• 沒有找到結果。

第三章 材料與方法

第二節 臺灣地區家禽飼料污染沙門氏桿菌調查

4-2.1 前預備試驗

飼料件之採樣地區含括臺灣北、中、南部,共調查 92 個雞場,檢測件共計 419 件;檢測結果顯示各地區之場陽性率分別為北部白肉雞飼料 70 % (14/20)、中部 8.7 % (2/23)、南部 7.5 % (3/40)、東部 0 % (0/12),詳請見表十七。

(一) 沙門氏桿菌污染飼料之分佈情形

飼料件之採樣地區含括臺灣北、中、南部,共調查92個雞場,檢測件共計419件,

實施成果如下,對於各項影響沙門氏桿菌分離率的變因,包括雞隻品種、區域、飼料 採樣位置、飼料廠牌、分離出沙門氏桿菌之培養液與培養基搭配效果等因子,分別進 行統計分析。

(二) 採樣之雞場與飼料種類、數目

北部地區參與採樣之雞場包含桃園、新竹與宜蘭縣市的雞場共 23 場,檢測飼料 共計 256 件;中部地區採樣 23 場,包括苗栗縣與台中縣市,飼料共計 48 件;南部地 區採樣 40 場,包含雲林、高雄、台南與屏東縣市,飼料採樣數為 115 件。以全省不 分區域之飼料種類統計,白肉雞料共計 277 件、種雞料 46 件、蛋雞料 54 件、有色肉 雞料 21 件、土雞料 21 件,詳請參酌表十八。

(三) 不同種類飼料之沙門氏桿菌分離結果概述

目前已有 18 件雞場飼料確認為沙門氏桿菌陽性,共得分離株 20 株。沙門氏桿菌 分離株分離自 15 個雞場(15/92,16.3 %),分別採自 10 個北部的白肉雞場 (10/20,

50 %)、中部的種雞場與蛋雞場各 1 場 (1/16,6.3 %;1/3,33.3 %)與南部的種雞場、

蛋雞、有色肉雞各 1 場(1/5,20 %;1/17,5.9 %;1/6,16.7 %)。全省雞場飼料不分區 域之場陽性率分別為白肉雞 37.0 %、種雞 6.7 %、蛋雞 10.0 %、有色肉雞 12.5 %、土

雞 0.0 %;不分飼料種類統計,北部地區以連續性採樣之飼料檢出率為 43.5 %、中南部 地區採單次採樣,檢出率分別為 6.9 %、7.5 %,詳請參酌表十九。

統計學的結果發現沙門氏桿菌陽性盛行率在不同種別雞隻(p <0.05)以及不同地 區(p <0.01)之間分別呈現顯著以及極顯著差異。其中沙氏桿菌盛行率在白肉雞最高,

而北部高於其他地區,而此結果可能與北部白肉雞場採樣採連續性追蹤採樣,與中南 部地區採單次採樣方法不同所造成的差異有關,日後的家禽場飼料採檢採多次連續追 蹤式的採樣方法應可提供較客觀的雞場沙門氏桿菌污染結果。

(四) 不同採樣點之檢測結果比較與飼料品牌分佈

陽性檢體之飼料採集點分別為飼料桶(塔)8 件(8/171,4.7 %)、飼料斗 6 件(6/99,

6.1 %)與飼料槽(盤)4 件(4/149,2.7 %);整體而言,不同飼料採樣位置對於沙門 氏桿菌的分離率呈現顯著影響(p <0.05);進一步分析可以發現,於肉雞(尤其白肉雞)不同採樣點對於沙門氏桿菌的分離率呈現顯著影響 (p <0.05),飼料桶為最容易分離到 沙門氏桿菌的位置。不同採樣位置對於種雞或蛋雞沙門氏桿菌的分離率則無顯著影響 (p =0.535, p =0.08)。

於表二十可見,不同種別飼料的陽性檢出率依序分別為種雞6.5 % (3/46)、有色肉 雞4.8 % (1/21)、白肉雞4.3 % (12/277)、蛋雞3.7 % (2/54)、土雞0.0 % (0/21),不同雞隻 之間具有顯著差異(p <0.05),其中以種雞的分離率最高。

飼料品牌分佈請參酌表十九,檢測 15 種市售品牌飼料品牌,其中僅三個品牌檢 測出沙氏桿菌陽性。不同飼料品牌對於沙門氏桿菌的分離率具極顯著影響( p <0.01 ) ; 陽性檢體之飼料品牌分布情形為 A 牌 8 件 (8/130,6.2 %)、B 牌 9 件 (9/148,6.1 %)、

C 牌 1 件 (1/24,4.2 %)。

(五) 不同培養基之使用對於飼料檢體分離效果之差異

本計畫實施方法參照 ISO 6579:2002 之方法,以兩種選擇性增殖液 RVS 與 MKTTn 培養後再同時以 XLD、BPLS 進行培養分離,並參照 ISO 6579:2002/Amd.1:2007 方法,

針對易受雞隻與環境污染的飼料槽檢體增加使用 CHROM agar Salmonellae (CAS),以 期能增加分離效果。自表二十結果發現使用不同培養液及培養基對沙門氏桿菌的分離 率有極顯著影響(p <0.01),整體而言 RVS 配合 XLD 為最好的方式(10/20;50.0 %),

