第一節 串聯式質譜儀脂肪酸代謝物 (C4-OH) 含量
突變小鼠飼養至 8-10 週大後，採其尾靜脈全血 25μL 點於血卡送到 杜 克 大 學 及 中 國 醫 學 大 學 ， 以 串 聯 式 質 譜 儀 作 脂 肪 酸 代 謝 物 含 量 (acylcarnitine) 分析，其 C3-C5 短鏈脂肪酸的分析結果整理於表一，結果 顯示 ENU 突變小鼠其體內 C4-OH 含量較正常小鼠高約 4 倍標準差，而 其他 C3-C5 的短鏈脂肪酸的值皆為正常。此外，突變小鼠外觀與正常小 鼠並無差異，可正常繁衍後代，裸鼠存活率、小鼠不同週數成長重量及 最終壽命，兩組間亦無統計上的差異。
第二節 SDS-PAGE 實驗結果
萃取出的正常小鼠及突變小鼠肝臟及肌肉組織的粒線體蛋白質，利 用 SDS-PAGE 觀察其差異表現的蛋白質，結果顯示正常小鼠及突變小 鼠，其不論是在肝臟組織或是肌肉組織的粒線體蛋白質，在此部分的實 驗中並沒有差異的蛋白質表現，其結果如圖七。
第三節 二維電泳實驗結果
以 正 常 小 鼠 及 突 變 小 鼠 肝 臟 及 肌 肉 組 織 的 粒 線 體 蛋 白 質 進 行 SDS-PAGE，並沒有得到差異的蛋白質表現。因此進一步利用二維電泳法 (2-DE) 尋找差異的蛋白質點。在二維電泳 (2-DE) 的部分，先以 pH 3-10 的等電點聚焦膠條，觀察其差異表現的蛋白質點。結果顯示正常小鼠與 突變小鼠肝臟組織的粒線體蛋白質之間，在此實驗中沒有顯著差異的蛋 白質點表現，其結果如圖八、圖九。而在肌肉組織方面，結果顯示正常 小鼠與突變小鼠在此實驗中有顯著差異的蛋白質點，其結果如圖十、圖 十一。然而因為這些差異的蛋白質點，其範圍比較偏近 pI 值較低的區域 部分，因而針對正常小鼠及突變小鼠肌肉組織的粒線體蛋白質部份，再 進一步的窄縮等電點聚焦膠條的範圍至 pH 4-7，將蛋白質點分離的更 開，更易觀察，其結果如圖十二、十三。
第四節 蛋白質身份鑑定結果
針對正常小鼠及突變小鼠的肌肉組織粒線體蛋白質二維電泳結果 圖，重複多次實驗，先利用肉眼觀察，不管是蛋白質點的數目或者是點 分布情況具有再現性後，續將這些 2-D gel 做影像處理及分析，找出差異 較明顯的 11 個蛋白質點，且差異蛋白質量皆在兩倍以上，經量化後的數 據見表二。比對分析 11 個差異的蛋白質點中發現，強度增加的蛋白質點 有 5 個，強度減少的蛋白質點有 6 個。將這 11 個差異的蛋白質點以
MALDI-Q-TOF 或是 MALDI-TOF-TOF 做蛋白質的身份鑑定，其比對出 來的蛋白質點身份如表二所示，其原始資料見附錄一。依據各個蛋白質 點其等電點的理論值和測得的分子量，對照其實際在二維電泳膠片的位 置，結果吻合。鑑定出的結果 spot 4-6 依序為 myosin regulatory light chain 2 (phosphorylatable)，spot 7 為 tropomyosin 1αchain，spot 9 為 myosin light chain 1，以上 5 個蛋白質點為在突變鼠表現量是增加的。spot 1-3 為 Calsequestrin-1 precursor，spot 8 為 myosin regulatory light chain 2， spot 10 為 adenylate kinase isoenzyme 1，spot 11 為 ATP synthase D chain，以上 6 個蛋白質點為在突變鼠表現量是減少的。