3-1. NO 產量試驗
正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 巨噬細胞所釋放在 medium 裡 的 NO 產 量 （ basal level ） 並 不 會 隨 著 時 間 而 有 所 改 變 （ 圖 1.a.) 。反之，NO 產量在有添加 15 mM glucose DMEM 培養基的 RAW 264.7 培養 18 hr 後，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相 比，則開始有明顯增加的傾向 ( p < 0.01 )。
正常 DMEM 培養基所培養的 RAW 264.7 在 LPS 刺激之下，
NO 產量隨培養時間延長而增加。這樣的情形同樣也在添加 15 mM glucose DMEM 培養基的 RAW 264.7 觀察到，只是上升的濃度在每 個時間點，所測得的 NO 值都比前者為低 ( p < 0.01 )（圖 1.b. ）。
隨著 15 mM glucose DMEM 培養基的 RAW 264.7 培養時間延長 至 7 天（中慢性），發現 6 hr 後所測得的 NO basal 值，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，在統計學上卻有顯著差異 ( p <
0.01 )（圖 1.c.）。同樣的，在 LPS 刺激下，有添加 15 mM glucose DMEM 培養基的 RAW 264.7 從 6 hr 到 24 hr，可以看到所釋放出的 NO 值也有著明顯偏低的情形 ( p < 0.01 )，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比（圖 1.d.）。
將添加 15 mM glucose DMEM 培養基時間延長至 14 天（慢 性），從 medium 中所測得的 NO basal 值，在各時間點與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，有慢慢回升的情形 ( p < 0.01 )
（圖 1.e）。經由 LPS 刺激後，同樣的發現在長期受 15 mM glucose DMEM 培養基的 RAW 264.7 ，在時間點 24 hr 時，所測得的 NO 釋
放濃度值，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，有明顯下降 的趨勢 ( p < 0.01 )（圖 1.f）。
3-2. iNOS protein assay by Western blot
已知細胞所釋放出來的 NO 與合成它的 iNOS 蛋白質有直接的 相關性。在無添加 LPS 刺激之下，正常 DMEM 培養基與添加 15 mM glucose DMEM 培養基，所培養（1 天，7 天，14 天）的 RAW 264.7 並沒有明顯觀察到 iNOS 蛋白質（分子量 130 KDa）的表現
（圖 2.a.）。
經由 LPS 所誘發出來的 iNOS 蛋白質表現中，15 mM glucose DMEM 培養基，培養 1 天（急性）和 7 天（中慢性）的 RAW 264.7 之 iNOS 蛋白質表現比正常 DMEM 培養基的 iNOS 表現來的少量，
其結果與 NO production test 1 天、7 天的結果相符。但在 14 天（慢 性）15 mM glucose DMEM 培養基之 RAW 264.7 的 iNOS 蛋白質濃 度（分子量 130 KDa）表現卻出乎意料地，有相對明顯升高的情形
（圖 2.b.）。
3-3. iNOS mRNA expression by RT-PCR
RAW 264.7 由 15 mM glucose DMEM 培養 1 天，7 天，14 天 後，實驗結果中發現隨著 15 mM glucose DMEM 培養基培養的時間 越久，basal iNOS mRNA 的濃度有慢慢增加的趨勢，而至 14 天（慢 性）後卻有一個消失的現象。而經 LPS 刺激的 iNOS mRNA 濃度，
在 15 mM glucose DMEM 培養 1 天（急性）後，有上升的情形。隨 著 15mM glucose DMEM 培養 7 天（中慢性）的 iNOS mRNA 濃度
卻明顯轉淡至消失的情況，在 14 天（慢性） 15mM glucose DMEM 培養後的 iNOS mRNA 濃度（分子量 607 bp）又有著明顯倍增的現 象（圖 3.a）。
3-4. TNF-α 產量試驗
