第三章、 研究方法
第二節、 研究工具
國
立 政 治 大 學
‧
N a tio na
l C h engchi U ni ve rs it y
第三章、研究方法
第一節、研究對象
本研究採立意取樣（purposive sampling）方式，招募成人自願者 20 名。向 自願參與者說明研究目的與程序後，進行初步晤談評估，以篩選符合下列條件的 受試者：
1. 年齡介於 20~30 歲間。由於研究皆顯示酒精代謝速度可能會隨著年齡增 長而變慢（Seitz et al., 1993; Lucey, Hill, Young, Demo-Dananberg, &
Beresford, 1999），因此為了安全考量以及減少發展和老化的因素混淆，
選擇年輕健康成人作為受試者。
2. 無睡眠相關疾患的主觀抱怨，並使用匹茲堡睡眠品質量表（Pittburgh Sleep Quality Index）和接受一晚的多頻道睡眠記錄儀（PSG），以排除 失眠、睡眠相關呼吸疾患（sleep-related breathing disorders）、週期性肢 體抽動症（periodic limb movements disorder）、腿部不寧症候群（restless legs syndrome）等睡眠相關運動疾患或其他明顯睡眠異常狀況。
3. 以迷你國際神經精神醫學面談台灣版（Mini International
Neuropsychiatric Interview）排除酒精或其他物質使用的依賴和濫用疾患，
以及其他精神疾患。
4. 未罹患可能導致睡眠困擾的重大生理疾病，或服用可能影響睡眠之藥 物。
5. 以晤談和酒精生理和心理反應量表評估過去飲酒經驗，排除飲酒後可能 產生嚴重不適或危險行為者。
第二節、研究工具
一、迷你國際神經精神醫學面談台灣版（Mini International Neuropsychiatric
‧ 國
立 政 治 大 學
‧
N a tio na
l C h engchi U ni ve rs it y
Interview，簡稱 MINI）
MINI 為 Lecrubier 和 Sheehan 等人於 1997 年所開發的簡短而結構化的診斷 會談問卷，協助使用者診斷 DSM-IV 和國際疾病與相關健康問題統計分類第十版
（International Statistical Classification of Diseases and Related Health Problems 10th Revision，簡稱 ICD-10）中主要的精神疾患，於 2001 年由台灣精神醫學會 委託李宇宙等人譯成 MINI 台灣版。該問卷內容共有 17 個題組，每組對應
DSM-IV 第一軸向一種診斷類別。每題組由一或二個診斷準則相關問題作為篩檢，
受試者僅須回答「是」或「否」，並針對受試者回答「是」的問題再加以深入追
問其他準則，在該題組結束時迅速判斷出受試者是否符合該項診斷。在信、效度 的相關研究中，目前已完成與 DSM-III-R 的結構化晤談工具 SCID-P（Structured Clinical Interview for DSM-III-R Patients）與 CIDI（Composite International Diagnostic Interview，由世界衛生組織所發展出之 ICD-10 的結構化晤談工具）
的比較，結果發現 MINI 具有良好的信、效度（與 SCID-P 之 kappa 值為.43-.90；
與 CIDI 之 kappa 值為.43-.82）（Lecrubier, et al., 1997;Sheehan, et al., 1997;
Sheehan, et al., 1998），因此本研究採用此量表作為初步晤談評估時篩檢個案精神 疾患的工具。
二、匹茲堡睡眠品質量表（Pittburgh Sleep Quality Index，簡稱 PSQI；附錄一）
本研究於初步晤談時採用 PSQI 評估受試者近期的睡眠狀況，排除睡眠品質 不佳者。此量表為 Buysse, Reynolds, Monk, Berman 與 Kupfer（1989）所發展的 自填式問卷，用以探討受試者最近一個月整體的睡眠品質，其中包含 19 題自填 問題和 5 題由床伴填答的問題，僅前面自填部分列入計分。評估內容包含主觀睡 眠品質、入睡時間、睡眠時數、睡眠效率、睡眠困擾、助眠劑使用和白天功能等 七個向度，每個向度為 0-3 分，總分共 21 分，以總分 5 分為切點，5 分以下表示 睡眠品質佳，大於 5 分表示睡眠品質不佳，分數越高表示睡眠品質越差。此量表 具有良好的再測信度（r=0.85）和內部一致性（Cronbach’s α=0.83），以 5 分為切
‧ 國
立 政 治 大 學
