圖 3.11 第二組形態發生 kinetin 和 NAA 組別（二個月）（bar = 5.0 mm）
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a：0.02 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA；b：0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA；c：0.02 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；d：0.1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；e：1 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA；f：1 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA；g：1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA。
a
b c d
e f g
41
圖 3.12 第二組形態發生 kinetin 和 NAA 組別含 100 mg/L PVP（二個月）
（bar = 5.0 mm）
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a：PGRs free；b：
0.02 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA；c：0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA；d：
0.02 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；e：0.1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；
f：1 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA；g：1 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA。
a
b c d
e f g
42
圖 3.13 第二組形態發生 I（二個月）（bar = 5.0 mm）
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a：PGRs free；b：
0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA；c：0.1 mg/L Kinetin + 1 mg/L IBA；d：
0.1 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA；e：PGRs free + 100 mg/L PVP；f：0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA + 100 mg/L PVP；g：0.1 mg/L Kinetin + 1 mg/L IBA + 100 mg/L PVP；h：0.1 mg/L Kinetin + 3 mg/L IBA + 100 mg/L PVP。
a b
c d e
f g h
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圖 3.14 第二組形態發生 II（二個月）（bar = 5.0 mm）
組別 0.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a：0.02 mg/L Kinetin + 1 mg/L 2,4-D；b：0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L 2,4-D；c：1 mg/L Kinetin + 1 mg/L 2,4-D；d：1 mg/L Kinetin + 3 mg/L 2,4-D；e：0.2 mg/L BA + 1 mg/L IBA；f：0.2 mg/L BA + 2 mg/L IBA；g：1 mg/L BA + 1 mg/L IBA；
h：1 mg/L BA + 2 mg/L IBA。
a b
c d e
f g h
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圖 3.15 第六組形態發生（二個月）（bar = 5.0 mm）
組別 2 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a：PGR-free；b：
0.2 mg/L BA + 1 mg/L IBA；c：0.2 mg/L BA + 2 mg/L IBA；d：1 mg/L BA + 1 mg/L IBA；e：1 mg/L BA + 2 mg/L IBA。
a b
c d e
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圖 3.16 第六組形態發生（五個月）（bar = 5.0 mm）
組別 2 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ 之癒傷組織分別在 a：0.02 mg/L Kinetin + 3 mg/L NAA；b：0.02 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；c：0.1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；d：1 mg/L Kinetin + 10 mg/L NAA；e：2.5 mg/L Kinetin + 1 mg/L NAA。
a b
c d e
46
第四章 討論
4.1 人蔘癒傷組織增殖率
抗壞血酸（ascorbic acid，AA）可被氧氣、過氧化氫或超氧化物氧化 成 monodehydroascorbate (MDHA) radicals，而其中的抗壞血酸氧化酶和 細胞的生長有關（Gonzalez-Reyes et al., 1995）。試驗結果顯示，第一組
（0.5 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L TDZ）和第二組（0.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ）加入 AA 後，其癒傷組織之增殖率都有明顯提高。
固態或液態組織培養添加活性碳（activated charcoal，AC）以用吸附 培植體代謝出的有毒物質，但高濃度活性碳可能也吸附植物生長調節劑 BA、IAA、IBA、NAA 和 kinetin（Constantin et al., 1977; Nissen and Sutter, 1990; Weatherhead et al., 1978）。活性碳藉吸附酚類物質防止培養基變 色，並使分類氧化酵素和過氧化酶失活，進而提高培植體生存率和器官 發生能力（Tisserat, 1979）。第六組（2 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L TDZ）組 別添加 50mg/L AC，其癒傷組織增殖率提高 171％，但 100 mg/L AC 則 使增殖率明顯下降。
2006 年 Nisha Rani 和 Nair 學者指出癒傷組織增殖實驗中無 PVP 處 理相較 PVP（polyvinylpyrrolidone）處理褐化情形嚴重。PVP 影響癒傷組 織再生主要是因 PVP 會和酚類或一些有毒物質結合，防止培植體褐化
（Chang and Yang, 1996）。第一、二、六組別添加 PVP 增殖率都有明顯 上升。
各種條件誘導癒傷組織適合培養條件有所差異，第一組添加 50 mg/L AA 有最佳增殖率；第二組為添加 50 mg/L AA 或 PVP 可有效提升增殖 率；第六組添加 50 mg/L AC 或 PVP 可顯著提升增殖率，為了得到更良
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好生長更快速的癒傷組織，化學添加劑選用是很重要的因素。 根形成（Langhansova et al., 2012），而本試驗中第一、二組處理高濃度
（10mg/L）NAA 癒傷組織有綠化發生且為塊狀，卻未觀察到發根情形。
（Bonfill et al., 2002）。本實驗第一、二組 Kinetin+2,4-D 組癒傷組織皆 有綠化情形，且為鬆軟狀。
PVP 可吸附培植體分泌的酚類物質，預防培植體和培養基被褐化，
提升癒傷組織形態發生機會。先前研究指出添加 PVP 的培養基較無添加 PVP 組別癒傷組織可生成較多不定芽（Jung et al., 2007）。第一、二組 kinetin + NAA 和 kinetin + IBA 有無添加 PVP 對於癒傷組織影響無差異，
除了第二組 1 mg/L kinetin + 1 mg/L NAA 處理添加 PVP 後，癒傷組織有 綠化情形。植物調節劑對於癒傷組織形態發生比化學添加劑更具影響力。
綠色塊狀癒傷組織會形成深綠色斑點，這些斑點生成節點而長成不 定根。鬆軟綠色癒傷組織為普遍細胞型態，搭配特定生長調節劑種類和 濃度可生成不定根（Omwenga and Isanda, 2004）。本試驗大部分處理條 件皆有綠色塊狀癒傷組織形成，kinetin +2,4-D 組別則是鬆軟綠色癒傷組 織。本試驗測試了許多植物調節劑和搭配了化學添加劑，但癒傷組織都 只有轉綠情形，推測其原因，可能是因培養時間不夠長或是繼代過程某 些因素造成癒傷組織的再生能力下降。唯有第六組處理 0.02 mg/L kinetin + 3 mg/L NAA 五個月有不定根生成。
理論上，癒傷組織所含人蔘皂苷較根部器官低，故在試管中誘導癒 傷組織形成不定根可讓人蔘皂苷累積。本論文誘導第六組癒傷組織形成 不定根，成功建立了人蔘癒傷組織之根器官形成系統。
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