TNF-α 為細胞發炎時所釋放出的一種發炎激素，不論是 basal 或是 LPS 刺激的 TNF-α 值會隨時間延長而同步增加，所以實驗中的 time courses 設為 0.5 hr、1 hr、1.5 hr ，因為這是 basal 值及 LPS 刺 激後，差異最大的時間點範圍。
在 basal TNF-α 濃度測定方面，培養含 15 mM glucose DMEM 培養基的 RAW 264.7 巨噬細胞 1 天（急性），測得的 TNF-α 濃度值 在 1.5 hr，有明顯上升的情形。經 15 mM glucose DMEM 培養基培 養 7 天（中慢性）後的 RAW 264.7 巨噬細胞，隨著時間的增加在 1 hr 及 1.5 hr 時有明顯的減少的情形。而長達 14 天（慢性）15 mM glucose DMEM 培養基培養後的 RAW 264.7 巨噬細胞，測得的 TNF-α 與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，則有大量提升的現象
（圖 4.a.）。
添加 LPS 刺激後，在急性 ( acute ) 與 慢性 ( chronic ) 15 mM glucose DMEM 培養基培養後的 RAW 264.7 巨噬細胞，所測得的 TNF-α 濃度，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 巨噬細胞之間並 無明顯變化。反之，中慢性 ( sub-chronic ) 15 mM glucose DMEM 培 養基培養後的 RAW 264.7 巨噬細胞，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 巨噬細胞相比，卻有一個明顯抑制的情形（圖 4. b.）。
3-5. IL-6 產量試驗
IL-6 為人體內調節免疫及發炎反應的一種細胞激素。檢測 IL-6 釋放量時，因半衰期非常短，所以以 3 小時作為一個檢測的時間 點。在 basal 1 天（急性）含 15 mM glucose DMEM 培養基所培養的 RAW 264.7 ，有略微高於正常 DMEM 培養 RAW 264.7 的情況。經 由 LPS 刺激後 15 mM glucose group，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，有明顯增加的趨勢 ( p < 0.001 )（圖 5.a）。
在培養 7 天（中慢性）含 15 mM glucose DMEM 培養基所培養 的 RAW 264.7 經 LPS 添加後，所釋放出的 IL-6 濃度，觀察到含 15 mM glucose 與正常 DMEM 所培養的 RAW 264.7 比較，並無差異性
（圖 5.b）。
將培養時間延長到 14 天（慢性）15 mM glucose DMEM 培養後 發現，LPS 刺激後的 15 mM glucose group 之 IL-6 釋放量，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，有明顯回升的現象 ( p < 0.01 )
（圖 5.c），但 14 天 15 mM glucose group 的 IL-6 釋放量，仍沒有比 1 天（急性）15 mM glucose group 多。
3-6. IL-1 β 產量試驗
IL-1 β 為受發炎物質刺激後，所分泌出的一種細胞激素。檢測 IL-1 β 釋放量時，因半衰期非常短，所以以 3 小時作為一個檢測的 時間點。分別在培養於 15 mM glucose DMEM 培養基之 RAW 264. 7 於 1 天（急性），7 天（中慢性），14 天（慢性）後， 在 basal IL-1 β 的表現量，與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，皆有明顯 增加的趨勢。( p < 0.001 ) （圖 6.a）。
正常 DMEM 培養基與 15 mM glucose DMEM 培養基培養之 RAW 264.7 於 1 天，7 天，14 天後添加 LPS 刺激，結果發現 15 mM glucose DMEM 培養 1 天（急性），與其 basal 1 天（急性）和正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 所釋放出的 IL-1 β 表現量相比，並沒 有太大的變化 ( p < 0.001 ) 。而 7 天（中慢性）IL-1 β 的表現量，則 有略微抑制的情形。反之，14 天（慢性）與正常 DMEM 培養基的 RAW 264.7 相比，卻又有明顯回升增加的現象 ( p < 0.001 )（圖 6.b）。