‧
N a tio na
l C h engchi U ni ve rs it y
點時篩選出睡眠困擾的正確率為 88.5%，敏感度為 89.6%，精確度為 86.5%。中 文版匹茲堡睡眠品質量表（Chinese version of the Pittsburgh Sleep Quality Index, CPSQI）的信效度研究亦顯示內部一致性Cronbach’s α 為 0.82-0.83，14-21 天所 有受試者的再測信度為 0.85，原發性失眠者為 0.77。以 5 分為切點時，敏感度為 98%，精確度為 55%；切點為 6 分時，敏感度為 90%，精確度為 67%（Tsai et al., 2005）。故中文版匹茲堡睡眠品質量表對於睡眠品質和睡眠困擾應可作為一有效、
穩定的初步篩檢工具。本研究將在初步評估時排除填答分數大於 5 分的受試者，
以避免受試者本身的不良睡眠品質干擾研究結果。
三、睡眠日誌（Sleep Diary）（附錄二）
本研究採用睡眠日誌檢視受試者在進入研究前約一週的睡眠型態，以確認受 試者的作息規律，排除失眠、睡眠剝奪、使用藥物、白日過度躺床等狀況。由受 試者自行標記出每日主觀的入睡時間、入睡後醒來的總時間、起床時間等，並以 五點量尺評估睡眠品質和白天精神狀態，註記有無使用藥物或發生影響睡眠的生 活事件。
四、睡前激發程度量表（Pre-Sleep Arousal Scale，簡稱 PSAS；附錄三）
由 Nicassio、Mendlowitz、Fussell 和 Petras（1985）編制的 PSAS 為一包含 16 題的自陳式量表，目的在評估睡前認知和生理兩向度所表現出的激發程度。
每題由五點量尺評估對該題描述的感覺強烈程度，前 8 題為生理激發分量表，反 映出如心跳、肌肉緊繃、呼吸困難等身體上的症狀；後 8 題為認知激發分量表，
評估入睡前的擔心、思想清楚活躍等心理上的感覺。信效度研究結果顯示，此量 表使用在正常睡眠者和失眠者上皆具有良好的內部一致性，生理激發分量表的 Cronbach’s α 介於 0.79 - 0.84，認知激發分量表的 Cronbach’s α 介於 0.67 - 0.88。
效標關聯效度顯示 PSAS 能有效測得情緒性過度激發，並能有效區辨認知和身體 激發程度(Nicassio, Mendlowitz, Fussell, & Petras, 1985)。中文版 PSAS 量表亦具
‧ 國
立 政 治 大 學
‧
N a tio na
l C h engchi U ni ve rs it y
有良好的內部一致性（全量表Cronbach’s α 在失眠者為 0.88，正常者為 0.89），
區辨效度亦顯示 PSAS 能呈現失眠者和正常者睡前的認知和生理激發差異（詹雅 雯、陳昌偉、楊建銘、林詩淳，2009）。本研究將以此量表評估受試者在飲酒和 未飲酒的情境下，睡前的主觀生理和認知激發程度。
五、多頻道睡眠記錄儀（Polysomnograph，簡稱 PSG）
本研究使用 PSG（ResMed，USA，取樣頻率為 500Hz）進行 3 天夜間睡眠 參數的紀錄，依據美國睡眠醫學會所出版的睡眠和相關事件判讀工作手冊（Iber, Ancoli-Israel, Chesson, & Quan, 2007）收集和分析以下電極訊號：
（1）腦電圖（electroencephalograph，簡稱 EEG）：電極位置根據 Jasper（1958）
所提出的 10-20 腦波電極配置法（International 10-20 system）定位，黏貼頭 部左右側的中央區（C3 和 C4）、前額區（F3 和 F4）、頭後區（O1 和 O2）
共 6 個，參考電極為左右耳耳後突骨（A1 和 A2）等電極。記錄時取樣率 為每秒 200 次，濾波值（filter）設定低頻為 0.3 Hz、高頻為 35 Hz。
（2）眼動圖（electrooculogram，簡稱 EOG）：黏貼於右外眼角上方 1 公分和左 外眼角下方 1 公分，記錄眼球水平及上下的活動。
（3）肌電圖（electromyogram，簡稱 EMG）：透過 3 個電極記錄下顎的肌肉活動 情形，以及左右各 2 個電極記錄小腿脛骨處的肌肉活動情形。
（4）心電圖（electrocardiogram，簡稱 ECG）：於右側鎖骨下方和左側鎖骨外側 下方處黏貼電極，記錄心跳變化的情形。
（5）呼吸氣流（nasal airflow）：在鼻子下方接上口鼻溫度熱電阻感應器（thermistor sensor）和鼻腔壓力轉能器（nasal pressure transducer），記錄呼吸氣流狀況。
