3.1 人蔘癒傷組織增殖率
第一組(0.5 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L TDZ)癒傷組織,對照組平均增 殖率 5.78 倍,癒傷組織狀態鮮黃色結實。添加 100mg/L AA 增殖率提高 最多 9.17 倍,提高 58%,癒傷組織狀態潮濕金黃色結實。50 mg/L PVP 次之,增殖率提高至 7.71 倍,提高 33%癒傷組織狀態金黃色結實,但處 理濃度至 100 mg/L 增殖率為 6.91 倍上升 21%,但無顯著差異(表 3.1、
圖 3.1),癒傷組織狀態金黃色結實(圖 3.4)。
第二組(0.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ)癒傷組織,對照組平均 6.3 倍,癒傷組織狀態金黃色米粒狀。添加 50mg/L AA 增殖率上升最多 13.69 倍,提升 117%,癒傷組織狀態金黃色結實粒狀,但處理濃度至 100 mg/L 增殖率卻下降至 8.67 倍,癒傷組織狀態淡黃色結實粒狀。50 mg/L PVP 次之,增殖率 12.06 倍上升 91%,癒傷組織狀態金黃色結實粒狀,但處 理濃度至 100 mg/L 時和 AA 處理情況相同增殖率有明顯下降至 10.06 倍
(表 3.2、圖 3.2),癒傷組織狀態淡黃色米粒狀(圖 3.5)。
第六組(2 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ)癒傷組織:對照組平均 2.27 倍,癒傷組織狀態白色鬆軟;添加 50mg/L PVP 增殖率上升最多增殖率 7.1 倍,上升 213%,癒傷組織狀態白色結實;50 mg/L AC 次之,增殖率 6.17 上升 171%,癒傷組織形態白色結實塊狀;100 mg/L(表 3.3、圖 3.3), 癒傷組織形態白色結實塊狀(圖 3.6)。
17
3.2 人蔘癒傷組織之試管內形態發生
狀(表 3.8、圖 3.12);kinetin + IBA 處理癒傷組織也為綠色塊狀(表 3.8、
圖 3.13)。
第六組(2 mg/L 2,4-D + 0.5)癒傷組織 PGR-free 對照組中,癒傷組 織皆逐漸褐化(表 3.10、圖 3.15)。BA + IBA 組別癒傷組織轉綠且成塊 狀。以 0.02 mg/L kinetin + 3 mg/L NAA 處理之組別,五個月後平均每個 培植體生成 6.34 條根,根長 5.11 公厘(表 3.11、圖 3.16)。
19
表 3.1 第一組人蔘癒傷組織增殖率(AA:ascorabic acid、AC:activated charcoal、
PVP: polyvinylpyrrolidone;Data represent means±SE of three experiments. Means with the same letter are not significantly different (P<0.05))
Chemical additives
Treatments (mg/L)
Explant numbers
Proliferation rate Control 0 10 5.78±0.22 c*
AA 50 10 5.63±0.19 c AA 100 10 9.14±0.38 a AC 50 10 5.6±0.48 c AC 100 10 4.9±0.44 c PVP 50 10 7.71±0.59 b PVP 100 10 6.97±0.14 b
20
表 3.2 第二組人蔘癒傷組織增殖率(AA:ascorabic acid、AC:activated charcoal、
PVP: polyvinylpyrrolidone;Data represent means±SE of three experiments. Means with the same letter are not significantly different (P<0.05))
Chemical additives
Treatments (mg/L)
Explant numbers
Proliferation rate Control 0 10 6.3±0.19 c
AA 50 10 13.69±0.34 a AA 100 10 8.67±0.44 b AC 50 10 6.18±0.22 c AC 100 10 6.68±0.48 c PVP 50 10 12.06±1.46 a PVP 100 10 10.06±0.07 b
21
表 3.3 第六組人蔘癒傷組織增殖率(AA:ascorabic acid、AC:activated charcoal、
PVP: polyvinylpyrrolidone;Data represent means±SE of three experiments. Means with the same letter are not significantly different (P<0.05))
Chemical additives
Treatments (mg/L)
Explant numbers
Proliferation rate Control 0 10 2.27±0.22 b
AA 50 10 2.25±0.19 b AA 100 10 2.77±0.02b AC 50 10 6.17±0.22 a AC 100 10 2.93±0.57 b PVP 50 10 7.1±0.48 a PVP 100 10 3.7±0.85 b
22
表 3.4 Kinetin 與 NAA 對第一組癒傷組織形態發生之影響(二個月)
Treatments (mg/L) Explant numbers
Color of callus Kinetin NAA
0.02 1 5 Brown
0.02 3 5 Brown
