Paclitaxel (Taxol)是由太平洋杉樹皮或其針葉上提煉出來的一種抗癌藥
(88) ，本實驗藉由探討 Paclitaxel 對人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH) 的影響，
希望能多了解一些有關 Paclitaxel 抗癌的可能機轉，此實驗結果顯示，Paclitaxel 對人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH) 有毒殺作用(如圖 5.1-5.5) 。從不同濃度的 Paclitaxel 對人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH) 的細胞毒性效應實驗發現，濃度 愈高，細胞的毒殺效果就愈強。研究顯示，Paclitaxel 與一般 Microtubulin 抑 制劑不同的是，它並不像 vinca alkaloid，podophyllotoxin，colchicine 一樣抑制 tubulin 的形成，反而是促使它形成而使其穩定的無法再分開，以致於細胞將 式細胞計數儀(FACS)分析結果顯示，Paclitaxel 會造成人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH)細胞週期的變化，使其停止在 G2/M 期。其次由人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH) 細胞經不同濃度 Paclitaxel 以螢光顯微鏡檢測 Paclitaxel 對人類肝
癌細胞株(HA 22 T/VGH)細胞內 poly (ADP-ribose) polymerase 的影響，發 (amplification)和 cyclins D1 蛋白質的過度表現 (over expression)的現象在肝癌 細胞中存在(112-113)。根據 Joo 等人報告(114)，cyclins D1 的過度表現可能是肝癌 病變的早期現象，可能與肝細胞分化有關，但和肝癌腫瘤細胞的分化無關。
而根據 Jung 等人的研究(115)，在人類肝癌腫瘤組織中，發現在 cyclins D1 的不 表現時，cyclins E 的 reciprocal deregulation 可能造成 G1 期的進行而導致肝癌。
Paclitaxel 對肝癌細胞 cyclin 和 CDK 的作用仍未定論(112-116)，本實驗發現當藥 物濃度大於 2.5mM 時，可以抑制 cyclin B, D 和 CDK1 的濃度，對 cyclin A、
E 和 CDK2 相反地增加。對 cyclin D3 則無明顯作用。本實驗在不同濃度的 Paclitaxel 作用下，cyclin B, D 受到明顯抑制，cyclin E 相對地增加。對 cyclin A 和 cyclin D3作用則不明顯。另以 CDK 之研究來看，CDK2比例隨藥物濃度
增加而上升，CDK1則明顯下降 (如圖 9-10) 。此外，研究指出(116) cyclin-cdk 複合物受兩套抑制機制調控，一是具專一性抑制 cyclin D-cdk4/6 的 P16INK4A、
P15INK4B、 P18INK4C、 P19INK4D， 二 是 可 抑 制 許 多 種 cyclin-cdk 複 合 物 的
P21WAF/cip1、P27Wip1、P59Wip2。這些更深入的調控機制的異常是否與人類肝癌
的產生有關，仍待進一步的研究。 細胞胞質液中 NAT 的活性的影響，發現加不同濃度的 Paclitaxel 經 6，12，18，
24 小時作用，可增加(HA 22 T/VGH) NAT 的活性，且濃度愈高，作用時間愈 久，NAT 活性增加就愈明顯。另外人類肝癌細胞株((HA 22 T/VGH)細胞胞質 液的 NAT 活性測試中，也可見到濃度愈高，NAT 活性降低的就愈明顯。
有文獻報導肝癌和 NAT1 基因表現有關，所以我們進一步探討 Paclitaxel 能否影響人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH) 細胞中 NAT1基因的表現，因此利用
RT- PCR 的技術進一步探討不同濃度 Paclitaxel 是否會影響人類肝癌細胞株 (HA 22 T/VGH) 細胞 NAT1 基因的表現。在 RT-PCR 的實驗中，經由最後的照 相結果觀察，發現不同濃度的 Paclitaxel 加在人類肝癌細胞株(HA 22 T/VGH) 細胞，(HA 22 T/VGH) 細胞的 NAT1基因的表現受到抑制。因為 Paclitaxel 可 性的細胞死亡，而且 Paclitaxel 也會使(HA 22 T/VGH)細胞的細胞週期停止在 G2/M 期。Paclitaxel 會降低人類肝癌細胞株((HA 22 T/VGH)細胞胞質液中的 NAT 活性，但這是否跟 Paclitaxel 抗癌效應有關，仍待進一步的研究證實。
由本實驗顯示 Paclitaxel 可以造成人類肝癌細胞(HA 22 T/VGH)的死亡，且 隨濃度增加，效果越趨明顯，這是否意味臨床上可以使用 Paclitaxel 治療肝細 胞癌病患？此外亦需考慮藥物對人體的副作用或其它不良藥物反應(似乎需進 一步做臨床研究來證實)。
故 Paclitaxel 之癌細胞毒殺作用與藥物濃度和接觸時間有關。而在臨床上
的研究發現，若肝癌細胞侵犯到門靜脈較肝靜脈枝等血管或廣泛性擴散時，
都會影響肝癌的切除效果。如果能在手術前，給予化學治療 (Neoadjuvant chemotherapy)，使腫瘤體積縮小，以利切除或在手術後進行輔助性化學治療 (adjuvant chemotherapy)或許能提升病患的存活率。Paclitaxel 因而即可能成為 此類效用的藥物之一。