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植物保護系

3. 甘藷病害研究

(1) 甘藷基腐病病原鑑定

本病害於 2008 ~ 2011 年間於台灣之甘藷田陸續發現,受害植株地上部 生長勢衰落、葉片黃化枯萎、藤蔓乾枯死亡,由於乾枯部位緊鄰塊根生長處,

因此導致罹病植株幾乎完全無法生產塊根,且由本病害亦會感染塊根組織部 位 , 造 成 水 浸 狀 影 響 甘 藷 品 質 。 本 研究 自 罹 病 病 株 莖 蔓 分 離 得 到 菌 株 (SPPD-1),以 PDA 培養時,該菌菌絲生長緩慢,於 25℃ 下培養 20 天後,

培養基呈現淡褐色,菌落稍有皺摺、邊緣不整形。本菌會產生兩型分生孢子,

其中一型為單胞、透明無色、圓筒狀或卵形、兩端具有圓形油滴之甲型分生 孢子 (α-conidia),於罹病組織或人工培養過程中皆會產生;另一型則為次紡

錘型,具多細油滴、一端突尖或圓鈍,另端稍呈截頭狀,一邊略彎之丙型分 生孢子 ( γ-conidia),僅偶爾於罹病組織上發現,以 PDA 培養時並未產生絲 狀或一端彎曲之乙型分生孢子。依據本病害之病徵表現、病原菌形態特徵、

分 子 標 記 及 文 獻 資 料 比 對 , 將 此 菌 鑑 定 為 Phomopsis destruens (Harter) Boerema。經人工接種孢子懸浮液於台農 57 號甘藷健康苗後,發現 P.

destruens 對甘藷具有病原性,為引起甘藷基腐病之病原菌。本病害描述及病 原記錄為台灣病害之首報。

(2) 甘藷基腐病之防治策略研究

本病害不僅危害鮮藷用之「台農 57 號」及「台農 66 號」,亦危害葉菜用 甘藷「台農 71 號」,顯示台灣主要栽培的甘藷品種皆不具抗病性,本病原菌 絲生長之最適溫度為 20℃,於 25–30 ℃ 時為分生孢子發芽適溫,而 15–30℃

本病害均會發生。於健康種苗、罹病種苗及病土對甘藷基腐病發生之影響試 驗中,發現罹病種苗種植於健康土中具有 100% 發病率,顯示罹病種苗為本 病害重要感染源之一,因此清潔種苗來源為防治本病害之重要策略。另外,

本研究進行淹水處理對本病害發生之影響評估,結果發現病藷淹水 1 週後即 失去作為感染源之能力,而罹病藤蔓於淹水 2 週以上亦可喪失作為田間感染 源之能力,因此建議發病田區應儘量與水稻輪作,若未能種植水稻仍應執行 淹水 2 週以上,以消滅病藷及罹病殘體上之菌體,避免作為下一期作之感染 源。測試殺菌劑對本菌之菌絲生長及分生孢子發芽影響,結果顯示撲克拉錳、

貝芬依滅列、克熱淨、菲克利腐絕、貝芬撲克拉、滅特座、貝芬菲克利及腐 絕等 8 種藥劑處理皆可有效抑制菌絲生長,而在 10 mg a.i. L-1有效成分濃度 下,賽普護汰寧、撲克拉錳、貝芬依滅列、克熱淨、菲克利腐絕、貝芬撲克 拉、亞托敏、依普同、滅特座、扶吉胺、貝芬菲克利及腐絕等 12 種藥劑皆可

顯著降低病原菌之分生孢子發芽。另於溫室實際應用克熱淨、滅特座、扶吉 胺、貝芬菲克利、腐絕及菲克利腐絕等 6 種化學藥劑進行甘藷基腐病之防治 測試,結果顯示腐絕、菲克利腐絕及貝芬菲克利等 3 種藥劑施用時可顯著抑 制此本病害之發生。進一步瞭解腐絕在藷塊上農藥殘留情形,結果顯示於施 用後 30 d 及 60 d,藷塊之藥劑殘留量皆為 0.1 mg L-1以下,為低殘留藥劑,