（6）胸部和腹部呼吸動作（chest and abdomen respiratory effort）：各於受試者胸 部和腹部繫上呼吸綁帶，利用其中的電流感應器測量呼吸時胸腔和擴張的 情形。
（7）血氧飽和度（oximetry）：將脈動血氧計（pulse oximeter）固定於受試者手
‧ 國
立 政 治 大 學
‧
N a tio na
l C h engchi U ni ve rs it y
指頭，測量動脈血液中氧化血色素百分比的變化情形。
頭部 EEG、EOG、EMG 訊號的電極阻抗值必須小於5000Ω，以 30 秒為一 頁的單位判讀睡眠階段和腦波覺醒等主要的睡眠參數；由左右小腿的肌肉活動排 除週期性肢體抽動症之可能性；由呼吸氣流、胸腹呼吸動作和血氧飽和度排除睡 眠呼吸中止症之可能性。
六、酒精生理和心理反應量表（附錄四）
主觀感覺的變化是酒精在神經生物及神經藥物生理的整體性反應，對酒精的
感覺好壞直接影響到酒精的攝取量和飲酒頻率（Kalant, 1966）。此量表參考過去 酒精敏感性研究和酒精主觀感覺評估的相關文獻編制而成，量表共 17 個題目，請受試者以 0 至 10 的 11 點量尺評量飲酒後各反應的嚴重度。量表主要分為「生 理負向反應」和「心理正向反應」兩個向度，前者包含心跳變快、臉部或皮膚泛 紅、噁心嘔吐、頭暈和想睡等 12 項偏生理的負向酒精反應，後者則包括愉悅感、
頭腦清晰感、放鬆感等 5 項較正向的心理反應。因素分析顯示兩向度內各題目的 因素負荷量介於 0.4-0.9 間，在飲用不同酒精劑量或使用不同酒精濃度再測下亦 有一致的結果，顯示此量表具良好的效度，兩向度組成的題目間亦有良好的內部 一致性（Cronbach’s α > 0.8）（Chen, 1999; Chen et al., 2009）。本研究為了比較不 同 ALDH2 基因型受試者在飲酒後生理和心理的主觀感覺，因此採用酒精生理和 心理反應量表評估受試者在飲酒前後的變化，並與其對睡眠的主觀感覺和實際的 睡眠狀況對照。
七、酒精材料
由於具 ALDH2*2 基因者會在飲酒後造成血液中乙醛堆積，產生不舒服的反 應，而 Wall、Thomasson、Schuckit 及 Ehlers（1992）曾以每公斤體重 0.5 克酒精 的中等劑量測試，使 ALDH2*2/*2 者產生明顯血壓降低、嘔吐等現象，Peng 等 人（2002）也發現每公斤 0.3 克酒精的劑量即可引發 ALDH2*1/*2 者在心跳和面
‧ 國
立 政 治 大 學
‧
N a tio na
l C h engchi U ni ve rs it y
部血流量的明顯反應。因此基於安全和倫理考量，本研究採用每公斤體重 0.3 克 酒精的相對低劑量測試。考慮飲用的口感、濃度和飲用量，以通寧水（tonic water）
和伏特加（Smirnoff Vodka，標示酒精濃度 40%，製造商為 Diageo Korea Company Limited，批號為 3105372230）調製成濃度 12%的酒精飲料。以體重 60 公斤之受 試者為例，在飲酒情境當晚將大約飲用 190 毫升的酒精飲料，在基礎情境則飲用 相同量的通寧水，並先以伏特加溼潤杯口，以減少受試者的預期所可能產生的影 響。
八、ALDH2 基因檢測 1. 檢體收集
本研究委託具護理師執照之專業抽血人員，自受試者前臂區靜脈抽取靜脈血 約 10 ml，置於含 EDTA（Ethylenediaminetetraacetates）抗凝血劑的真空集血管中，
並置入–20 °C的冷凍裝置中暫存。 2. 萃取白血球 DNA
本研究委託明欣生物科技有限公司（Mission Biotech，Taiwan）進行基因型 鑑定。所收集之檢體以 MagNA Pure Compact Nucleic Acid Isolation Kit（Roche，
Switzerland）萃取出白血球 DNA，並以超微量分光光度計（Nanodrop ND-1000，
USA）測定 DNA 濃度。將萃取出的 DNA，根據以下引子（primers）進行聚合 酶鏈鎖反應（polymerase chain reaction，簡稱 PCR）放大所需的 ALDH2 片段：
ALDH2-F：TTGGTGGCTACAAGATGTCG ALDH2-R：CAGCAGGTCCTGAACTTCCA ALDH2-seqR：GTCCTGAACCTCTGGCAG 3. 以 PCR 增幅 DNA 片段
將 10ng 上述所萃取之 DAN，加入 Platinum PCR SuperMix High Fidelity
（Invitrogen，USA）達 50 µL。所使用之 PCR 機器為 PCR System 9700 Thermal Cycler（Applied Biosystems，USA），反應步驟設定為：先於 94°C 維持 3 分鐘，