0.02 10 5 Green
0.1 10 5 Green
1 1 5 Green
1 3 5 Green
1 10 5 Green
23
表 3.5 植物調節劑和 PVP 對第一組癒傷組織形態發生之影響(二個月)
Treatments Cytokinin Auxin PVP Explant numbers
Color of callus (mg/L) (mg/L) (mg/L)
0 0 100 5 Brown
Kinetin+NAA 0.02 1 100 5 Brown
0.02 3 100 5 Brown
0.02 10 100 5 Green
0.1 10 100 5 Green
1 1 100 5 Green
1 3 100 5 Green
1 10 100 5 Green
Kinetin+IBA 0.02 3 100 5 Green
0.1 1 100 5 Green
0.1 3 100 5 Green
24
表 3.6 植物調節劑對第一組癒傷組織形態發生之影響(二個月)
Treatments Cytokinin Auxin Explant numbers
Color of callus (mg/L) (mg/L)
0 0 5 Brown
Kinetin+IBA 0.02 3 5 Green
0.1 1 5 Green
0.1 3 5 Green
Kinetin+2,4-D 0.02 1 5 Green
0.02 3 5 Green
1 1 5 Green
1 3 5 Green
BA+IBA 0.02 1 5 Green
0.02 2 5 Green
0.1 1 5 Green
0.1 2 5 Green
25
表 3.7 Kinetin 與 NAA 第二組對癒傷組織形態發生之影響(二個月)
Treatments (mg/L) Explant numbers
Color of callus Kinetin NAA
0.02 1 5 Brown
0.02 3 5 Brown
0.02 10 5 Green
0.1 10 5 Green
1 1 5 Brown
1 3 5 Green
1 10 5 Green
26
表 3.8 植物調節劑和 PVP 對第二組癒傷組織形態發生之影響(二個月)
Treatments Cytokinin Auxin PVP Explant numbers
Color of callus (mg/L) (mg/L) (mg/L)
0 0 100 5 Brown
Kinetin+NAA 0.02 1 100 5 Green
0.02 3 100 5 Green
0.02 10 100 5 Green
0.1 10 100 5 Green
1 1 100 5 Green
1 3 100 5 Green
1 10 100 5 Green
Kinetin+IBA 0.02 3 100 5 Green
0.1 1 100 5 Green
0.1 3 100 5 Green
27
表 3.9 植物調節劑對第二組癒傷組織形態發生之影響(二個月)
Treatments Cytokinin Auxin Explant numbers
Color of callus (mg/L) (mg/L)
0 0 5 Brown
Kinetin+IBA 0.02 3 5 Green
0.1 1 5 Green
0.1 3 5 Green
Kinetin+2,4-D 0.02 1 5 Green
0.02 3 5 Green
1 1 5 Green
1 3 5 Green
BA+IBA 0.02 1 5 Green
0.02 2 5 Brown
0.1 1 5 Brown
0.1 2 5 Brown
28
表 3.10 第六組 BA 與 IBA 對癒傷組織形態發生的影響(二個月)
Treatments (mg/L) Explant numbers
Color of callus
BA IBA
0 0 5 Brown
0.02 1 5 Brown
0.02 2 5 Green
1 1 5 Brown
1 2 5 Green
29
表 3.11 第六組 Kinetin 與 NAA 對癒傷組織形態發生的影響(五個月)
Treatments (mg/L) Explant numbers
Root number
Length Kinetin NAA (mm)
0.02 3 5 6.34±1.41 5.11±0.48
0.02 10 5 0 0
0.1 10 5 0 0
1 10 5 0 0
2.5 1 5 0 0
30
control
圖 3.1 第一組人蔘癒傷組織增殖率(AA:ascorabic acid、AC:activated charcoal、
PVP: polyvinylpyrrolidone;Data represent means±SEM of three experiments. Means with the same letter are not significantly different (P<0.05))
31
control
圖 3.2 第二組人蔘癒傷組織增殖率(AA:ascorabic acid、AC:activated charcoal、
PVP: polyvinylpyrrolidone;Data represent means±SEM of three experiments. Means with the same letter are not significantly different (P<0.05))
32
control
50 mg/L AA 100
mg/L AA
50 mg/L AC 100
mg/L AC
50 mg/L PVP 100
mg/L PVP
Proliferation rate (%)
0 100 200 300 400
圖 3.3 第六組人蔘癒傷組織增殖率(AA:ascorabic acid、AC:activated charcoal、