從而建議主管機關優先考量以腐絕為供試藥劑進行甘藷基腐病之防治。

(3) 甘藷基腐病菌專一性 PCR 檢測技術之研發

甘藷基腐病菌 P. destruens 之鑑定仍依賴傳統方法,以病原菌之組織分離 及形態特徵為主,不但耗時費力且成功分離出病原菌之比率不高。本分所依 據 P. destruens 之核糖體核酸內轉錄區 (internal transcribed spacer, ITS) 序列 設計專一性引子對,並利用聚合酶連鎖反應 (polymerase chain reaction, PCR) 建立甘藷基腐病菌之檢測技術。結果顯示,本研究開發之檢測方法可專一性 的檢測到 P. destruens,與其他於甘藷塊根上經常分離到之真菌,Lasiodiplodia theobrome (B2225),Phomopsis sp. (Ph735),Rhizopus sp.,Athelia rolfsii (Sc-3) 及 Fusarium sp. (Fu245) 並無反應。此法之靈敏度可達 1 ng 之菌絲 DNA,若 利用巢式 PCR (nested PCR) 則靈敏度可提高至 10 pg 之菌絲 DNA。此外,本 檢測方法亦可運用於分析受感染之甘藷莖部與塊根組織。而此技術於感染植 物組織之檢測成效良好,93%之受感染植物樣本可檢測出病原菌,相較於傳 統鑑定法 (38%) 可大幅提升其檢測成功率。此專一性 PCR 檢測法具有快速、

專一性及靈敏度高之優點,未來可將此技術應用於檢測甘藷是否感染基腐 病。

(4) 甘藷白絹病病原鑑定

甘藷白絹病為 2015 年陸續在彰化、雲林及屏東甘藷栽培田出現之嚴重病

害。其主要病徵為藷塊上產生黃褐色圓型病斑,大多數病斑在甘藷採收後雖 不會繼續擴大,但嚴重影響品質。由病組織所分離之病原菌,培養時產生白 色菌絲,具有扣子體,並會產生褐色菌核 (brown sclerotia),依據形態及分子 鑑定為 Sclerotium rolfsii Sacc.,本菌於 15–35 ℃ 培養時菌絲均會生長,30 ℃ 為最適生長溫度。病原菌不僅在甘藷藷塊造成病斑,亦對葉用甘藷苗具有病 原性,造成幼苗莖基部褐化,植株倒伏,枯死。測試 9 種殺真菌劑對本菌菌 絲之生長抑制情形,結果顯示 50.0% 福多寧 (Flutolanil)、75.0% 滅普寧 (Mepronil) 、 7.5% 依 普 座 (Epoxiconazole) 、 23.0% 菲 克 利 (Hexaconazole) 及 25.0% 賓得克利 (Pencycuron + Btebuconazole) 在 10 mg a.i. L-1有效濃度下對其菌絲生長抑制率均可達 89.2 % 以上。發表國內第 一篇闡明由 S. rolfsii 引起之甘藷白絹病並提供防治藥劑篩選結果之報告,供 農業研究人員參考。

(5) 甘藷採收後病害

為了解甘藷儲藏性病害發生情形,本研究由彰化大城及雲林水林兩地區 採收甘藷中,挑選外觀健康之塊根,於 15 ℃ 恆溫室中儲放 12 wk,儲藏期間 每兩星期調查病害發生情形,並將罹病塊根進行組織分離。彰化大城之甘藷 於 12 wk 時,504 條塊根裡有 436 條發生腐敗情形,雲林水林則是在 500 條 塊根中有 233 條發生腐敗情形。分離出主要的真菌種類有 6 類,包括 Diaporthe batatas,Fusarium spp.,Lasiodiplodia theobromae,Macrophomina phaseolina,

Phomopsis destruens,及其他 Phomopsis spp.。上述分離之真菌經柯霍氏法則 驗證,發現 D. batatas,L. theobromae,M. phaseolina,P. destruens,及其他 Phomopsis sp. 均可造成塊根腐敗,確為甘藷塊根儲藏病原,Fusarium spp. 則 在塊根上未造成任何病徵。本研究之結果,可作為後續篩選甘藷儲藏病害田

間防治藥劑時重要之參考。

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