胰島素的變化

第九節 胰島素的變化

胰島素⽔準是以曲線下⾯積指數（AUC = min x μg/L）表⽰（圖 3 B）。CON 對照組胰島素⽔準的 AUC 為 66.6 ± 2.1 min x μg/L。由

於 T2DM 的細胞損傷，DM 的 AUC 下降到 21.9 ± 1.4 min x μg/L。

< 0.05）。

第⼗⼀節 切⽚染⾊的發現

第⼀項 胰臟切⽚

第⼀⽬ 胰臟切⽚的 HE 染⾊

在胰臟切⽚中，我們發現糖尿病⼤⿏的胰臟的蘭⽒⼩島

（islet of Langerhans）直徑較⼩（圖 4），這與胰島萎縮有 關。糖尿病⼤⿏的胰臟排列不規則， 細胞邊界模糊或消失，

細胞壞死。與糖尿病⼤⿏相⽐，T1、T2、T5 和 B1 ⼤⿏的 胰島較⼤。此外，T1、T2、T5 和 B1 ⼤⿏的胰島細胞排列

⽐ DM ⼤⿏更加規則。

第⼆⽬ 胰臟切⽚的 IHC 和螢光染⾊

糖尿病⼤⿏胰臟 4-HNE、IL-1β 和 Caspase3 的表現明顯

⾼於其他實驗組與對照組⼤⿏（圖 6）。番⽯榴汁加海藻糖

（T1，T2，或 T5）或不加海藻糖（B1），均能顯著降低胰 臟 4-HNE、IL-1β 和 Caspase3 的表現。與 T1、T2 和 T5 相

⽐，B1 組⼤⿏胰臟組織中 4-HNE、IL-1β 和 Caspase3 的表

現⽔準最⾼。在糖尿病⼤⿏胰臟切⽚中亦可⾒較⾼⽔準的

Caspase3 和 LC3-B 表現（圖 6）。

Caspase3 表現⾼於 LC3-B，提⽰ T2DM ⼤⿏細胞凋亡 多於細胞⾃噬。T1、T2 和 T5 降低了 T2DM ⼤⿏胰臟切⽚

在 T2DM ⼤⿏的腎⼩管，⽽不是腎⼩球（圖 4）。T1、T2、

T5、B1 組⼤⿏腎臟切⽚藍區明顯少於 DM 組。T2 和 T5 組

⼤⿏的硬化⾯積較 B1 組⼩。

第三⽬ 腎臟切⽚的 IHC 和螢光染⾊

糖尿病⼤⿏腎⼩管 4-HNE、IL-1β 和 Caspase3 的表現明 顯⾼於 CON 對照組（圖 5）。番⽯榴汁加海藻糖（T1，T2，

或 T5）或不加海藻糖（B1）的⼤⿏，4-HNE、IL-1β 和 Caspase3 的表現較少。B1 組⼤⿏ 4-HNE、IL-1β 和 Caspase3 的表現

⽔準均⾼於 T1、T2 和 T5。綠⾊螢光代表 Caspase3 介導的 細胞凋亡，⽽紅⾊螢光代表 LC3-B 介導的細胞⾃噬。在腎 臟切⽚中，糖尿病組胞漿中 Caspase3 和 LC3-B 的表現⾼於

CON 對照組（圖 5），我們還發現這兩種蛋⽩在糖尿病腎臟 的腎⼩管中共存。Caspase3 和 LC3-B 蛋⽩在 T1、T2、T5 和 B1 的表現明顯降低。

第三項 膀胱切⽚

第⼀⽬ 膀胱切⽚的 IHC 和 TUNEL 染⾊

我 們 使 ⽤ TUNEL 檢 測 （ Terminal deoxynucleotidyl

transferase dUTP nick end labeling, TUNEL)，來測定 4 組⼤

⿏的平滑肌層，評價了蘿蔔硫素對 Nrf2 ⽔平、免疫組織化

著低於 DM 組（p < 0.05）。T1、T2 和 T5 的活性氧⽔準低

與對照組相⽐，糖尿病組細胞⾃噬相關蛋⽩ Beclin-1,

LC3-B，發炎性細胞凋亡相關蛋⽩ IL-1β，和細胞凋亡相關蛋⽩ Bax,

Bcl-2, Caspase3的表現明顯升⾼，T1、T2 和 T5 組細胞⾃噬相關 蛋⽩表現明顯降低（p < 0.05）。番⽯榴汁加海藻糖（T1，T2，或

T5）或不加海藻糖（B1）均可顯著降低腎臟和胰臟細胞⾃噬標

為了探討糖尿病膀胱的粒線體反應和 Nrf2/Keap1 信號轉導，

我們檢測了糖尿病膀胱不同時間段粒線體 Bax、細胞⾊素 C、整

這些數據表明，糖尿病可以導致粒線體功能障礙和 Nrf2 防禦機 顯著降低，ER 應激標誌物 ATF-6/β-actin(圖 12 D)和 CHOP/β-actin(圖 12 E)顯著升⾼，凋亡標誌物 caspase3(casp3c/casp3u;圖 12 F)和 PARP/β-actin ⽐值(圖 12 G)顯著升⾼。然⽽，蘿蔔硫素

處理顯著恢復 DM 誘導的 Nrf2/β-actin 和 HO-1/β-actin 的下降(圖

12 B-C)，並顯著抑制 DM+SF 膀胱中 DM 觸發的 ATF-6 和 CHOP(圖 12 D-E)、casp3c/casp3u 和 PARP/β-actin(圖 12 F-G)的 增加。

組⼤⿏相⽐，DM ⼤⿏的膀胱容量顯著增加（圖 10 B）。與糖尿病⼤

⾼）。

Keap1 表現顯著增加，顯⽰出糖尿病能導致粒線體功能障礙和 Nrf2 防禦機制受到抑制。

⼜能增加 casp3c 和 PARP 數值，表⽰抑制細胞凋亡，事實證明在

TUNEL 染⾊出的凋亡細胞數有效地減少。

蘿蔔硫素對⼤⿏尿流動⼒學參數的影響，實驗結果發現可以縮短 兩次收縮間期（ICI），且不影響膀胱收縮幅度 (Am)，亦能縮短每次 排尿持續時間(MD)。⽽ DM ⼤⿏的膀胱容量顯著增加，顯⽰有尿瀦 留現象，以蘿蔔硫素預處理的⼤⿏容量明顯改善。