[EMIM][Cl]效果比[C2OHmim][Cl]來的好，推測是因為當陽離子多了羥基，
親水性增加，和疏水的[BMIM][Cl]與[EMIM][Cl]相比，與疏水的苯二氮平
chaotropic，分離的效果越好，推測是因為 chaotropic 陰離子會破壞樣品分 子外圍的水籠使分析物裸露出來進而跟多餘的陰離子有作用力而輔助分 離，添加的鹽類濃度越高，作用力越強，讓樣品分開。在本實驗中，最佳 的分離條件為添加 300 mM 的 LiNTf2，七種樣品可在 18 分鐘內完全分開，
除此之外，時間與面積的在現性也很好。至於在定性方面，樣品分子會依 據 pKa 的大小由大至小出現。
a b c d
pKa＝4.6 pKa＝2.9 pKa＝3.5 pKa＝3.4
e f g
pKa＝3.2 pKa＝2.4 pKa＝1.4
圖 5-1 苯二氮平類藥物結構式及 pKa （a）chlordiazepoxide（b）bromazepam
（c）clorazepate（d）diazepam（e）nitrazepam（f）alprazolam（g）flunitrazepam
（a）cation part （b）anion part
圖 5-3 在緩衝溶液中不同[C2OHmim][Cl]比例對分離效果的影響（a）1%（b）
5%（c）10%（v/v）[C2OHmim][Cl]
分離條件：20 mM 的磷酸緩衝溶液（pH 7.0）；分離電壓：15 kV；注射壓力：
0.5 psi；注射秒數：3 sec
圖 5-4 在緩衝溶液中不同[EMIM][Cl]比例對分離效果的影響（a）1%（b）
5%（c）10%（v/v）[EMIM][Cl]。其餘分離條件同圖 5-3。訊號順序：
1. clorazepate, 2. diazepam, 3. chlordiazepoxide, 4. bromazepam, 5. nitrazepam, 6. alprazolam, 7. flunitrazepam.
圖 5-5 在緩衝溶液中不同[BMIM][Cl]比例對分離效果的影響（a）1%（b）
5%（c）10%（v/v）[BMIM][Cl]。其餘分離條件同圖 5-3。訊號順序：
1. clorazepate, 2. diazepam, 3. alprazolam, 4. chlordiazepoxide, 5. nitrazepam, 6. bromazepam, 7. flunitrazepam.
圖 5-6 在緩衝溶液中不同種類陽離子的離子溶液對分離效果的比較
（a）[EMIM][Cl]（b）[BMIM][Cl]（c）[C2Ohmim][Cl]。訊號順序同圖 5-5，
離子溶液在緩衝溶液中的體積比皆為 10％（v/v），其餘分離條件同圖 5-3。
圖 5-7 在緩衝溶液中不同[BMIM][PF6]比例對分離效果的影響（a）1%（b）
3%（c）5%（v/v）[BMIM][PF6]。其餘分離條件同圖 5-3。
圖 5-8 在緩衝溶液中不同[BMIM][NTf2]比例對分離效果的影響（a）1%（b）
3%（c）5%（v/v）[BMIM][NTf2]。其餘分離條件同圖 5-3。訊號順序：
1. chlordiazepoxide, 2. bromazepam, 3. clorazepate, 4. nitrazepam, 5. diazepam, 6. flunitrazepam, 7. alprazolam.
圖 5-9 在緩衝溶液中不同種類陰離子的離子溶液對分離效果的比較（a）
[BMIM][Cl]（b）[BMIM][PF6]（c）[BMIM][NTf2]。離子溶液在緩衝溶液中 的體積比皆為 5％（v/v），訊號順序同圖 5-8，其餘分離條件同圖 5-3。
圖 5-10 在緩衝溶液中不同濃度的 LiPF6對分離效果的影響（a）200 mM（b）
300 mM（c）400 mM LiPF6。其餘分離條件同圖 5-3。訊號順序：
1. chlordiazepoxide, 2. bromazepam, 3. clorazepate, 4. diazepam, 5. nitrazepam, 6. alprazolam, 7. flunitrazepam.
