本 研 究 嘗 試 以 脈 衝 式 電 泳 基 因 分 型 結 果 ， 分 析 K.
pneumoniae 於 臨 床 的 感 染 上 所 代 表 的 意 義 和 可 能 的 感 染 因 素 。 所 有 的 485 株 K. pneumoniae 菌 株 均 進 行 脈 衝 式 電 泳
（ PFGE） 及 黏 液 性 試 驗 （ String test）， 並 以 BioNumerics software (BioNumerics version 3.00 ; Applied Maths, Kortrijk, Belgium)分 析 脈 衝 式 電 泳 K. pneumoniae DNA 的 分 型 ； 在 比 較 圖 譜 資 料 庫 中 ， 485 株 K. pneumoniae 菌 株 在 80%相 似 度 條 件 下 ， 共 可 分 為 8 個 族 群 ， 因 此 ， 我 們 先 比 較 不 在 族 群 內 及 在 族 群 內 （ non-cluster and cluster） 菌 株 的 黏 液 性 試 驗 是 否 具 有 差 異 性 ， 再 依 序 分 析 同 一 菌 株 族 群 內 及 不 同 菌 株 族 群 間 （ intra-cluster and inter -cluster）， 病 患 之 性 別 、 年 齡 、 細 菌 來 源 及 特 性 、 糖 尿 病 、 肝 硬 化 、 感 染 來 源 等 多 變 項 因 素 之 間 的 相 關 性 。
一 、 菌 株 資 料 分 析
本 研 究 共 收 集 臨 床 K. pneumoniae 菌 株 485 株 ， 檢 體 來 源 包 括 膿 液 、 血 液 、 痰 液 、 體 液 、 膽 汁 等 ， 所 有 菌 株 均 檢 測 其 黏 液 性 的 高 低 ， 得 到 的 結 果 為 低 黏 液 性 341 株 佔 所 有 菌 株 的 70.3%， 高 黏 液 性 144 株 佔 29.7%（ 表 一 ）。
二 、 分 析 PFGE 圖 譜 資 料 庫 與 黏 液 性 的 相 關 性 1. cluster 和 non-cluster 與 黏 性 的 分 析
以 上 結 果 顯 示 低 黏 液 性 的 K. pneumoniae 菌 株 佔 所 有 收 集 菌 株 的 70.3%（ 341/485）， 進 一 步 統 計 分 析 PFGE 圖 譜 資 料 庫 的 基 因 分 型 與 485 株 菌 其 黏 液 屬 性 的 相 關 性 ， 發 現 non-c luster 中 的 低 黏 液 性 菌 株 明 顯 多 於 高 黏 液 性 菌 株（ 80.4%
vs. 19.6% ； χ
2
= 47.055， P ＜ 0.001）， 但 在 cluster 內 的 菌 株 其 黏 性 的 高 或 低 則 並 無 統 計 上 之 差 異 （ 50.3% vs. 49.7%；P = NS； 圖 一 ）。
2. cluster A、 A’、 B、 C、 D、 D’、 E、 F 的 黏 液 性 分 析 以 Xba I 限 制 ? 同步消 化 切 割 臨 床 分 離 菌 株 及 美 國 CDC 標 準 菌 株 H9812 後，將 PFGE 的 結 果 經 Bio Numerics 電 腦 軟 體 分 析 ， 在 80%相 似 度 的 條 件 下 分 出 8 個 不 同 的 clusters，
即 A、 A’、 B、 C、 D、 D’、 E 及 F， 其 中 A’和 D’則 與 A、 D 有 70%相 似 度 （ 圖 二 、 表 二 ）， 我 們 所 探 討 不 同 的 cluster 是 否 有 黏 液 性 表 現 的 差 異 ， 結 果 發 現 ， clusters A’、 D、 D’的 菌 株 其 String test 陰 性 與 陽 性 比 例 各 為 26.7%及 73.3%（ 4/15，
11/15），18.8%及 81.3%（ 3/16 ，3/16），16.7%及 83.3%（ 1/6，
5/6）， 高 黏 液 性 菌 株 比 低 黏 液 菌 株 多 ； 而 clusters A、 B、 C
的 菌 株 ， 其 陰 性 與 陽 性 比 例 則 為 50.8%及 49.2%（ 32/63，
