第一節 含量測定條件之確定
一、指標成分 HPLC 定量法
利用高效液相層析法分析四逆湯檢品中甘草酸、薑辣素之含量，其層析 圖之例參見 Fig.1。兩種指標成分的滯留時間分別為 6.49 及 17.32 分 鐘，內標為 12.01 分鐘。層析圖中波峰基線清晰穩定，亦無干擾性波峰，
可見本法用於分離甘草酸及薑辣素的效果良好。
二、檢量線之製作
本實驗的定量方法是將已配置好的各標準品濃度取 180μl 加入 20μl 濃度為 50μg/ml 羥苯丙酯(Propyl paraben)的內標，接著以 HPLC 分析。
由所得之甘草酸、薑辣素與羥苯丙酯之波峰面積比與校正濃度作線性回 歸以製作檢量線。結果甘草酸在濃度 0.1-500μg/ml 範圍內及薑辣素在 濃度 0.1-250μg/ml 範圍內均成良好線性關係，其線性回歸方程式分別 如下（Fig2、3）：
Glycyrrhizic acid ：Y = 0.025527X+0.001242（r2=0.9996）
6 -Gingerol ：Y = 0.024991X+0.005554（r2=0.9998）
三、同日間及異日間之確效實驗
本法之偵測極限（limit of detection），經逐步稀釋甘草酸、薑辣素 二成分在同一標準溶液後分析之，其偵測極限甘草酸為 30ng/ml、薑辣 素為 25ng/ml。以置備檢品檢量線之標準液，測得二個指標成分之偵測 極量（limit of quantitation），其最低濃度為 0.05μg/ml，變異係數
（C.V.）皆低於 10﹪（Table 7、8）。分別取甘草酸、薑辣素的高、中、
低三種濃度於同日間的早、中、晚（Intraday）及不同日的早、中、晚
（Interday）測試，結果見（Table 3-6），變異係數（C.V.）皆低於 10
﹪，顯示本定量法有良好的精確性，適用於本實驗檢品之定量分析。
四、安定性實驗
同時含有甘草酸、薑辣素二成分之標準檢品，以四種濃度（1.0、5.0、
50.0、250.0μg/ml）於 4℃（0-90 天）下進行安定性實驗，結果如 Table 9-10 及 Fig 4-5 所示，經分析後甘草酸、薑辣素二種成分濃度無明顯
分析殘渣中 Glycyrrhizic acid，6-Gingerol 的含量。在人工胃液中 Glycyrrhizic acid 的含量以 R4 處方佔原量 13%為最低，R3 處方佔原量 35%為最高；6-Gingerol 的含量以 R4 處方佔原量 20%為最低，R3 處方佔 原量 30%為最高。在人工腸液中 Glycyrrhizic acid 的含量以 R4 處方佔 原量 38%為最低，R6 處方佔原量 53%為最高；6-Gingerol 的含量以 R4 處方佔原量 18%為最低，R6 處方佔原量 33%為最高。分析結果發現 Glycyrrhizic acid 及 6-Gingerol，在人工胃液中都以 R4 處方殘渣量 最少，R3 處方殘渣量最多。在人工腸液中也以 R4 處方殘渣量最少，而 R6 處方殘渣量最多。所以對兩者而言可見，R4 處方的溶離百分率最高，
而 R3、R6 處方的溶離百分率最低。如 Table 12：
八、錠劑安定性測定
將錠片分別儲存於 20℃、25℃、37℃、45℃之溫度，相對溼度 75%的環 境下，經一個月、二個月及三個月後再分別以 HPLC 進行含量分析。在 同處方製品不同溫度下，結果其指標成分含量並無太大改變，表示這些 錠劑的安定性良好。其結果如 Table 15-21：
第二節 顆粒之物性
一、安息角（Angle of repose）之測定
用固定漏斗及圈之方式測定。所得結果見 Table 22，由表中可看出各處 方之安息角和粉體流動性的關係，介於 24-30°之間是屬於可以打錠的範 圍（60）。
二、顆粒密度之測定
顆粒密度使用振盪密度測定器在 100ml 量筒中測定，操作十分鐘，所得 之值用於計算壓縮性指數（compressibility index），公式如下。結果 見 Table 23，壓縮性指數介於 10-20 之間，是屬於可壓錠範圍，所以製 劑的處方顆粒皆有可壓錠性質（61）。
Tapped density－Bulk density compressibility index（%）＝