尤其對於分離飼料桶 (6/9,66.7%) 與飼料槽檢体 (3/4,75.0%) 的效果最好;而分離 飼料斗檢體則以使用選擇性培養液 MKTTn 搭配 BPLS(5/7,71.4 %)可得最佳的分 離效果(p <0.001)。

4-2.2 調查結果整合

(一) 於各地區與禽種間

自 2008 年四月至 2009 年五月間進行採樣調查,調查雞場數達 154 戶,檢測件共 計 778 件,沙門氏桿菌分離株共 59 株 (59/778,7.6 %)。北部調查白肉雞採樣共 397 件,場陽性率為 34.1 % (14/41)。中部採樣飼料樣本共 179 件,場陽性率為 35.3 % (12/34);南部採樣件數 131 件,場陽性率 35.3 % (12/34);東部樣本數共 71 件,場陽 性率 5.7 % (2/35)。統計結果發現不同地區間的場陽性率呈現顯著差異(p =0.0417),但 需此結果尚需考量各地區之採樣禽種分佈與採樣件數的差異所造成的統計誤差。

不分地區別統計,全臺之沙門氏桿菌總場陽性率在白肉雞、種雞、蛋雞與有色肉 雞之間呈現顯著差異(p<0.05),其中以種雞 42.3 %最高 (11/26)、白肉雞料 21.5 % (14/65)、蛋雞 15.0 % (3/20)、有色肉雞 11.1 % (5/45);根據不分飼料種類與地區別統 計,全臺之飼料污染場陽性率為 21.4 % (33/154) 顯示家禽飼料污染沙門氏桿菌的現 象並不算少見,詳請見表二十一。

(二) 不同採樣點與飼料品牌

取自飼料桶、飼料斗與飼料槽這三個採樣點的沙門氏桿菌分離率分別為 7.3 %

(22/300)、6.1 % (12/198)、8.9 % (25/280),統計結果顯示不同採樣點的沙門氏桿菌總 分離率並無顯著差異(p =0.1991),但是取自飼料槽的檢體,在不同雞種之間對於沙 門氏桿菌的分離率則呈現顯著差異( p <0.05),其中以白肉雞最高(10.8 %)、蛋雞最低 (4.3 %),詳請見表二十四。

檢測結果呈現沙門氏桿菌陽性之飼料品牌分佈請參酌表五,檢測件共涵蓋16種市 售品牌飼料品牌,其中有5個品牌檢測出沙門氏桿菌 (5/16,31.3 %)。不同飼料品牌 對於沙門氏桿菌的分離率具極顯著影響 (p <0.01) ; 陽性檢體之飼料品牌分佈情形為 A廠牌11.1 % (33/298,11.1%)、B廠牌5.7 % (14/246)、C廠牌11.1 % (7/86)、D廠牌8.2 % (7/86)、E廠牌4.2 % (1/24)。

而針對在種雞場可能出現於不同飼養階段使用不同廠牌飼料的現象,本調查中使 用多種飼料品牌之種雞場的場陽性率為 60 % (3/5),而使用單一種飼料品牌之種雞場 場陽性率為則為 30 % (3/10),應持續累積樣本數後方能評估此因素是否顯著的增加 污染沙門氏桿菌的風險。

4-2.3 不同培養基之使用對於飼料檢體分離效果之差異

本試驗方法之培養基搭配組合共有 6 種,各搭配組合所分離到的菌株數量各佔總 分離株的比例為: MKTTn 搭配 XLD 14.3 % (10/70)、MKTTn 搭配 BPLS 20.0 % (14/70)、MKTTn 搭配 CAS 2.9 % (2/70)、RVS 搭配 XLD 28.6 % (20/70)、RVS 搭配 BPLS 10.0 % (7/70)、RVS 搭配 CAS 24.3 % (17/70);比較飼料槽檢體使用 CAS 前 (4/145,

2.7 %)、使用後(25/280,8.9 %)的分離效果,使用 CAS 培養基後顯著提高沙門氏桿菌 之分離率 (p = 0.014)。整體而言分離效果以 RVS/XLD 最佳(p =0.0014),RVS 搭配 CAS 其次。

4-2.4 沙門氏桿菌分離株之血清型別鑑定

於飼料檢體共分離得到 70 株沙門氏桿菌分離株,扣除部分檢體因同時自兩種以 上之培養基搭配組合中所分離到並經確認為同一血清型的 11 株,故共有 59 株分離 株。菌株的飼料種別統計包括白肉雞飼料 28 株、種雞 19 株、其他飼料種類 3 株。菌 株皆保存並進行血清型分型,最常見的體抗原血清群依序為 C2 群 (41.8 %)、E 群 (20.3

%)、B 群(11.9 %);尚有 13 株未能分辨其體抗原血清群,包括 3 株分離自白肉雞飼料、

7 株種雞飼料、2 株有色肉雞飼料、1 株蛋雞飼料分離株。其中 1 株屬於 poly A、3 株 屬於 poly B、1 株屬於 poly C,詳請見表二十七。

相關文件