31/63），56.3%及 43.8%（ 9/16，7/16）， 40.9%及 59.1%（ 9/22，
13/22）， 高 黏 液 性 菌 株 和 低 黏 液 菌 株 無 明 顯 差 異 ；另 一 方 面 ， clusters E、 F 的 菌 株 其 String test 陰 性 與 陽 性 比 例 是 84.6%
及 15.4%（ 11/12， 1/12）， 84.6%及 15.4%（ 11/13， 2/13），
低 黏 液 性 菌 株 比 高 黏 液 菌 株 多 ， 因 此 ， 不 同 的 cluster 在 菌 株 的 黏 性 表 現 具 有 統 計 上 明 顯 的 差 異 ， χ
2
= 27.695， P < 0.001（ 圖 三 ）。
三 、 族 群 之 黏 液 特 性 和 感 染 來 源 的 相 關 性
黏 性 和 院 內 、 院 外 感 染 間 相 關 性 的 分 析 ， 首 先 排 除 在 cluster 內 非 造 成 感 染 的 菌 株 後 ， 共 有 129 株 ， 院 外 感 染 有 95 株 佔 73.6%， 院 內 感 染 則 有 34 株 佔 26.4%， 比 較 菌 株 黏 性 和 院 內、院 外 感 染 是 否 有 關，在 95 株 院 外 感 染 菌 株 中 String test 陰 性 與 陽 性 比 為 47.4%及 52.6%（ 45/95， 50/95）， 34 株 院 內 感 染 菌 株 比 為 44.1%及 55.9%（ 15/34， 19/34）， 因 此 ， 由 結 果 顯 示 cluster 內 以 院 外 感 染 菌 株 較 多 ；而 黏 性 和 不 同 感 染 來 源 菌 株 則 並 無 統 計 上 的 差 異 χ
2
= 0.106， P = 0.744（ 表 三 ）； 分 析 cluster A 中 每 一株菌其黏性和感染來源間的相關性，區 分 其 黏 液 性 高 低 和 院 內 或 院 外 感 染 是 否 有 一 致 的 相 關 性 ， 分析 結 果 顯 示 其 P 值 為 0.947， 無 明 顯 的 相 關 性 。 另 外 ， 在 分 析 各 cluster 檢 體 來 源 和 黏 性 關 係 的 結 果 顯 示 ，並 無 統 計 上 之 顯 著 意 義 （ χ
2
= 39.165， P = 0.78）， 但 比 較 其 他 檢 體 和 血 液 分 離 出 的 K. pneumoniae 菌 株 黏 性 ， 非 血 液 檢 體 其 String test 陰 性 與 陽 性 比 為 51.4%及 48.6%（ 76/148， 72/148）， 血 液 檢 體 為 26.7%及 73.3%（ 4/15， 11/15）χ2
= 3.321， P = 0. 0 6 8 ， 無 顯 著 意 義 但 有 菌 株 較 黏 的 趨 勢 （ 圖 四 ）四 、 K. pneumoniae 在 糖 尿 病 病 患 的 致 病 因 子 分 析
cluster 內 的 菌 株 共 有 163 株 ， 3 株 感 染 的 病 人 無 法 確 定 是 否 有 糖 尿 病 ， 其 餘 160 株 以 糖 尿 病 和 String test 做 交 叉 比 對 的 結 果 ， 無 DM 者 其 String test 陰 性 與 陽 性 比 為 48.9%及 51.1%（ 45/92， 47/92）， 有 DM 者 為 49.2%及 50.8%（ 32/65 ， 33/65） χ
2
= 0.292， P = 0.864（ 表 四 ）， 在 不 同 cluster 的 糖 尿病比例，只有 cluster D 和 clus ter F 糖 尿 病 比 非 糖 尿 病 多 ， 其 他 六 個 cluster 則 是 非 糖 尿 病 多 χ2
= 14.546，P = 0.410（ 表 五 ）， 兩 者 均 無 統 計 上 之 差 異 ； 在 DM 和 院 內 、 院 外 感 染 間 相 關 性 的 分 析 方 面 ， 比 較 在 cluster 內 的 129 株 菌 DM 和 院 內 、 院 外 感 染 是 否 有 關 ， 在 95 株 院 外 感 染 菌 株 中 DM 陰 性 與 陽 性 比 為 47.4%及 52.6%（ 45/95， 50/95）， 34 株 院 內 感 染菌 株 比 為 76.5%及 23.5%（ 26/34， 8/34）， 因 此 ， 由 結 果 得 知 cluster 內 以 院 外 感 染 菌 株 較 多 （ χ