Tapped density ×100﹪
三、顆粒粒徑之測定（partical size distribution）
使用一套大小孔徑不同的篩網組合，最上層篩孔最大，而底層的篩孔最 小，將不同處方每批整粒後之顆粒置於最上層，經連續震動五分鐘後，
秤量並記錄每個篩網上滯留的顆粒重量，結果見 Fig.6-10。主要分布集 中在 80-100 mesh，顯示各處方間乾燥顆粒大小均勻，粒徑規則。
四、含水量之測定（moisture content）
取各處方整粒後的顆粒約 5g 重，置於紅外線水分分析儀器內。在溫度 60℃操作 10 分鐘，測其顆粒含水量皆小於 2%，如 Table 24：
第三節 錠劑之物性
一、硬度試驗（Hardness test）
每批各取十顆錠劑測試，計算產品的平均硬度結果如 Table 25，各處方 錠劑平均硬度介於 6-9kg 之間，合理範圍約在 3-9kg 之間，所以這些處 方產品之硬度皆在合理範圍之內。
二、厚度試驗（Thickness test）
每批各取十顆錠劑測試，計算產品之平均厚度結果如 Table 26，各處方 錠劑平均厚度介於 4.15-4.30 ㎜，CV 值皆小於 2%，所以這些處方產品 之厚度並無顯著差異。
三、重量差異試驗（Weight variation test）
每批各取二十顆錠劑測試，計算產品之平均重量結果如 Table 27，每一 錠之重量與平均重量的差異計之，其差異超過重量差異百分率 5%的不得 超過二粒，並不能有任何錠劑有超過 5%之一倍者。結果各處方重量差異 百分率均＜1%，表示符合規定。
四、脆度試驗（friability test）
每批各取十顆錠劑測試，計算產品之平均脆度值如 Table 28，各處方間 之脆度值皆低於 0.5%，表示這些產品可耐搬運之磨損。
五、崩散度試驗（Disintegration test）
經由崩散度試驗測定，各處方錠片崩散時間如 Table 29。結果各處方之 崩散時間介於 11-19 分鐘之間，其中以處方 R4 崩散時間 11.7 分鐘最快，
而處方 R6 崩散時間 18.2 分鐘最慢。
六、溶離試驗（Dissolution test）
利用 USPⅩⅩⅢ版之漿式試驗法，用人工胃液、人工腸液為溶離液，保 持 37℃進行溶離試驗，各處方溶離結果示於 Table30-57。所得各處方
Glycyrrhizic acid 之溶出累加百分率對時間之曲線圖示於 Fig.12-18、6-gingerol 之溶出累加百分率對時間之曲線圖示於
Fig.21-27。Glycyrrhizic acid 在人工胃液及人工腸液中溶出累加百分 率對時間之曲線示於 Fig.19-20；6-gingerol 在人工胃液及人工腸液中 溶出累加百分率對時間之曲線示於 Fig.28-29。
由溶離數據結果得知：
1. Glycyrrzic acid 在 30 分鐘的溶離情況，普遍以在人工胃液中溶離 較快，其中以 R4 處方最快，在人工腸液中溶離較慢，又以 R3 處方 溶離效果最差。60 分鐘時的溶離情況，在人工胃液中平均已溶離 60%
以上，又以 R4 處方溶離最快達 82.27%。Glycyrrzic acid 在人工胃 液中溶離較快而在人工腸液中溶離較慢，表示 pH 值會影響其從錠片 中之釋離快慢，可能是因為 Glycyrrzic acid 為弱酸性，所以在人 工胃液中溶離較好之故。處方設計也有影響，由崩散度試驗看，R4 處方崩散最快，因此溶離也會較快，R3 處方崩散最慢，因此溶離也 會較慢。
2. 6-gingerol 在 30 分鐘的溶離情況，不管人工胃液或人工腸液皆可達 50%以上。在 60 分鐘的溶離情況，則皆可達 60%以上，其中以R4 處 方最快在人工胃液中可達 77.93%，再人工腸液中可達 76.57%。不同 的pH 值下，其溶離情況並無太大變化，表示 pH 值並不影響其從錠 片中之釋出。
3.綜合上述，隨著pH 值的變化 Glycyrrzic acid 的溶離結果在人工胃
液中遠大於在人工腸液中，而 6-gingerol 的溶離結果在人工胃液及人 工腸液中則較接近。從配方中可見R4 具有最快的溶離速率，R3 及 R6 則最慢。