織(A6)

大部分仍由纖維組織佔據,有些再生組織中央仍有纖維橋。由 Toluidine 停留在 fibrin matrices 的階段,並無發現 axon 或 Schwann cell。A7 亦找不到軸 突,可見到很厚的神經外膜、血管、紅血球、白血球及纖維母細胞,Schwann cell 多聚集在外圍部份。A4 只見模糊不成形的結構,可見到血管、紅血球、

未髓鞘化的軸突和 Schwann cell。A1 和 A9 皆可見神經外膜、圍神經膜、神經 內膜、血管、紅血球、白血球、軸突和 Schwann cell,A1 有很厚的神經外膜,

內可見纖維母細胞排列,但髓鞘化的軸突較少(圖 4.27),A9 有較多的髓鞘化 軸突和血管存在(圖 4.28)。

B 組中,3 隻大鼠有再生神經組織(B2、B5、B6),切片皆可見到神經外膜、

圍神經膜神經內膜、血管、紅血球、白血球、軸突和 Schwann cell,其中 B2 內髓鞘化軸突數量較少(圖 4.29),而 B5 和 B6 則較多且成熟(圖 4.30、圖 4.31)。

C 組中,4 隻大鼠有再生神經通過(C1、C2、C6、C7),其中皆可見到神經 外圍、圍神經膜、神經內膜、血管、紅血球、白血球、髓鞘化軸突和 Schwann cell。C6 可見到很厚的神經外膜,C2 的血管分布較少,C1 和 C6 的軸突密度 又比 C2、C7 為高(圖 4.32、圖 4.33、圖 4.34、圖 4.35)。

圖 4.25 形成 Schwann 細胞柱的再生神經組織(A4)

圖 4.26 形成 Schwann 細胞柱的再生神經組織(A7)

圖 4.27 A1 的再生神經組織髓鞘化較少

圖 4.28 A9 的再生神經組織較為成熟

圖 4.29 B2 的再生神經組織較為成熟

圖 4.30 B5 的再生神經組織高度成熟化

圖 4.31 B6 的再生神經組織高度成熟化

圖 4.32 C1 的再生神經組織高度成熟化

圖 4.33 C2 的再生神經組織高度成熟化

圖 4.34 C6 的再生神經組織高度成熟化

圖 4.35 C7 的再生神經組織高度成熟化

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