2
= 21.179， P < 0.001）；而 在 院 外 感 染 的 分 析 中 DM 與 否 是 無 差 異 的 ， 但 在 院 內 感 染 無 糖 尿 病 組 明 顯 多 於 糖 尿 病 組 有 統 計 上 的 差 異 χ
2
= 8.570，P= 0.003；分 析 cluster A 中 每 一 株 菌 其 DM 和 感 染 來 源 間 的 相 關 性 ， 區 分 DM 和 院 內 或 院 外 感 染 是 否 有 一 致 的 相 關 性 ， 以 雙 變 相 相 關 統 計 分 析 結 果 顯 示 其 P = 0.114， 沒 有 明 顯 的 相 關 性 （ 表 六 ）。
五、K. pneumoniae 在 肝 硬 化 、 肝 炎 及 肝 膿 瘍 病 患 的 致 病 因 子 分 析
cluster 內 的 菌 株 共 有 163 株 ， 來 自 於 肝 硬 化 患 者 菌 株 有 16 株 ， 肝 炎 6 株 ， 肝 膿 瘍 24 株 和 String test 做 交 叉 比 對 的 結 果 ， 肝 硬 化 、 肝 炎 及 肝 膿 瘍 患 者 其 String test 陰 性 與 陽 性 比 為 37.5%及 62.5%； 50.0%及 50.0%； 33.3%及 66.7%
（ 6/16，10/16；3/6，3/6；8/24，16/24），χ
2
= 4.305, P = 0.230，三 者 均 無 統 計 上 之 差 異 ； 分 析 在 所 有 cluster 中 包 含 其他疾病、
肝 硬 化 、 肝 炎 、 肝 膿 瘍 的 菌 株 分 佈 情 形 ， 結 果 顯 示 在 不 同 疾 病 類 別 中 其 他 疾 病 、 肝 硬 化 、 肝 炎 、 肝 膿 瘍 所 佔 的 比 例 各 為 71.8% 、 9.8% 、 3.7%及 14.7% （ 117/163， 16/163， 6/163，
24/163）， 而 肝 硬 化 雖 只 佔 所 有 cluster 菌 株 中 的 9.8%， 在 8 個 不 同 cluster 中 ， cluster A’的 肝 硬 化 菌 株 則 佔 了 37.5%
（ 6/16）， 但 在 cluster A’的 各 種 疾 病 中 肝 硬 化 菌 株 即 佔 了 40.0%（ 6/15）； 肝 炎 只 佔 所 有 cluster 菌 株 中 的 3.7%， 但 在 8 個 cluster 中 ， cluster A 的 肝 炎 菌 株 則 佔 了 66.7%（ 4/6）， 從 分 析 結 果 顯 示 ， 疾 病 在 K. pneumoniae 的 cluster 間 是 有 統 計 上 的 差 異 （ χ
2
= 34.176， P = 0.035， 表七）。 從 分 離 出 K.pneumoniae 的 檢 體 來 源 和 疾 病 間 的 分 析 結 果 顯 示 ， 從 8 個 clusters 內 由 血 液 及 體 液 分 離 出 K. pneumoniae 的 比 例 中 肝 硬 化 即 各 佔 了 所 有 檢 體 來 源 的 37.5%及 31.3%（ 6/16， 5/16， χ
2
= 74.038， ***P < 0.001）， 顯 示 肝 硬 化 和 分 離 出 菌 株 的 檢 體 來 源 間 具 有 統 計 上 的 差 異 （ 表 八 ）； 而 肝 硬 化 患 者 所 分 離 出 之 K. pneumoniae 菌 株 分 析 從 其 它 檢 體 和 血 液 檢 體 中 分 離 出 的 K. pneumoniae 菌 株 在 8 個 clusters 的分布情形，結果顯示 血 液 檢 體 中 A’即 佔 了 40%（ 6/15） 具 有 統 計 上 的 顯 著 意 義 χ2