PVP: polyvinylpyrrolidone;Data represent means±SEM of three experiments. Means with the same letter are not significantly different (P<0.05))
33
圖 3.4 第一組人蔘癒傷組織 (bar = 5.0 mm)
人蔘根培植體於 a:control;b:50 mg/L AA;c:50 mg/L AC;d:50 mg/L PVP;e:100 mg/L AA;f:100 mg/L AC;g:100 mg/L PVP。
g a
b c d
e f
34
圖 3.5 第二組人蔘癒傷組織 (bar = 5.0 mm)
人蔘根培植體於 a:control;b:50 mg/L AA;c:50 mg/L AC;d:50 mg/L PVP;e:100 mg/L AA;f:100 mg/L AC;g:100 mg/L PVP。
a
b c d
f g
e
35
圖 3.6 第六組人蔘癒傷組織 (bar = 5.0 mm)
人蔘根培植體於 a:control;b:50 mg/L AA;c:50 mg/L AC;d:50 mg/L PVP;e:100 mg/L AA;f:100 mg/L AC;g:100 mg/L PVP。
a
b c d
e f g
36
圖 3.7 第一組形態發生 kinetin 和 NAA 組別(二個月)(bar = 5.0 mm)
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a:0.02 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA;b:0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA;c:0.02 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA;d:0.1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA;e:1 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA;f:1 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA;g:1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA。
a
b c d
e f g
37
圖 3.8 第一組形態發生 kinetin 和 NAA 組別含 100 mg/L PVP(二個月)
(bar = 5.0 mm)
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a:PGRs free;b:
0.02 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA;c:0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA;d:
0.02 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA;e:0.1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA;
f:1 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA;g:1 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA。
a
b c d
e f g
38
圖 3.9 第一組形態發生 I(二個月)(bar = 5.0 mm)
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a:PGRs free;b:
0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA;c:0.1 mg/L Kinetin + 1 mg/L IBA;d:
0.1 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA;e:PGRs free + 100 mg/L PVP;f:0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA + 100 mg/L PVP;g:0.1 mg/L Kinetin + 1 mg/L IBA + 100 mg/L PVP;h:0.1 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA + 100 mg/L PVP。
a b
c d
f
e
g h
39
圖 3.10 第一組形態發生 II(二個月)(bar = 5.0 mm)
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a:0.02 mg/L Kinetin + 1 mg/L 2,4-D;b:0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L 2,4-D;c:1 mg/L Kinetin + 1 mg/L 2,4-D;d:1 mg/L Kinetin + 3 mg/L 2,4-D;e:0.2 mg/L BA + 1 mg/L IBA;f:0.2 mg/L BA + 2 mg/L IBA;g:1 mg/L BA + 1 mg/L IBA;
h:1 mg/L BA + 2 mg/L IBA。
a b
c d e
f g h
40