圖 5-11 在緩衝溶液中不同濃度的 LiNTf2對分離效果的影響（a）200 mM（b）
300 mM（c）400 mM LiNTf2，訊號順序同圖 5-10，其餘分離條件同圖 5-3。
圖 5-12 在緩衝溶液中不同濃度的 LiOTf 對分離效果的影響（a）200 mM（b）
300 mM（c）400 mM LiOTf，訊號順序同圖 5-10，其餘分離條件同圖 5-3。
圖 5-13 在緩衝溶液中不同種類陰離子鹽類對分離效果的影響（a）LiOTf（b）
LiPF6（c）LiNTf2，訊號順序同圖 5-10，陰離子鹽類濃度皆為 300 mM，其 餘分離條件同圖 5-3。
六、離子溶液型態的界面活性劑應用於掃掠式線上濃縮
使用貝克曼公司（Beckman Instrument, Fullerton, CA, USA）所製造的 毛細管電泳儀，P/ACE MDQ 系列進行實驗。紫外光-可見光光二極體陣列
（UV-VIS diode array）作為偵測器。儀器與分析數據由 Beckman Coulter MDQ 32 Karat software 控制與處理；以內徑 50 μm ，外徑 360 μm ，總長 50 cm （至偵測窗口為 40 cm）之二氧化矽毛細管（fused-silica capillary, Polymicro Technologies, Inc., Phoenix, AZ, USA）作為分離管柱，毛細管外層 塗附之聚亞醯胺（polyimide）以火焰灼燒約 0.2 cm ，再以乙醇輕微擦拭灼 燒處，去除塗附之聚亞醯胺以形成偵測窗口。管柱溫度控制在 25 ℃ 下，分 離電壓為 25 kV。樣品注射以壓力注射（0.5 psi）方式導入毛細管中。偵測 器吸收波長設於 230 nm。
6.3 試藥
所有試藥皆為分析級。苯二氮平類標準品七種包括安定（diazepam）、
氯氮平酸鹽（clorazepate）、氯二氮平（chlordiazepoxide）、溴西泮
（bromazepam）、硝西泮（nitrazepam）、阿普唑他（alprazolam）、氟硝西泮
（flunitrazepam）、硼砂（Borax）皆購自 Sigma-Aldrich 公司（St. Louis, MO, USA）。二氯甲烷（dichloromethane, 99.99%）購自於 Tedia 公司（Fairfield, OH, USA）。氫氧化鈉（sodium hydroxide, NaOH）、磷酸二氫鈉（sodium dihydrogen phosphate anhydrous, 99%）購自於 Fluka（Buchs, Switzerland）公司。d-三 氯甲烷（d-chloroform, 99.8 atom ％ D contains 0.05％(v/v) TMS, CDCl3）購 自於 Sigma-Aldrich 公司（Louis, MO, USA）。甲基引咪唑（1-methylimidazole, 99%）、溴化十六烷（1-bromohexadecane, C16H33Br, 99%）、1-甲基吡咯啶
（1-methylpyrrolidine, 98％）購自於 Acros Organics 公司（Fairlawn, NJ, USA）。甲醇（methanol, 99.9%）購自於 Echo 公司（Miaoli, Taiwan）。濃氨 水（Ammonium hydroxide solution, 33％ NH3）、鹽酸（hydrochloric acid, HCl, 37%）購自於 Riedel-deHaën 公司（Seelze, Germany）。丙酮（acetone, 99.6%）
購自於 J.T.Baker 公司（Phillipsburgh, NJ, USA）。乙醇（ethanol, 95%）、甲 苯（toluene）購自於 Shimakyu’s Pure Chemicals 公司（Osaka, Japan）。乙酸 乙酯（ethyl acetate, 99.5％）購自 Grand Chemical Company（Bangkok, Thailand）。異丙醇（isopropyl alcohol）購自於 Mallinckrodt Baker, Inc.
（Phillipsburgh, NJ, USA）。實驗室所用的去離子水皆由 Milli-Q 水系統
（Millipore, Bedford, MA, USA）提供。