= 22.924， **P = 0.002（ 表 九 ）， 另 外 ， 在 糖 尿 病 患 者 分 離 出 的 K. pneumoniae 和 疾 病 間 的 關 係 分 析 中 顯 示 ， 疾 病 和 糖 尿 病 並 無 統 計 上 的 差 異 ， 雖 然 肝 硬 化 患 者 感 染 K. pneumoniae 以 非 糖 尿 病 病 患 多 16.7%及 4.6%（ 13/16, 3/16）， 但 肝 炎 2.6%及 4.6%（ 2/5, 3/5）， 肝 膿 瘍 9.0%及 21.5%（ 7/21， 14/21） 則 以 糖 尿 病 病 患 所 分 離 出 之 K. pneumoniae 菌 株 多 ， 統 計 上 並 無 顯 著 差 異 χ
2
= 10.295, P = 0.113（ 表 十 ）； 在 肝 硬 化 和 院 內 、 院 外 感 染 間 相 關 性 的 分 析 方 面 ， 以 clusters 內 163 株 菌 排 除 不 確 定 感 染 源 的 11 株 菌 後 ， 分 析 152 株 菌 的 結 果 ， 在 16 株 肝 硬 化 菌 株 中 有 1 株 無 法 判 定 感 染 源 ， 院 外 感 染 佔 66.7%（ 10/16）、 院 內 感 染 佔 33.3%（ 5/16）， 肝 炎 的 院 外 、 院 內 感 染 比 例 分 析 結 果，無 感 染 33.3%（ 2/6）、院 外 感 染 66.7%（ 4/6）、 院 內 感 染 0%（ 0/6）， 肝 膿 瘍 的 院 外 、 院 內 感 染 比 例 為 95.7%及 4.3%（ 22/23，1/22）；χ
2
= 22.916，P = 0.001（ 表 十 一 ）， 結 果 顯 示 在 肝 臟 疾 病 尤 其 是 肝 膿 瘍 ， 疾 病 和 院 外 、 院 內 感 染 的 分 析 具 有 統 計 上 之 顯 著 差 異 ； 而 年 齡 與 性 別 和 分 離 菌 株 的 關 係 則 和 肝 硬 化 好 發 年 齡 51~70 歲 及 性 別 男 性 居 多 相 似 。六 、 不 同 clusters 的 可 能 致 病 因 子 之 分 析
以 不 同 的 cluster 分 別 與 性 別 、 年 齡 、 檢 體 來 源 等 做 分 析，其結果：性別在不同 cluster 有 高 低 比 例 上 的 不 同 ， 但 各 clusters 女 性 均 比 男 性 低 為 31.9% 及 68.1% （ 52/163 ， 111/163），χ
2
= 5.452，P = 0.605； 年 齡 區 分 為 1~10，11~30，31~50，51~70，70~，共 五 個 區 隔，菌 株 分 佈 比 例 3.1%（ 5/160）， 4.4% （ 7/160）， 35.6% （ 57/160 ）， 31.3% （ 50/160 ）， 25.6%
（ 41/160）， 結 果 可 見 31~50 及 51~70 歲 即 佔 了 總 菌 株 的 66.9% ； 檢 體 以 膿 液 、 血 液 、 痰 液 、 體 液 及 膽 汁 五 類 來 源 統 計分析，分離比例為 39.9%（ 65/163）, 9.8%（ 16/163）, 27.0%
（ 44/163） , 17.2%（ 28/163） , 6.1%（ 10/163） ,以 從 膿 液 分 離 出 K. pneumoniae 菌 為 最 多 、 膽 汁 最 少 、 血 液 培 養 則 僅 多 於 膽 汁 的 K. pneumoniae 分 離 率 ， 前 三 項 分 析 結 果均 無 統 計 上 之 差 異 （ 表 十 二 ）； 分 析 K. pneumoniae 在 院 外 、 院 內 感 染 的 血 液 檢 體 分 離 率 。 8 個 clusters 的 163 株 菌 ， 排 除 臨 床 病 歷 分 析 後 判 定 無 感 染 的 41 株菌，以 122 株 K. pneumoniae 之 血 液 檢 體 分 離 率 分 析 院 外、院 內 感 染 情 形，結 果 為 80%及 20%
（ 12/15, 3/15）， χ
2
= 0.343， P = 0.558（ 表 十 三 ）， 無 統 計 上 之 差 異 。 各 個 clusters 的 血 液 檢 體 分 離 率 各 為 13.3%（ 2/15）， 40.0%（ 6/15）， 13.3%（ 2/15）， 6.7%（ 1/5）， 6.7%
（ 1/15），6.7%（ 1/15），0%（ 0/15），13.3%（ 2/15）， 而 以 cluster A’40% （ 6/15）， χ